CGRP、EGF及TGF-β1与创伤性骨折患者应激状态及骨折愈合的关系

周伟 罗亮 向勇 阳运康

随着经济的发展，机动车量的增多，创伤性骨折发生率不断上升，临床多采用影像学检查（数字X 线摄影、电子计算机断层扫描）确诊［1-2］。机体发生创伤性骨折后，会发生不同程度的应激反应，若不及时予以干预措施，会增加患者发生深静脉血栓的风险，不利于骨结构重建，影响患者康复［3］。降钙素基因相关肽（Calcitonin-generelated peptide，CGRP）是一种神经肽，国外文献报道，CGRP 是神经系统影响骨代谢及骨重建的重要因子，可促进骨损伤修复［4］。相关研究报道，表皮生长因子（Epidermal Growth Factor，EGF）及转化生长因子-β1（Transforming growth facter-β1，TGF-β1）参与骨愈合的过程［5-6］。本研究旨在探讨CGRP、EGF 及TGF-β1 与创伤性骨折患者应激状态、骨折愈合的相关性，以期为临床治疗创伤性骨折提供指导。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年5月至2019年5月在本院进行治疗的116 例创伤性骨折患者设为观察组。纳入标准：①均经X 线检查，确诊为创伤性骨折，并符合骨科相关诊断标准［7］；②临床资料及影像资料完整；③年龄在80 岁以下。排除标准：①凝血功能障碍者、合并心、肝、肾等重要器官严重疾病者；②纳入研究前服用过影响CGRP、EGF 及TGF-β1 水平的药物者；③合并其他器官严重创伤者、全身感染性疾病者；④治疗依从性不佳者。

治疗4 个月后根据LaneSandhuX 线评分［8］评估患者骨折愈合情况，分为愈合良好组（n=62），其中男38 例，女24 例；平均年龄（48.39±6.03）岁；骨折部位：上肢骨折35 例、下肢骨折27 例。愈合不良组（n=54），其中男34 例，女20 例；平均年龄（48.50±6.09）岁；骨折部位：上肢骨折31 例、下肢骨折23 例。观察组男72 例，女44 例；平均年龄（48.65±6.12）岁；骨折部位：上肢骨折63 例、下肢骨折53 例。选取同期本院的120 例健康体检者设为对照组，男53 例，女67 例；平均年龄（48.73±6.19）岁。2 组基线资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 CGRP、EGF 及TGF-β1 检测方法

观察组在入院第2日清晨空腹、对照组在体检当日清晨空腹抽取静脉血3 mL，常温1 000 r/min、离心10 min，分离血清及血浆，样本置于-20℃下保存待检。采用采用葡萄糖氧化酶法检测CGRP 水平，放射免疫法检测EGF 及TGF-β1 水平。检测仪器为日立全自动生化分析仪检测，相关试剂盒采购于北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2.2 应激指标检测方法

采用ELISA 试剂盒（赛默飞世尔有限公司）检测所有研究对象血清氧化应激指标：超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和丙二醛（malondialdehyde，MDA），检测过程依据说明书进行。

1.2.3 骨折愈合标准

由两名放射科医师采用LaneSandhuX 线评分标准［8］评估患者的骨折愈合情况，该评分包括骨形成、连接及塑性三个方面，分值为0～12 分，分值越高则表明骨折愈合程度越高。观察CGRP、EGF 及TGF-β1 与骨折愈合进度的相关性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计量资料以（）表示，采用t检验；计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；采用Pearson 直线相关分析CGRP、EGF 及TGF-β1 与创伤性骨折患者Lane-Sandhu X线评分的相关性；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组CGRP、EGF、TGF-β1及应激指标水平比较

观察组CGRP、EGF、TGF-β1、MDA 水平明显高于对照组，SOD 水平明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 2 组CGRP、EGF、TGF-β1 及应激指标水平水平对比（±s）Table 1 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels between the two groups（±s）

表1 2 组CGRP、EGF、TGF-β1 及应激指标水平水平对比（±s）Table 1 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels between the two groups（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 116 120 CGRP（pg/mL）63.25±6.89 37.67±5.68 31.165＜0.001 EGF（μg/L）1.34±0.32 0.53±0.15 25.031＜0.001 TGF-β1（μg/L）45.12±5.26 8.89±1.88 70.916＜0.001 SOD（nU/mL）72.65±4.32 90.05±5.25 27.751＜0.001 MDA（μmol/L）6.32±0.78 2.22±0.54 47.082＜0.001

