气相色谱法测定1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐中1-溴-3-氯丙烷的残留

张曼玲，李朝娟，汤晓琴，杨 飞，门 靖，任亚宁

西安万隆制药股份有限公司，陕西 西安 710119

1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐，CAS号为52605-52-4，分子式C13H19Cl3N2，分子量309.66，作为一种重要的氯苯基哌嗪衍生物，在化工医药、有机合成领域有广泛的应用[1-2]。同时，1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐是制备抗抑郁药奈法唑酮(Nefazodone)、依托哌酮(Etoperidone)、曲唑酮(Trazodone)、非典型抗精神病药物伊潘立酮(Iloperidone)的关键中间体[3-7]，而制备1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐的经典合成路线是以1-溴-3-氯丙烷为起始原料，经与1-(3-氯苯基)哌嗪反应生成1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪再经成盐精制获得[8]。因此，1-溴-3-氯丙烷的分析及检测技术对原料药的品质至关重要。

吴成杰等[9]建立了一种气相色谱法(GC)检测1-溴-3氯丙烷在磷酸哌喹中的方法，色谱系统选用DB-1(30 m×0.32 mm,3.0 μm)气相色谱柱，程序升温，氢火焰离子化检测器，分流比为5∶1，测试表明样品1-溴-3氯丙烷在1～15 μg/mL内进样，外标法以峰面积计，线性关系良好，平均回收率为99.5%，最低检测质量浓度为0.227 2 μg/mL。杨茉等[10]开发了GC检测伊潘立酮中1-溴-3-氯丙烷的方法，色谱系统采用DM-624(30 m×0.53 mm，3.0 μm)气相色谱柱，程序升温，氢火焰离子化检测器，分流比为3∶1，结果显示1-溴-3-氯丙烷在7.5～37.5 μg/mL内进样，呈现出良好的线性关系，平均回收率为99.4%，最低检测质量浓度为12.5 μg/mL。陈蓉等[11]采用顶空气相色谱法成功测定盐酸地拉卓原料药中1-溴-3-氯丙烷以及乙醇、丙酮和甲苯3种残留溶剂，以Agilent DB-WAX毛细管柱(30 m×0.32 mm，0.50 μm)为色谱柱，程序升温，氢火焰离子化检测器，以分流比5∶1测定1-溴-3-氯丙烷，以分流比50∶1测定乙醇、丙酮和甲苯，顶空进样，结果表明：1-溴-3-氯丙烷、乙醇、丙酮和甲苯在测试范围内线性关系均良好，达到实验检测要求。但是以上方法的操作都相对复杂，在实际应用中有一定的限制。

本研究在文献的基础上，开发一种基于GC测定1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐中1-溴-3-氯丙烷的残留方法，并进行优化，以此对1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐进行质量控制，以便获得操作简单、重复性好的1-溴-3-氯丙烷残留检测分析方法，以期为相关药物的质量控制及杂质质谱分析检测提供指导。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

1-溴-3-氯丙烷(含量≥98.0%)，Sigma公司；1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐(含量≥98.0%，批号：ZT-200501、ZT-200502、ZT-200503)，武汉欣欣佳丽生物科技有限公司；乙腈，色谱纯，国药集团试剂有限公司；纯化水，屈臣氏集团有限公司。

Agilent 7890B型气相色谱仪(FID检测器)，Agilent公司；MS105DU型电子天平，梅特勒-托利多公司。

1.2 色谱条件

色谱柱为Agilent DB-624毛细管柱(30 m×0.25 mm，1.8 μm)；程序升温为起始温度30 ℃，保持10 min，再以速率20 ℃/min升至220 ℃，保持10 min；检测器温度为240 ℃；进样口温度为220 ℃；载气为N2，流速为2.0 mL/min；分流比为5∶1。进样方式为直接进样，进样量1.0 μL。

1.3 溶液的配制

稀释剂为V(乙腈)∶V(水)=100∶1；稀释剂作为空白溶剂。

对照品溶液：称取1-溴-3-氯丙烷123.30 mg置于100 mL容量瓶中，加稀释剂溶解至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液；精密量取1.0 mL置于20 mL容量瓶中，加稀释剂至刻度，摇匀备用。

供试品溶液：称取1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐样品约1 g，精密称定，置10 mL容量瓶中，加稀释剂适量溶解并定容(采用0.25 μm过滤膜进行过滤前处理)。

