哈萨克族食管鳞癌患者癌组织中LncRNA H19的表达情况及临床意义

孙清超，宗 亮，张海平，张力为

（新疆医科大学第一附属医院胸外科，新疆 乌鲁木齐 830054）

调查显示，我国哈萨克族食管鳞癌的发病率高达155.9/10 万，比其他民族高2.3 倍[1]。食管鳞癌患者的病情十分隐匿，多数患者的病情都是在进入中期、晚期后才得到明确诊断，故此病患者的5 年生存率仅为14.6%～26.3%。尽早对食管鳞癌患者的病情进行准确的诊断并及时对其进行有针对性的治疗对降低其死亡率具有十分重要的意义。有研究表明，LncRNA H19 在多类肿瘤的发生、发展中起到十分关键的作用[2]。在本文中，笔者主要是研究哈萨克族食管鳞癌患者癌组织中LncRNA H19 的表达情况及相关临床意义。

1 对象和方法

1.1 研究对象

回顾分析2014 年7 月至2015 年12 月在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的80 例哈萨克族食管鳞癌患者的临床资料。在这80 例患者中，有男51 例，女29 例；其年龄为35 ～78 岁，平均年龄（51.6±4.1）岁；其中发病部位为胸上段食管的患者有10 例，为胸中段食管的患者有24 例，为胸下段食管的患者有46 例；其中低分化食管鳞癌患者、中分化食管鳞癌患者、高分化食管鳞癌患者分别有18 例、36 例、26 例；其中Ⅰ期食管鳞癌患者、Ⅱ期食管鳞癌患者、Ⅲ期食管鳞癌患者、Ⅳ期食管鳞癌患者分别有17例、29 例、25 例、9 例。

1.2 研究对象的纳入及排除标准

纳入标准：1）经病理检查被确诊患有食管鳞癌；2）民族为哈萨克族；3）未接受过抗肿瘤治疗；4）其本人及其家属均同意参与本研究，并签署相关书面协议。排除标准：1）病历资料不完整；2）发生肿瘤远处转移；3）无法正常接受随访。

1.3 方法

1.3.1 LncRNA H19 检测 对这80 例患者进行LncRNA H19 检测的方法是：对患者的瘤体组织进行切除。同时，切取肿瘤周围的正常组织（切缘距离肿瘤的距离应＞5 cm）。于十分严格的无菌环境中，用配套试剂盒提取上述组织的总RNA，检测其总RNA 溶液的吸光度。再以LncRNA H19 作引物和总RNA 逆转录的cDNA 作模板进行PCR 反应，将miRNA U6 的Ct值作为内参照，计算得出LncRNA H19 的相对表达量。1.3.2 随访 对这80 例患者进行为期5 年的随访，采用门诊复查、电话回访等方式了解并记录其5 年生存率和中位生存期。

1.3.3 资料分析 收集这些患者的年龄、肿瘤所在位置、病情恶化与否等资料，分析其各项指标与LncRNA H19 表达水平的关系。观察其中位生存期，并分析影响其中位生存期的因素。根据癌组织中LncRNA H19 表达水平的高低将其分为LncRNA H19 高表达组〔45 例，LncRNA H19 的相对表达量＞（7.57±0.14）〕与LncRNA H19 低表达组〔35例，LncRNA H19 的相对表达量≤（7.57±0.14）〕，并对比两组患者的各项临床指标。

1.4 统计学方法

对本研究所得数据均采用SPSS 22.0 软件进行处理，计量资料用均数± 标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ²检验或F 检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 这些患者癌组织与癌旁组织中LncRNAH19 的表达水平

这些患者癌组织中LncRNA H19 的相对表达量〔（7.57±0.14）〕高于其癌旁组织中LncRNA H19 的相对表达量〔（1.37±0.08）〕，P＜0.05。

2.2 LncRNAH19 高表达组患者与LncRNAH19 低表达组患者临床资料的比较

LncRNA H19 高表达组患者中肿瘤临床分期为Ⅰ～Ⅳ期患者的例数分别为8 例、12 例、18 例、7 例，其中肿瘤处于进展期的患者有19 例。LncRNA H19 低表达组患者中肿瘤临床分期为Ⅰ～Ⅳ期患者的例数分别为9 例、17 例、7 例、2 例，其中肿瘤处于进展期的患者有5 例。两组患者的肿瘤临床分期相比，P＜0.05。两组患者的年龄（＞60 岁、≤60岁）、性别（男、女）、肿瘤所在部位（胸上段食管、胸中段食管、胸下段食管）、肿瘤分化程度（低、中、高分化）相比，P＞0.05。

2.3 这些患者癌组织中LncRNAH19 表达水平与其生存率的关系

这80 例患者的随访时间为5 ～60 个月，平均随访时间（37.4±4.2）个月。LncRNA H19 高表达组患者的5 年生存率（20.7%）低于LncRNA H19 低表达组患者的5 年生存率（38.6%），χ²=4.715，P=0.005。详见图1。

图1 这些患者LncRNA H19 表达水平与其生存率的关系

2.4 对这些患者的临床资料进行单因素分析的结果

这些患者中各个肿瘤临床分期患者的中位生存期相比，P＜0.05。这些患者中肿瘤处于进展期的患者与肿瘤未处于进展期患者的中位生存期相比，P＜0.05。这些患者中LncRNA H19 在癌组织中呈高表达的患者与LncRNA H19 在癌组织中呈低表达患者的中位生存期相比，P＜0.05。详见表1。

表1 对这些患者的临床资料进行单因素分析的结果

2.5 对这些患者的临床资料进行多因素logistic 回归分析的结果

进行多因素Logistic 回归分析的结果显示，肿瘤的临床分期、肿瘤是否处于进展期、癌组织中LncRNA H19 的表达水平是这些患者中位生存期的影响因素，P＜0.05。详见表2。

表2 对这些患者的临床资料进行多因素logistic 回归分析的结果

3 讨论

在食管鳞癌的发生发展中，遗传因素是十分重要的影响因素。其中，抑癌基因失活、原癌基因被激活是诱发食管鳞癌的主要因素[3]。LncRNA H19 位于人染色体11p15.5，全长2.7 kb, 是一个母系表达父系印记的基因，在多种肿瘤的发生发展中起着重要的作用。以往有研究发现，LncRNA H19 在肺癌、膀胱癌等癌症患者的癌组织中均呈高表达水平。这与本研究的结果相一致。程勇等[4]在研究中指出，LncRNA H19 可通过靶向调控miR-675/EHZ2 来影响结肠癌细胞的增殖。赵军方等[5]在研究中指出，LncRNA H19 可通过靶向调控miR-107/CDK6 信号轴来影响口腔癌细胞的侵袭及迁移能力[5]。近年来，随着临床上对LncRNA H19 研究的不断深入，其在多种肿瘤发生发展中的作用相继被证实。有研究指出，食管鳞癌患者癌组织中LncRNA H19 的表达水平越高，其预后越差。此病患者食管壁出现的癌转移及浸润程度的变化均与LncRNA H19 在其癌组织中的表达水平密切相关。食管鳞癌的发生机制十分复杂，LncRNA H19 并不是诱发此病的唯一基因[6]。就目前的研究结果来看，我们仍需对这些致病基因间的相互作用做进一步的研究。

本研究的结果表明，哈萨克族食管鳞癌患者癌组织中LncRNA H19 的表达水平高于其癌旁组织，其癌组织中LncRNA H19 的表达水平是其预后的影响因素。