2.2 不同骨折愈合情况的患者CGRP、EGF、TGF-β1水平、应激指标水平比较

愈合良好组CGRP、EGF、TGF-β1、MDA 水平明显低于愈合不良组，SOD 水平明显高于愈合不良组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同骨折愈合情况的患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平、应激指标水平比较（±s）Table 2 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β 1 levels and stress index levels in patients with different fracture healing conditions（±s）

表2 不同骨折愈合情况的患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平、应激指标水平比较（±s）Table 2 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β 1 levels and stress index levels in patients with different fracture healing conditions（±s）

组别愈合良好愈合不良t 值P 值n 116 120 CGRP（pg/mL）53.45±6.24 75.45±8.45 20.414＜0.001 EGF（μg/L）1.12±0.28 1.68±0.43 8.412＜0.001 TGF-β1（μg/L）40.25±4.81 51.36±5.75 11.330＜0.001 SOD（nU/mL）76.65±4.68 62.35±4.10 17.382＜0.001 MDA（μmol/L）5.89±0.70 6.67±0.89 5.278＜0.001

2.3 CGRP、EGF 及TGF-β1 与应激指标水平相关性分析

CGRP、EGF 及TGF-β1 与SOD 水平呈负相关（P＜0.05），与MDA 水平呈正相关（P＜0.05）。见表3。

表3 CGRP、EGF 及TGF-β1 与应激指标水平相关性分析Table 3 Correlation Analysis of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels

2.4 GRP、EGF 及TGF-β1 与Lane-Sandhu X 线评分的相关性

CGRP（r=-0.568）、EGF（r=-0.325）及TGF-β1水平（r=-0.631）与Lane-Sandhu X 线评分呈负相关（P＜0.05）。见图1。

图1 CGRP、EGF 及TGF-β1 与Lane-Sandhu X 线评分的相关性分析Figure 1 Correlation Analysis of CGRP，EGF，TGF-β1 and lane Sandhu X-ray score

3 讨论

发生创伤性骨折时，患者机体内会发生一些急性期反应，会导致实验室相关指标水平变化［9］。本研究重点分析不同愈合情况的创伤性骨折患者血清CGRP、EGF 及TGF-β1 水平情况，确定创伤性骨折患者应激反应及骨折愈合情况是否与CGRP、EGF 及TGF-β1 水平存在关系。

CGRP 是一种神经肽，在骨组织中分布较广，多项研究表明CGRP 在骨代谢及骨损伤病理过程中发挥重要作用［10］。CGRP 可通过与靶细胞表面的受体结合，发挥功能作用［11］。本研究中，愈合良好组CGRP 水平显著低于愈合不良组，这一研究结果与Mollahosseini 等学者［12］报道结果相一致。Lee 等学者［13］通过动物实验得出，颅骨骨折的大鼠血清CGRP 水平明显高于正常大鼠，且局部CGRPmRNA 表达明显升高。可见血清CGRP 浓度的变化对骨折愈合意义重大。

国外文献报道，在创伤组织修复过程中，细胞因子可调节局部细胞的活性以促进细胞增殖［14］。有学者发现，EGF 是由炎症细胞以及单核细胞分泌而来的细胞因子，其能对细胞成纤维细胞以及表皮细胞等产生有效的修复作用，并可促进细胞分裂增殖及向骨细胞转化，加速骨折的修复［15］。TGF-β1 可促进胶原合成，同时还能够增加非胶原蛋白合成，如纤维连接蛋白、胶状蛋白与内皮素，调节整合素，促进细胞外基质蛋白合成，促进骨折愈合。

SOD 为体内重要活性物质，对创伤性患者骨折后的愈合进度具有积极作用，MDA 能有效反映体内脂质过氧化程度，两者的检测能有效地反应出患者机体应激反应［16］。Lane-Sandhu X 线评分为临床常用的评估骨折患骨形成、骨连接、骨塑型情况的标准［17］。检索国内外文献，尚未见CGRP、EGF、TGF-β1 水平与SOD、MDA、Lane-Sandhu X线评分相关的报道。本研究结果显示，CGRP、EGF、TGF-β1 与SOD 水平、Lane-Sandhu X 线评分呈负相关，与MDA 水平呈正相关。可见，CGRP、EGF、TGF-β1 与创伤性骨折患者应激反应程度、骨折愈合情况密切相关。因此，在患者骨折发生后2周左右检测CGRP、EGF、TGF-β1 水平是评估患者预后状态的最佳时机。

综上所述，CGRP、EGF、TGF-β1 可作为观察创伤性骨折患者应激反应、骨折愈合情况的重要指标，临床需加强动态加测创伤性骨折患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平。后续将扩大研究范围，进一步分析CGRP、EGF、TGF-β1 对评估创伤性骨折患者应激反应程度、骨折愈合情况的灵敏度及特异度，增加诊断准确性。