溶血三项联合血清总胆红素检测对新生儿溶血病早期诊断的临床价值

江蓝玉，方莉敏，朱瑜，双鸥

江西省上饶市人民医院输血科 （江西上饶 334000）

新生儿溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是指由于母婴血型不合导致的同族免疫性溶血疾病[1]。该病临床表现为水肿、黄疸、贫血或肝脾肿大等，倘若诊断治疗不及时，可能会诱发新生儿胆红素脑病、胆汁黏稠综合征，严重者甚至引发呼吸、循环系统衰竭等，严重危害新生儿的生命安全[2]。现阶段，临床上针对HDN 的诊断通常采用溶血三项检测。近年来，相关研究表明，血清总胆红素水平对诊断HDN 具有重要价值，但有关溶血三项联合血清总胆红素检测对HDN 诊断有效性的研究成果却并不多见[3]。本研究探讨溶血三项联合血清总胆红素检测对HDN 早期诊断的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年3月至2020年5月我院接收的100例HDN 患儿，其中男62例，女38例；产妇血型均为O 型RhD 阳性；患儿血型，B 型32例，A 型41例，O 型27例；患儿日龄2 h 至18 d，平均（6.5+1.5）d。患儿均出现水肿、黄疸、贫血或肝脾肿大等临床症状，并排除先天性肝、胆系统疾病。本研究经医院医学伦理委员会批准，患儿家属均签署知情同意书。

1.2 方法

（1）溶血三项检测：应用抗人球蛋白检测卡（天津德祥生物技术有限公司）、人ABO 血型正/反定型和Rh（D）血型检测卡（天津德祥生物技术有限公司）、专用检测卡离心机（杭州奥盛仪器有限公司，型号TD2-12）和37℃试剂卡孵育器（天津德祥生物技术有限公司，型号K37-24）进行溶血三项检测，于清晨抽取患儿3 ml 静脉血，依次进行直抗试验、游离试验和释放试验，所有操作均严格按照相关仪器和试剂使用说明书进行。（2）分组方法：根据溶血三项检测结果将患儿分为A、B、C、D 4组，其中A组为直抗试验（+）、游离试验（-）、释放试验（+），B 组为直抗试验（+）、游离试验（+）、释放试验（+），C 组为直抗试验（-）、游离试验（-）、释放试验（+），D 组为直抗试验（-）、游离试验（+）、释放试验（+）。（3）血清总胆红素检测：应用全自动生化分析仪（西门子，型号ADVIA2400）采用常规生化法测定4组的血清总胆红素水平（正常值参考范围为1.71～17.1 mmol/L）。（4）治疗方法：根据患儿具体病情给予差异化治疗，如丙种球蛋白静脉注射、蓝光光疗等。

1.3 观察指标

（1）比较溶血三项联合血清总胆红素检测和溶血三项单独检测对HDN 的早期诊断情况。（2）比较4组治疗前后的血清总胆红素水平。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 联合检测和溶血三项单独检测对HDN 的早期诊断情况

联合检测对HDN 的早期检出率为97%（97/100），高于溶血三项单独检测的85%（85/100），差异有统计学意义（χ2=5.945，P＜0.05）。溶血三项单独检测对HDN 的检出情况见表1。

表1 溶血三项单独检测对HDN 的检出情况

2.2 4组血清总胆红素水平比较

治疗前，4组血清总胆红素水平比较，差异无统计学意义（F=1.39，P＞0.05）；治疗后，4组的血清总胆红素水平均低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 4组血清总胆红素水平比较（mmol/L，±s）

表2 4组血清总胆红素水平比较（mmol/L，±s）

组别 例数 治疗前 治疗后 t P A 8 251.12±66.05 181.82±35.05 0.03 ＜0.05 B 10 264.06±85.71 192.13±65.07 2.63 ＜0.05 C 26 243.93±85.45 184.31±42.17 3.56 ＜0.05 D 41 252.33±84.29 184.72±47.89 4.81 ＜0.05

3 讨论

在妊娠过程中，胎儿的胎盘血管通过单层合体细胞与血窦间隔，伴随妊娠周期的增长，单层合体细胞的间隙不断增大，血细胞逐渐从血管渗透至产妇循环系统，倘若母婴血型不合，胎儿的红细胞可激活母体免疫系统，并产生IgG 抗体，若IgG 抗体进入胎儿体内，可形成HDN[4-5]。目前，ABO 血型不合是我国最普遍的HDN 类型，但大多数由于ABO 血型不合导致的HDN 症状较轻，仅有超过6%的患儿表现出明显的溶血症状[6-7]。

目前，溶血三项检测是临床公认的诊断HDN 的有效方法，分为直抗试验、游离试验、释放试验3种[8-9]。直抗试验和释放试验能对患儿红细胞结合血型抗体进行检测，具有准确度和灵敏度高的特点，可作为诊断HDN 的重要指标。游离试验主要对患儿血清中的母体血型抗体进行检测，若结果呈阳性，提示新生儿血液中有母体带的IgG 抗－A（B），这种物质会对新生儿红细胞产生致敏效应，导致新生儿红细胞免疫性破坏，并引发严重后果。张少丰等[10]的研究认为，游离试验结果能够作为诊断HDN 的一项参考指标，但并非确诊依据。尽管溶血三项检测对诊断HDN 具有较强的参考价值，但近年来的相关研究也显示其检测结果存在假阴性。郭秋等[11]的研究发现，溶血三项检测结果容易受检测操作规范性、血液抽取时间、血液存放环境等因素的影响，导致出现假阴性。肖成等[12]的研究也证实，若血液标本保存时间过长、检测中晃动剧烈、保存环境温度过高或偏低，均会影响实验室检测结果的准确性。其他研究也得出相似结果[13-14]。因此，溶血三项单独检测作为HDN 的诊断依据仍存在一定缺陷。

胆红素是人体血液循环过程中，由衰老的红细胞在骨髓、脾脏、肝脏等器官的单核吞噬细胞系统中，经破坏分解形成的产物，分为间接胆红素和直接胆红素。健康人体的胆红素占总胆红素的80%～85%，其余15%～20%来自骨髓中无效造血的血红蛋白和含有亚铁血红素的C 血红蛋白物质[15]。临床研究表明，直接胆红素在HDN 诊断中具有重要的参考价值。杨冬梅和李志坚[16]的研究发现，HDN 患儿的血清总胆红素水平会在短时间内呈快速上升态势，并显著高于正常水平，提示血清总胆红素可作为诊断HDN 的关键性指标。杨军等[17]的研究证实，脐带血总胆红素水平检测对诊断早期HDN 具有显著价值，且可作为评估HDN 严重程度的依据，对患儿的预后评估也具有指导作用。但近年来也有研究认为血清总胆红素诊断HDN 受到多方面因素的影响，其准确度和灵敏度有待进一步证实。尹明伟等[18]的研究发现，患儿的日龄、母婴血型类型均可能影响血清总胆红素的检测结果，日龄越小的患儿采用血清总胆红素检测诊断HDN 的准确度越高。综合上述研究成果可得出结论，单一血清总胆红素检测作为HDN 的诊断依据也存在缺陷。

本研究在既往研究的基础上采用溶血三项联合血清总胆红素检测诊断HDN，探讨联合检测的早期诊断价值。结果显示，联合检测对HDN 的早期检出率高于溶血三项单独检测，4组治疗后血清总胆红素水平均低于治疗前。

综上所述，溶血三项联合血清总胆红素检测能够显著提升HDN 的早期检出率。