血清CXC 趋化因子配体9、血管内皮生长因子对肝癌介入治疗患者预后的评估价值

周玲，张郁秋，杜鲲

信阳市中心医院介入放射科，河南 信阳 464000

肝癌是临床常见消化系统恶性肿瘤，具有较高的发病率及病死率，研究指出，肝癌是世界第4大恶性肿瘤，中国肝癌患病率仅次于肺癌，发病率占全部恶性肿瘤10%，病死率占全部恶性肿瘤14%，严重威胁患者生命安全。介入治疗是临床常用的方法，但术后复发率较高，部分患者预后情况仍不理想，因此早期评估肝癌患者干预效果、预后情况十分必要。血管内皮生长因子（vascular endo-thelial growth factor，VEGF）与血管内皮细胞活动密切相关，促进内皮细胞增殖，并参与肿瘤生长、侵袭、转移等过程，因此，认为VEGF表达水平在某种程度上能够反映肿瘤生长速度及转移方向，而其在抗肿瘤治疗过程中的变化则能够提示临床改善情况。研究表明，趋化因子在肝癌的发生、发展过程中均具有重要作用，能够导致肝损伤、增加肝细胞癌的炎性环境，促进肿瘤发展，其中临床对于CXC趋化因子配体9（C-X-C chemokine ligand 9，CXCL9）研究较为深入，认为其在机体炎性反应、免疫疾病及肿瘤发生发展中均发挥重要作用，并推断其与肝癌密切相关，其水平变化能够反映病情进展及预后改善情况。基于上述理论研究，本研究探讨血清CXCL9、VEGF水平对肝癌介入治疗患者预后的评估价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—12月于信阳市中心医院确诊的肝癌患者。纳入标准：经病理穿刺诊断为原发性肝癌，符合《原发性肝癌规范化病理诊断指南》（2015年）中诊断标准；单发病灶；巴塞罗那临床肝癌分期（Barcelona clinic liver cancer，BCLC）为 B期或C期；卡氏功能状态（Karnofsky performance status，KPS）评分＞60分；均接受介入治疗；介入治疗前均未接受其他治疗；均接受血清CXCL9、VEGF、甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）水平检测；病历资料及随访资料完整。排除标准：合并其他恶性肿瘤；有感染或手术史；严重凝血功能障碍；大量腹腔积液或顽固性腹腔积液；自身免疫疾病及全身疾病；伴有远处转移，累及肝脏之外器官；弥漫性原发性肝癌；严重心、肺、肾等重要脏器功能不全或障碍；无法耐受介入治疗；生存期不足3个月。根据纳入与排除标准，共选取120例肝癌患者作为肝癌组，男86例，女34例；年龄32～75岁，平均（58.62±9.21）岁。另选取同期信阳市中心医院的健康体检者50例为对照组，男38例，女12例；年龄34～73岁，平均（59.01±8.76）岁。两组研究对象的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 肝癌组所有患者均接受介入治疗，具体方法参考《肝癌综合性介入治疗规范化方案（草案）》。患者取平卧位，碘伏常规消毒后采用Seldinger法行股动脉穿刺，插入导管后进行肝动脉造影，采用化疗药物吡柔比星、氟尿嘧啶、丝裂霉素及栓塞剂超液化碘油10～20 ml混合均匀，缓慢注入进行栓塞，并采用明胶海绵颗粒栓塞肝动脉。所有患者均进行三次经导管动脉栓塞化疗（transcatheter arterial chemoembolization，TACE），分别间隔30、60天，并予以止吐、保肝、抗感染、抑酸等常规对症处理。

1.2.2 检测方法 对照组患者入组第2天（默认为治疗前）及肝癌组患者介入治疗前、第一次介入治疗后3天、第一次介入治疗后7天时，均行空腹静脉采血3～5 ml，以3000 r/min（离心半径8 cm）离心10 min后收集血清，置于-70℃低温保存，并于1周内进行检测。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL9、VEGF、AFP水平。试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，所有操作步骤均严格按照说明书进行，所有试剂盒均有正式批文，符合要求。

1.3 观察指标及随访

治疗前、第一次介入治疗后3天、第一次介入治疗后7天，比较肝癌组与对照组血清CXCL9、VEGF、AFP水平。本研究分析CXCL9、VEGF与AFP之间的相关性。肝癌患者多次介入治疗完成后均接受为期3年的随访，每6个月进行一次随访，采用电话随访、门诊或走访等形式，随访截止时间为2019年12月，记录所有患者生存情况，所有患者均完成随访，无失访患者。依据随访结果，将肝癌患者分为生存组和死亡组，分析肝癌患者预后的影响因素及血清CXCL9、VEGF水平预测肝癌患者预后的临床价值。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 血清CXCL9、VEGF、AFP水平比较

治疗前和第一次介入治疗后3、7天，肝癌组患者的血清CXCL9、VEGF、AFP水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；第一次介入治疗后7天，肝癌组患者的血清CXCL9、VEGF、AFP水平均低于治疗前，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 治疗前和第一次介入治疗后肝癌组与对照组受试者血清CXCL9、VEGF、AFP水平比较（±s）

2.2 血清CXCL9、VEGF与AFP的相关性分析

经Pearson相关分析显示，血清CXCL9、VEGF与AFP均呈明显正相关（r=0.932、0.826，P＜0.01）。

2.3 随访结果

120例肝癌患者均全部完成随访，其中42例死亡，78例生存，3年生存率为65.00%（78/120）。

2.4 死亡组和生存组肝癌患者临床特征的比较

死亡组和生存组肝癌患者的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05）；死亡组与生存组肝癌患者分化程度、门静脉癌栓情况、CXCL9、VEGF、AFP水平比较，差异均有统计学意义（

