干扰素释放试验联合CFP10 抗原检测诊断结核性胸腔积液对灵敏度、特异性及准确性的影响

李合林，周璟

（中国科学院大学深圳医院（光明），广东 深圳 518106）

0 引言

胸腔积液是多种疾病的共同临床表现，其中以渗出性液多见，病因包括胸膜炎症、胸膜肿瘤、膈下炎症和结缔组织病等。临床上以结核性和肿瘤性胸腔积液的诊断和鉴别诊断尤为重要，两者一旦误诊将会带来严重的后果[1]。结核性胸腔积液的临床诊断一直是一个难题，因在痰液和胸水中难以找到抗酸杆菌，胸腔积液中结核分枝杆菌涂片和培养的阳性率仅为1.7%～24.5%，而采用胸膜活检则阳性率也很低，也容易造成漏诊和误诊。目前结核性胸腔积液的诊断方法主要包括胸腔积液生化检查、结核菌素皮试、胸腔积液细菌学检查、组织病理活检，影像学检查以及临床特征表现等。但上述这些检查方法由于其特异性和敏感性均较低，都无法满足临床需要，因此需寻找更为有效的检测方式[2]。本文主要分析干扰素释放试验联合CFP10抗原检测诊断结核性胸腔积液对灵敏度、特异性及准确性的影响，具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选取2020年6月至2021年6月收治的胸腔积液患者60例，根据最终是否诊断结核性分为两组：分为结核性胸腔积液组（n=30）和非结核性胸腔积液组（n=30）。其中结核性胸腔积液组，男16例，女14例，年龄28～75岁，平均（43.84±8.64）岁，病程8～10周，平均（9.23±0.25）周；非结核性胸腔积液组，男15例，女15例，年龄29～75岁，平均（43.65±8.57）岁，病程8～11周，平均（9.33±0.36）周。使用统计学软件对两组患者一般资料进行分析后显示，其年龄、性别、病程等差异对本次研究结果无影响，无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。纳入标准：①本次研究所选患者均自愿参与本研究，对本次研究完全知情并签署知情同意书；②本次研究所有患者均符合胸腔积液诊断标准并经临床检查确诊；③本次研究所有患者均为神志清醒、无沟通障碍、具有自主行为能力的患者。排除标准：①排除临床资料不完整的患者；②排除不愿意参与本次研究的患者；③排除患有精神类疾病、沟通障碍、无自主行为能力的患者。

1.2 方法[3]。给予结核性胸腔积液组和非结核性胸腔积液组患者干扰素释放试验和CFP10抗原检测，具体方法如下：

1.2.1 样本采集：所有患者抽取空腹外周静脉血20 mL，对患者实施标准胸膜穿刺术，采集胸腔积液100 mL，将离心获得的血清样本、血单个核细胞样本和胸腔积液PEMC样本置于-80℃冰箱保存备用，2 h内送实验室检测。

1.2.2 干扰素释放试验：采用结核感染T细胞酶联免疫斑点试验进行检测：将血清、血单个核细胞样本及胸腔积液PEMC样本采用0.9%氯化钠溶液重悬，调整细胞浓度为2.0×10/mL，使用Oxford Immunotec公司的TSPOT.TB试剂盒于4 h内完成检测。

1.2.3 CFP10抗原检测：采用双抗体夹心法，将10Oul标准品或胸腔积液标本加入包被了CFP10蛋白单克隆抗体的微孔中，20℃振荡孵育1 h，洗涤3次后，加入用分析缓冲液进行1∶100稀释的Eu3+-抗CFP10蛋白单克隆抗体100μL，20℃振荡孵育1 h，洗涤5次。滴入增强液100ul，振荡10 min，于荧光检测仪（1235 Auto DELFIA，美国Perkin Elmer公司）上测定荧光值，最后依据标准曲线计算出标本中CFP10蛋白的含量。

1.3 观察指标。本研究需收集两组患者检测结果，判断干扰素释放试验和CFP10抗原检测的灵敏度、特异性及准确性，并且以细菌学检查结果为金标准，判断这两种检测方法的准确性高低。

1.4 统计学分析。使用SPSS 20.0软件对本次研究所得数据进行统计学分析，使用χ2和%表示计数资料，P＜0.05表示数据对比差异显著，有统计学意义。

2 结果

干扰素释放试验联合CFP10抗原检测的灵敏度、特异性及准确度。经过检测发现，干扰素释放试验和CFP10抗原检测在结核性胸腔积液组患者中的检测灵敏度、特异性均高于非结核性胸腔积液组患者。干扰素释放试验在诊断结核性胸腔积液中灵敏度为96.5%，特异性为87.5%，准确性为93.4%，阳性预测值为95.6%，阴性预测值为87.5%；CFP10抗原检测的灵敏度与特异度分别为96.23%与 94.00%，并且CFP10抗原检测的准确性为95.51%。见表1。

表1 干扰素释放试验联合CFP10抗原检测的灵敏度、特异性及准确度（n，%）

3 讨论

到目前为止，结核病仍是全球前10位死因之一，自2007年以来一直位居单一传染性疾病死因之首[4]。近年来，我国结核病防治工作取得了很大进步，肺结核疫情呈逐年下降趋势，发病人数位居世界第三位，但是我国结核病防治工作还面临着结核病流动性传播、耐多药结核病和结核菌、艾滋病病毒双重感染等新的挑战。结核性胸腔积液是最常见的肺外结核，在我国发病率极高，胸腔积液作为临床常见的病症，比较严重的类型有结核性与恶性渗出性胸腔积液。目前胸腔积液结核杆菌培养或涂片使结核性胸腔积液的诊断与鉴别诊断比较困难，检测抗酸杆菌的阳性率偏低[5]。胸腔积液尤其是渗出性胸腔积液是临床诊断上的一个难点，在临床上不少患者是经过抗结核治疗后才明确诊断。因此，寻找一种有效的试验检测结核性胸腔积液显得尤为重要。

细菌学检查阳性是结核病诊断的金标准，但由于胸腔积液中含菌量少，对于细菌学阴性、临床无结核毒血症状表现的患者诊断尤为困难，其特异性和敏感性均较低，都无法满足临床需要多数情况只能依赖结核诊断性治疗来明确诊断。由于现阶段大多数诊断方式对于结核性胸腔积液的诊断都较为困难，因此需寻求更为有效的诊断方式。近年来，γ－干扰素释放试验被认为是结核病诊断方面的重大突破。干扰素释放试验中的IFN-γ，作为一种分泌蛋白，基因位于人体的第12条染色体上，IFN-γ主要是由抗原和有丝分裂原诱发而来，有研究表明结核性胸腔积液内有结核菌侵入胸腔，引起T淋巴细胞大量增殖活化，产生大量的IFN-γ细胞促进巨噬细胞吞噬结核菌，可作为诊断结核性胸腔积液的参考指标[6]。同时，CFP10是一种特异性培养滤液蛋白，具有良好的抗原性，可作为特异性抗原诱导结核菌素试验（PPD）皮肤试验阳性者的良好指示剂[7]。在本次研究中联合使用干扰素释放试验和CFP10抗原检测发现，这两种方法在结核性胸腔积液的诊断中灵敏度、特异性及准确度均较高。

综上所述，干扰素释放试验联合CFP10抗原检测诊断结核性胸腔积液具有较高的灵敏度、特异性及准确性，可为临床治疗结核性胸腔积液提供科学可靠的参考依据。