血p-Tau181、Aβ1-42与老年阿尔茨海默病病人认知关系的研究

尹倩然 郝敬波 卢海龙 吕丽丽 周晓兵 杨荣礼

作者单位：221000 江苏省徐州市，徐州医科大学附属医院老年科

AD是老年人痴呆的主要种类。痴呆的治疗目前尚无特效药物，早发现、早干预从而减慢痴呆进程具有重要临床意义。研究表明，AD病人脑脊液中磷酸化Tau181(p-Tau181)；β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)水平明显高于正常病人，且上述2项指标的水平可以用来区分AD和其他形式的痴呆[1-2]。但是，脑脊液检查是一种有创检查，大多数病人不愿意配合。本研究旨在分析血浆中p-Tau181、Aβ1-42浓度和AD病人认知之间的关系，供临床参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 病例资料 选取2019年1月至2020年1月在徐州医科大学附属医院神经内科和老年科住院的≥60岁老年病人123例，分为3组。无AD且无轻度认知功能障碍(MCI)的病人(对照组)33例，男20例，女13例，平均年龄(72.27±6.80)岁；AD组45例，男30例，女15例，平均年龄(74.51±9.82)岁；MCI组45例，男31例，女14例，平均年龄(71.17±10.89)岁。3组病人性别、年龄、教育程度等一般资料比较差异无统计学意义 (P>0．05)。见表1。本研究已通过医院伦理委员会审查。

1.2 纳入标准 (1)所有病人年龄均>60岁。(2)AD组符合美国国立神经语言障碍卒中研究所和AD及相关疾病学会 (NINCDS-ADRDA)制定的AD诊断标准。均已完善头颅CT或MRI及神经影像学检查。(3)MCI病人：根据2006年欧洲阿尔茨海默病协会制定的MCI定义，结合MMSE量表，且病人Hachinski缺血评分<4分。(4)正常组均无神经精神疾病病史，无痴呆及中枢神经系统疾病表现，常规实验室检查均处于正常范围，并经MMSE量表和临床痴呆评定量表(CDR)证实。

1.3 排除标准 (1)严重的心肺疾病；(2)恶性肿瘤；(3)脑血管病、帕金森病、正常颅压脑积水、脑瘤、脱髓鞘疾病、精神疾病等、糖尿病控制不良(HbA1c>8.0)、心肌梗死(过去6个月内);(4)老年抑郁量表(GDS-S)>9分或改良Rankin量表(GRS)>3分。

1.4 方法

1.4.1 试验方法：所有分组病人进行MMSE量表及CDR量表评估。所有病人采用有惰性分离胶或促凝剂的黄盖采血管采集血液，抽血后放置15 min使之凝固，再离心分离血清，4 ℃保持待测。采用全自动酶标仪(帝肯奥地利有限责任公司)，ELISA法测定p-Tau181、Aβ1-42的含量，试剂盒由深圳市安群生物工程有限公司提供。以校准品浓度取对数作横坐标，OD值取对数作纵坐标，进行直线拟合，绘制标准曲线。通过待测样本的 OD值在标准曲线上查出其对应浓度值。

1.4.2 观察指标：记录3组病人的MMSE和CDR评分，并检测3组病人血浆p-Tau181、Aβ1-42水平。

2 结果

2.1 各组观察指标比较 MCI组和AD组CDR评分明显高于对照组，MMSE评分显著低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。AD组及MCI组血浆p-Tau181和Aβ1-42水平明显高于对照组，且AD 组上述指标水平高于MCI组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组一般资料及检测结果比较

2.2 血浆生物标记物浓度与MMSE评分之间的关系 血浆p-Tau181和Aβ1-42与MMSE评分之间均呈显著负相关(r=-0.898，-0.523，P均<0.01)。

3 讨论

我国作为人口大国，老年人在我国人口占比中越来越大，作为发病率较高的老年痴呆，给社会和家庭都带来了经济和照顾的压力。很多老年痴呆患者发病过程比较隐匿，症状不典型，诊断比较困难。发现把痴呆血浆生物标志物检测作为老年痴呆的筛查手段具有重要意义。

我们研究发现血浆Aβ1-42水平与老年病人认知障碍的严重程度呈显著负相关。本研究结果表明，血浆水平Aβ1-42能有助于确定认知损害的严重程度。大脑中的淀粉样斑块是AD的病理特征之一，血浆中的Aβ1-42水平可用于评估大脑中淀粉样斑块的形成[3-4]。PET显示，血浆Aβ1-42水平与额叶、顶叶、颞叶和丘脑前叶的淀粉样斑块面积中度相关[5]。Aβ的高积累会增加大脑的毒性，并可能导致严重的认知障碍或下降[6]。有部分研究者发现AD组MMSE评分与总Aβ水平之间的相关性[7]，还有一些研究已经通过IMR检测方法对MCI及AD病人的血浆生物标记物进行了探索，并得出结论：血浆Aβ1-42是一种有用的AD生物标记物[8]，这些发现与我们的发现相同。但是有部分研究发现，Aβ1-42只是与AD有一定负相关趋势，不是有用的AD生物学标记物[9]，可能是使用不同的生物分析方法试剂，或者是不同Aβ聚集或Aβ与其他蛋白质结合的分析能力，导致了研究结果之间的差异。

在本研究中，老年AD病人血浆p-Tau181水平较正常病人升高，并且与MMSE评分呈现显著负相关。Tau蛋白缠结在大脑中的积聚是AD另外一个病理特征，t-Tau主要起稳定轴突微管的作用。在AD病人中，Tau蛋白在脑中大量表达，导致脑脊液和血浆中t-Tau浓度的变化。这种变化通常伴随着神经损伤和疾病后期的脑萎缩[10]。研究表明，灰质、海马和杏仁核体积的减少有助于t-Tau血浆水平的升高。脑萎缩与认知功能障碍有关，因此血浆t-Tau浓度随着认知能力下降的进展而增加。生物学上，Tau蛋白的高磷酸化可直接导致AD病人的神经元或轴突死亡，因此，p-Tau也被认为是AD早期检测的潜在生物标记物[11]。研究表明AD病人脑脊液中p-Tau水平明显高于正常病人。脑脊液中p-Tau的水平也可以用来区分AD和其他形式的痴呆[1-2]。测定脑脊液中p-Tau水平可提高AD诊断的敏感性和特异性，提高诊断的准确性。此外，最近的发展促进了对血液样本中p-Tau水平的评估，表明血浆p-Tau水平可用于监测AD病人的神经变性。事实上，一项研究指出，p-Tau181水平可用于早期AD病人疾病严重程度的分类[11]。

我们的结果支持这样的观点：血浆中的生物标记物水平p-Tau181和Aβ1-42蛋白的组合可用于区分AD的前驱期和痴呆期，血浆p-Tau181、Aβ1-42水平可用于分析早期AD病人的严重程度。

总之，MCI和AD病人的血浆p-Tau181、Aβ1-42与MMSE评分相关。血浆p-Tau181、Aβ1-42水平可用于评估老年MCI及AD病人认知障碍的严重程度及其变化。本研究局限于有认知测试结果的临床病人，我们没有获得脑脊液样本或淀粉样蛋白或Tau-PET扫描，以研究认知变化与其他生物标记物(如脑脊液标记物和成像)之间的相关性，下一步加强这方面研究。