P

＜0.05）。（表 2）

2.5 肝癌预后影响因素的Logistic回归分析

将表2中差异有统计学意义的因素作为自变量进行赋值，其中门静脉癌栓（否=0，是=1）、分化程度（高分化=0，中低分化=1）、CXCL9水平（≤912.35 pg/ml=0，＞912.35 pg/ml=1）、VEGF水平（≤403.21 pg/ml=0，＞403.21 pg/ml=1）、AFP 水平（≤753.44 ng/ml=0，＞753.44 ng/ml=1），将患者预后情况（生存=0，死亡=1）作为因变量纳入Logistic回归分析模型，结果显示，有门静脉癌栓、分化程度为中低分化及血清CXCL9＞912.35 pg/ml、VEGF＞403.21 pg/ml、AFP＞753.44 ng/ml均是肝癌患者预后的独立危险因素（

P

＜0.05）。（表3）

表2 死亡组和生存组肝癌组患者临床特征的比较

表3 肝癌患者预后影响因素的Logistic回归分析

2.6 术前血清CXCL9、VEGF 对肝癌患者预后的评估价值

通过ROC曲线可知，CXCL9、VEGF评估肝癌患者预后的AUC分别为0.927、0.978。（图1、表4）

表4 术前血清CXCL9、VEGF对肝癌患者预后的评估价值

图1 术前血清CXCL9、VEGF 水平预测肝癌患者预后的ROC曲线

3 讨论

肝癌发病隐匿，恶性程度较高，治疗困难，生存周期短，预后较差，是公认的较为严重的恶性肿瘤之一，早期肝癌患者主要采取手术进行根治治疗，而中晚期患者则依据实际情况予以部分切除术，以延长生存期，提高生活质量，而针对无法行手术切除的肝癌患者，介入治疗则是一种理想选择。近年来，肝癌的介入治疗取得较大进展，但仍有部分患者术后出现疾病进展或复发，生存率较低，预后情况不理想，因此提高肝癌患者临床干预效果，改善预后是临床亟待解决的问题。早期评估肝癌患者的病情，并以此依据调整干预方案，对提高临床疗效及预后十分关键，因此选取合适的血清标志物作为评估指标至关重要。

VEGF作为血管内皮生长因子，具有促进血管内皮细胞增殖、增加血管通透性、维持血管完整的作用。肝癌细胞增殖生长过程中需要氧及营养成分，其自行分泌促血管生成因子，以促进肿瘤新生血管生成，而VEGF则能够促进肿瘤细胞的增殖及转移，恶化肿瘤病情。既往诸多研究指出，VEGF在肺癌、大肠癌等恶性肿瘤患者中表达水平较高，并具有促进肿瘤细胞增殖、转移的作用，是重要的血清肿瘤标志物，能够评估肿瘤患者临床分期、预后及恶性程度。CXCL9是一种趋化因子，通过趋化T淋巴细胞及自然杀伤细胞，扩张肿瘤血管等作用促进肿瘤细胞侵袭、转移，亦可参与肝癌的发生、发展过程，用于病情及预后的早期评估。门静脉癌栓的形成与肝门静脉逆流密切相关，同时门静脉癌栓又会再次加强门静脉压力，影响分流，进而影响肝癌预后。同时肿瘤组织不同分化程度对预后也有着重要影响，肿瘤分化程度越高，即异型性越小，与正常组织越相似，恶性程度越低，预后越好；肿瘤分化程度越低，即异型性越大，与正常组织相似度越低，恶性程度也越搞，预后越差。本研究主要选取VEGF和CXCL9两个指标作为介入治疗患者预后的早期评估标志物。

本研究结果显示，肝癌组患者血清CXCL9、VEGF水平均明显高于对照组，提示上述两个指标与肝癌发生、发展具有一定关系，同时，随着介入治疗时间的延长，肝癌患者血清CXCL9、VEGF水平逐渐下降，提示其水平能够反映病情变化，并推断可用于病情评估。AFP是临床常用的肝癌相关的特异性肿瘤标志物，肝癌患者的AFP水平明显高于健康者。本研究结果显示，肝癌患者AFP水平高于对照组，第一次介入治疗后3、7天，肝癌组患者血清AFP水平均低于治疗前，而CXCL9、VEGF与AFP的变化一致，其水平均随着治疗时间延长及病情改善而降低；Pearson相关分析显示，血清CXCL9、VEGF与AFP均呈显著正相关，说明CXCL9、VEGF可作为肝癌相关肿瘤指标标志物，用于评估病情变化及患者的预后。

通过为期3年的随访可知，120例肝癌患者中，42例患者死亡，78例患者生存，3年生存率为65.00%（78/120）。Logistic回归分析显示，门静脉癌栓、分化程度及血清CXCL9、VEGF、AFP水平均是肝癌患者预后的影响因素，说明术前CXCL9、VEGF、AFP水平均与肝癌患者预后密切相关，可在某种程度上预测患者的临床结局，较高水平CXCL9、VEGF、AFP能够促进肿瘤发展，诱发细胞恶性增殖及转移，导致肿瘤细胞扩散，从而影响预后。同时，通过血清CXCL9、VEGF预测肝癌患者预后的ROC曲线可知，CXCL9、VEGF评估肝癌患者预后的AUC分别为0.927、0.978，提示CXCL9、VEGF预测肝癌预后情况具有较高准确度及评估价值。

综上所述，肝癌患者血清CXCL9、VEGF水平较高，且与介入治疗患者的预后密切相关。因此，CXCL9、VEGF可用于肝癌患者病情及预后的早期评估。本研究不足之处在于，介入治疗效果可能因个体差异而不同，而本研究纳取样本量较少，因此还需扩大样本量，进一步明确血清CXCL9、VEGF水平与肝癌介入治疗患者预后的关系。