东江源水域大刺鳅卵巢发育周年变化及组织学观察

罗楠 李燕华 万国湲 马本贺 吴斌 曾庆祥 王海华

摘要：利用石蜡切片技术及繁殖生物学重要参数的测量统计，对东江源水域大刺鳅卵巢发育的周年变化进行了研究。结果表明，大刺鳅卵巢发育可分为6个时期。大刺鳅繁殖期在4月～8月，全年平均成熟系数最高的月份为6月、7月。7月后平均成熟系数开始下降，翌年2月降至最低，平均为0.89%。大刺鳅产卵类型为分批产卵型。

关键词：大刺鳅;卵巢发育;组织学;周年变化

中图分类号：S917      文献标识码：A

文章编号：1006-3188（2021）02-026-04

大刺鳅（Mastacembelus armatusa），隶属鲈形目、刺鳅科、刺鳅属，俗称辣锥、石锥、刀鳅、猪母锯、镰刀鱼等，是一种主要分布我国东南地区的小型淡水鱼类，栖息于有石块的江河底层，或岸边有水草的深潭石缝处[1]。其肉质鲜美，富含氨基酸和矿物元素[2]。该鱼因其外观特殊，体表有棘刺，原来不受市场重视，关注较少。近年来，随着人们对该物种认识的不断提高，加上其本身肉嫩味佳，无肌间刺，而且营养价值高，深受消费者喜爱，其良好的市场开发价值日益得到体现。目前对大刺鳅资源[3，4]、养殖[5，6]和遗传生物学如核型、线粒体遗传多态性、同工酶，性腺发育等[7-10]有少量的报道，对大刺鳅卵巢发育的周年变化、产卵特性、最佳人工繁殖时期等尚不清楚。本文研究了大刺鳅卵巢发育周年变化过程，为优化大刺鳅人工繁殖技术提供基础资料。

1  材料与方法

1.1  试验鱼

试验鱼大刺鳅为赣州市定南县东江源水域捕捞的野生驯化种。本试验于2019年3月～2019年10月，每月下旬取样1次，每次10尾，进行生物学测定，观察并记录性腺的发育时期、质量，然后切取性腺组织块，固定于中性甲醛溶液中。

1.2  试验方法

按常规组织切片方法，取出性腺组织，进行脱水、透明、透蜡和石蜡包埋等，切片厚度为6～8 μm，用苏木精-伊红（Hematoxylin-Eosinstaining，HE）染色法染色，中性树胶封片，然后在佳能550D显微镜下观察和摄影。性腺分期标准参照文献方法进行[11，12]。成熟系数按下式计算：

成熟系数（GSI）=（性腺重/鱼体重）×100%

1.3  数据及图像处理

所得数据用Excel 2007软件分析，图片用 Photoshop CC 2018编辑。

2  结果与分析

2.1  大刺鳅卵巢发育的形态及组织学特征

大刺鳅卵巢呈长囊状，前端分离，位于镖腹壁两侧、肝胰脏背方，左右对称，后段末端汇合成一短的呈“Y”字型输卵管通泄殖孔，外有极薄的腹膜包裹，它们通过卵巢系膜与体腔壁层相连。根据卵子发生细胞学特点和性腺解剖观察，按其形态、颜色、大小和血管分布等特征，可将大刺鳅卵巢发育分为6期（图1）。

Ⅰ期卵巢：Ⅰ期卵巢呈透明的细线状，肉眼不能辨别雌雄。

Ⅱ期卵巢：Ⅱ期卵巢呈扁平带状，肉色略透明，左右两叶基本等长，肉眼尚不能看清卵粒，此期卵巢不易同脂肪组织剥离。切片观察显示，此期属初级卵母细胞小生长期，以第Ⅱ时相卵母细胞为主，细胞呈多角形，细胞质呈微粒状，细胞核卵形，占卵母细胞的大部分（图1-Ⅱ期、图3-Ⅱ）。