2 结果与讨论

2.1 专属性及系统适用性

取空白溶剂、对照品溶液和供试品溶液(批号：ZT-200501)，分别进样检测，结果见图1。由图1可知：空白溶剂乙腈峰对1-溴-3-氯丙烷峰无干扰，1-溴-3-氯丙烷峰与溶剂峰的分离度良好，R>1.5。

2.2 线性关系

精密量取1-溴-3-氯丙烷的对照品储备溶液0.1、0.2、0.5、0.8、1.0和2.0 mL，分别置20 mL的量瓶中，加入稀释剂至刻度，摇匀(记为线性1～6)。取线性1～6的样品分别进样，将测得结果进行线性回归，回归方程为y=9 862.269 0x+595.595 4，相关系数r=0.999 6。由回归方程可知：1-溴-3-氯丙烷在6.18～122.40 μg/mL浓度范围内，与浓度成良好的线性关系，

图1 空白溶剂、对照品溶液和供试品的GC图

2.3 定量限与检出限

精密量取对照品溶液，用稀释剂逐级稀释，分别进样。按信噪比(S/N)=10∶1考察定量限，测得1-溴-3-氯丙烷的定量限为6.18 μg/mL。取定量限溶液连续进样6次，1-溴-3-氯丙烷峰面积的相对标准偏差(RSD)为1.86%(n=6)。按S/N=3∶1考察检出限，1-溴-3-氯丙烷检出限为1.51 μg/mL。

2.4 精密度试验

进样精密度：取对照品溶液连续进样6次，记录峰面积，结果发现：1-溴-3-氯丙烷峰面积的RSD为1.21%(n=6)，表明仪器精密度良好。

重复性试验：制备6份加标供试品液，色谱条件进样检测，记录峰面积并以外标法计算1-溴-3-氯丙烷的残留量，结果表明：6份加标供试品溶液测得1-溴-3-氯丙烷的残留量的平均值为0.049 1%，RSD为2.52%(n=6)，表明方法重复性良好。

中间精密度试验：不同时间、不同分析人员、不同的气相色谱仪进行重复性样品溶液制备12份，进样检测，记录峰面积并以外标法计算1-溴-3-氯丙烷的残留量。结果发现：12份加标供试品溶液测得1-溴-3-氯丙烷的残留量的平均值为0.48%，RSD为3.76%(n=12)，表明本方法重现性良好。

2.5 稳定性试验

取对照品溶液、供试品溶液，分别于室温放置0、4、8、12、16、20和24 h，分别进样检测，结果显示：24 h内对照品溶液1-溴-3-氯丙烷峰面积的RSD为2.63%(n=7)；24 h内重复性溶液1-溴-3-氯丙烷峰面积的RSD为2.95%(n=7)，表明对照品溶液、供试品溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。

2.6 准确度试验

取样品(批号：ZT-200501)适量，分别加入10%、100%、200%浓度的对照品溶液适量，制成10%加标供试品溶液、100%加标供试品溶液、200%加标供试品溶液，每个浓度平行制备3份。取各水平加标供试品溶液和供试品溶液分别进样检测，计算1-溴-3-氯丙烷的回收率，结果见表1。由表1可知：9份加标供试品溶液的回收率为90.78%～92.81%，平均回收率为91.77%，RSD为1.78%，表明本方法测定样品中1-溴-3-氯丙烷残留的准确度良好。

表1 准确度试验结果(n=9)

2.7 耐用性试验

考察载气流速、柱温、进样口温度等参数，在不同条件下测定1-溴-3-氯丙烷含量，结果见表2。由表2可知：耐用性结果的RSD为5.20%，表明该方法耐用性良好。

表2 耐用性试验结果

2.8 样品中1-溴-3-氯丙烷残留的测定

取样品适量，制备供试品溶液，分别进样检测，按外标法计算1-溴-3-氯丙烷的含量，结果见表3。由表3可知：3个批次的样品中都没有检出1-溴-3-氯丙烷含量。

表3 样品中1-溴-3-氯丙烷残留量测定结果(n=3)

3 结论

本研究开发了一种GC法分析测定1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐中1-溴-3-氯丙烷残留方法，探讨了GC测定过程中的影响因素，包括专属性、线性关系、定量限与检出限、精密度、稳定性、准确度、耐用性等，测试结果表明：在6.18～122.40 μg/mL范围内，呈现出良好的线性关系，其加标回收率为90.78%～92.81%，RSD为1.78%，定量限为6.18 μg/mL，检出限为1.51 μg/mL，稳定性和耐用性良好。

该检测方法操作简单、重复性好，对开发1-(3-氯苯基)-4-(3-氯丙基)哌嗪盐酸盐的质量控制和检测方法具有重要借鉴意义。