减少人乳头瘤病毒实验复查率研究

2021-07-17 07:39罗金秀刘冬霞胡新年欧阳慧
检验医学与临床 2021年13期
关键词:复查宫颈癌位点

罗金秀,刘冬霞,胡新年,欧阳慧

广东省清远市妇幼保健院优生与遗传实验诊断中心,广东清远 511500

人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,高危型HPV感染者如果持续感染,有可能会转变为宫颈癌。本实验室HPV检测阳性率约为17.70%,其中存在一定的复查率,HPV检测复查降低了实验室工作效率,浪费人力、物力、财力,也导致患者治疗延误和承受重新检测的痛苦。本研究旨在降低HPV检测复查率,提高实验室工作效率和质量,降低检测成本,让患者能够准确及时地了解自身健康状况,做到早发现早治疗。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年7月9-20日来广东省清远市妇幼保健院进行HPV检测的229例女性宫颈标本和2018年10月30日至11月17日的250例女性宫颈标本,年龄23~55岁。第一阶段研究时间段较短,是因为复查率太高,本实验室及时查找原因,并很快找到了原因并采取相应措施;第二阶段研究时间较长是为了更好地观察改进措施的成效。为了减少两个研究时段气温差异对检测结果的影响,所有研究对象均在同温度空调房取材,在恒温PCR实验室操作。

1.2仪器与试剂 潮州凯普生物有限公司生产的人乳头瘤病毒21分型检测试剂盒、HBNP-4801A自动DNA提取仪和HBHM-3000s自动杂交仪;美国ABI公司生产的Real-time PCR system扩增仪。

1.3方法 对2018年7月9-20日来广东省清远市妇幼保健院进行HPV检测的229例女性宫颈标本,采用反向点杂交方法检测HPV-DNA并分型,对需要复查的两大原因绘制柏拉图进行分析,列出复查原因汇总表,针对各复查原因制订相应对策,经过两个多月的整改后,统计2018年10月30日至11月17日进行HPV检测的250例女性宫颈标本的复查率,对两阶段需要复查情况列出比较表,绘制柏拉图。

1.4统计学处理 采用SPSS17.0统计软件进行数据处理及统计分析,计数资料以频数或百分比表示,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1HPV检测复查原因汇总 2018年7月9-20日229例进行HPV检测的女性需要复查的有55例,复查原因包括6个,见表1。

表1 HPV检测复查原因汇总表(%)

2.2出现非特异点原因 出现非特异点原因有6个,见表2。

表2 出现非特异点原因汇总表(%)

2.3相邻位点间多次出现相同阳性位点原因 相邻位点间多次出现相同阳性位点原因有4个,见表3。

表3 相邻位点间多次出现相同阳性原因汇总表(%)

2.4两时段需要复查情况比较 经过对2018年7月9-20日需要复查的55例女性进行原因分析并采取应对措施后,2018年10月30日至11月17日复查率由24.02%降至6.80%,两时间段需要复查率比较差异有统计学意义(χ2=129.05,P<0.01),见表4。

表4 两时段需要复查情况比较(n)

3 讨 论

HPV感染率在我国女性中为16.8%,有70%~80%的女性一生中至少感染过一次HPV,大部分的HPV感染都是暂时性的,会在一定时间内自行消退,一般在2年内HPV会被人体的免疫系统清除掉,感染的平均持续时间为8~12个月[1-2],年龄越大病毒清除时间越长[3],其中HPV16是我国女性HPV感染最普遍的型别,感染率与宫颈病变呈正相关[4]。通过检测HPV16的A4家族基因,可以预测HPV16阳性的女性患宫颈癌的风险,从而确定高危人群,给宫颈癌的预防工作提供帮助[5]。

我国宫颈癌发病率在全球女性恶性肿瘤的发病率中已高居第2位[6],且呈上升趋势,并且存在地域差异,这种差异与HPV感染和筛查的普及性有关,但随着社会的进步和时间的推移,这种地域差异将会逐步缩小[7-8]。HPV分子生物学检测方法是宫颈病变的筛查方法之一,筛查对于恶性肿瘤的防治具有重要意义,可以认为是防治的第一步[9],目前发现的HPV型别已有200余种[10],HPV-DNA病毒载量检测可以作为预测宫颈病变的常规检查手段和病情追踪及治疗后随诊等工作的预测手段,对于预防宫颈高度病变具有重要价值[11]。对于 25 岁以上的女性,高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测为初筛方案[12],但HPV-DNA检测中存在一定的复查率,有些是无法避免的。本研究为了尽可能减少HPV检测的复查率,找出了多方面的原因,针对各种原因采取相应应对对策,取得了良好效果。从本研究可知,出现非特异点和相邻位点间多次出现相同阳性位点是需要复查的两大重要原因。针对出现非特异点的原因,本实验室采取了以下措施。(1)仪器清洗不彻底:对仪器各部件实时清洗消毒,对仪器器材用次氯酸钠进行浸泡、实验后5 min之内用去离子水至少冲洗6次、用酒精进行浸泡,用洁净纸对仪器进行全方位擦拭;对重复使用的仪器设备用特定刷子进行刷洗,向凯普总公司要求派遣工程师进行质量监督。(2)操作细节不注意:每次实验时进行阴性质控,将须注意的细节整理成手册进行提醒,采取移位加样,制作操作流程图,每一步进行双人操作制度。针对相邻位点间多次出现相同阳性的不同原因,本实验室采取了以下措施。(1)实验人员操作不熟练:定期进行卷面考试、HPV操作培训,请凯普试剂公司人员进行仪器原理和解决简单问题的培训,定期进行实验心得和经验的交流。(2)气溶胶污染:每次实验前后对生物安全柜紫外消毒0.5 h,每晚实验室固定消毒1 h,杂交仪试验后紫外消毒1 h。(3)移液枪污染:对移液枪使用人员进行严格培训,配备实验室专用移液枪,使用后及时消毒。(4)实验槽压片不紧:请工程师对杂交仪进行调试。对于无法避免的影响因素,可采取HR-HPV与液基薄层细胞试验(TCT)联合检测提高宫颈癌及癌前病变诊断的准确性,TCT检测中对于病理形态学诊断的不足可由HR-HPV检查来弥补,而TCT可补充HR-HPV在细胞形态和治疗方案上的认知与选择,二者具有相互补充和完善的作用[13]。

综上所述,为了减少HPV检测的复查率,必须针对各影响因素采取相应对策,这样才能做到对疾病早发现早治疗,满足患者和临床的需要。

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