Ⅲ期卵巢：此期卵巢体积增大，肉色不透明，显长管状。主要以第Ⅲ时相卵母细胞为主，呈圆形或椭圆形，但也夹杂一些第Ⅱ时相的卵母细胞。第Ⅲ时相卵母细胞胞质边缘出现卵黄泡，细胞外出现一层薄的放射带（图1-Ⅲ期、图3-Ⅲ）。

Ⅳ期卵巢：此期卵巢体积急剧增大，呈现米黄色，囊状，卵粒饱满，易于剥离。切片观察显示，主要以第Ⅳ时相卵母细胞为主，有少量Ⅱ、Ⅲ时相卵细胞。Ⅳ时相卵母细胞体积增大，卵黄泡增厚，细胞质嗜碱性，细胞核极化，放射带增厚（图1-Ⅳ期、图3-Ⅳ）。

Ⅴ期卵巢：此期卵巢囊状，柔软膨大，非常饱满，呈现明黄色。卵粒间彼此分离，稍压鱼腹部可挤出卵粒。切片观察显示，主要以第Ⅴ时相卵母细胞为主，同时可见Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时相卵母细胞。此期细胞由Ⅳ期卵母细胞经过成熟分裂发育至次级卵母细胞，胞内充满粗大卵黄颗粒，核膜溶解，核崩解消失，放射带明显增厚（图1-Ⅴ期、图3-Ⅴ-1、Ⅴ-2）。

Ⅵ期卵巢：此期卵体积缩小，萎缩松弛不饱满，卵粒发白且颜色不均匀，出现消融现象。此期卵巢也偶见双侧卵巢大小不一致，一侧显现饱满的囊状，一侧则完全萎缩的现象（图1-Ⅵ期、图2）。卵巢中卵母细胞开始消化吸收，切片观察显示，卵巢中有大量正在消化吸收中的第Ⅴ时相卵母细胞，含有空滤泡（图3-Ⅵ）。

2.2  大刺鳅卵巢发育的周年变化

东江源水域大刺鳅整个生殖周期内，雌性鱼全年的成熟系数范围为0.89%～17.42%（图4）。1月～2月期间最低，从3月开始，成熟系数逐月增高，至6月、7月达到最高峰。7月后成熟系数下降，至10月降到4%左右，12月至翌年2月份成熟系数相对稳定。从翌年3月开始，随着水温的上升，卵巢开始重新发育，成熟系数也逐渐上升，进入新一轮的发育周期。

3  讨论

一般对鱼类产卵类型可分为以下三种：1次性产卵即1个繁殖季节内产卵1次，如草鱼[13];分批产卵即一个繁殖季节内可以产2～3次，如光唇鱼（Acrossocheilus fasciatus）[14];连续产卵类型即1年可产數10次，如稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）[15]。本研究根据卵巢发育形态及组织切片观察结果，发现在Ⅳ、Ⅴ期卵巢中存在第Ⅱ、Ⅲ时相卵母细胞，在适宜的条件下第Ⅱ、Ⅲ时相卵母细胞可以发育成熟为第Ⅳ、Ⅴ时相卵母细胞。本研究在解剖过程中还发现大刺鳅两侧卵巢排卵不同步现象，有一侧卵巢卵子全部排空，萎缩，发展到第Ⅵ期状态，另外一侧卵巢还保持着饱满的Ⅴ期状态，在环境适宜，营养足够的情况下继续产卵，环境条件不适宜，营养不够卵巢就会被吸收，萎缩至第Ⅵ期，然后进一步至Ⅱ，Ⅲ期，开始下一轮性腺发育繁殖。结果表明大刺鳅属于非同步性成熟，分批产卵类型。该结果与刘霆等、周惠强[8，9]研究珠江水系大刺鳅性腺发育研究结果相似。另外据本研究对大刺鳅雌鱼性腺成熟系数统计，大刺鳅雌鱼全年有5个月的成熟系数在10%以上，6月，7月达到最高峰，表明大刺鳅在繁殖季节具备多次产卵的潜力，盛产期为6月、7月。

参考文献

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