膝骨性关节炎患者关节液和血清脂肪因子Chemerin的检测及分析

丁兴龙,王怡然,郭继强△

1.徐州矿务集团总医院，江苏徐州 221006；2.徐州医科大学第二附属医院，江苏徐州 221000

膝骨性关节炎(KOA)是一种常见的慢性关节疾病，以关节软骨退变及滑膜炎为特征[1]，其发病机制目前尚不清楚，有报道指出肥胖可能是KOA的危险因素之一[2-3]。肥胖会促进指间关节等非承重关节的关节炎的发生，所以肥胖不只是因为增加了承重关节的负荷量而增加了发病率[4]。Chemerin是新发现的一种脂肪细胞因子，Chemerin可介导炎性因子和基质金属蛋白酶的释放[5],很多学者猜想其与骨性关节炎中的炎性反应有关，但目前相关研究不多。本研究选取了37例临床确诊的KOA的患者，与非KOA的37例患者进行对比研究，旨在探讨KOA患者病情严重程度与关节炎和血清脂肪因子Chemerin水平的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 经徐州矿务集团总医院伦理委员会同意，选取2017年2月至2019年2月至徐州矿务集团总医院行关节镜治疗的患者共74例纳入研究。其中，临床确诊为KOA的患者37例作为KOA组，非KOA的患者37例作为对照组。KOA组患者均符合美国医师协会制定的KOA诊断标准[6]；受试者均同意参与本研究，并能配合试验资料的收集；KOA组影像学K-L分级为Ⅱ～Ⅳ级。排除标准：(1)患有自身免疫系统疾病者，如：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等；(2)合并其他炎症性关节疾病的患者；(3)3个月内使用过激素类或免疫抑制类药物的患者；(4)合并严重心、肝、肾等重要器官病变或精神心理疾病的患者。两组患者年龄、性别构成、体质量指数(BMI)和病程等一般资料比较，差异无统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2方法

1.2.1标本的收集与保存 血清：采血前1晚禁食禁水，次日晨采集外周静脉血4 mL于无菌非抗凝试管中，以3 000 r/min离心15 min，取血清并置于Eppendorf管中，-80 ℃条件下储存。关节液：麻醉满意后，抽取关节液4～5 mL，置于无菌试管中，2 h内进行离心，以3 000 r/min离心15 min，取上清液并置于Eppendorf管中，-80 ℃条件下储存。

1.2.2关节液、血清Chemerin因子及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)的检测 采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行Chemerin因子的检测：将标本置于室温下解冻，待标本温度完全恢复至室温后，取待测的血清或关节液100 μL，加入已包被有单抗的96孔板中，做好标记。按照试剂盒说明书进行脂肪因子Chemerin水平检测，试剂盒为美国Phoenix Pharmaceuticals CA公司产品。血清hs-CRP水平的检测：取血清标本置于室温下，待温度完全恢复至室温后利用速率散射免疫比浊法进行检测。

1.3分析的指标 两组患者关节液、血清脂肪因子Chemerin水平、血清hs-CRP水平、Outer-bridge软骨损伤评分和影像学Kellgren-Lawrence(K-L)评分。

2 结 果

2.1两组患者关节液、血清Chemerin因子水平的比较 KOA组关节液、血清Chemerin因子水平均高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 关节液、血清Chemerin因子水平的比较

2.2KOA患者Chemerin因子水平与血清hs-CRP水平的关系 KOA患者关节液和血清Chemerin因子水平均与血清hs-CRP水平呈正相关(r=0.88、0.57，P<0.05)。

2.3KOA患者Chemerin因子水平与Outer-bridge软骨损伤评分的关系 KOA患者关节液、血清Chemerin因子水平与Outer-bridge软骨损伤评分均呈正相关(r=0.37、0.28，P<0.05)。

2.4KOA患者Chemerin因子水平与K-L分级的关系 KOA患者中，K-L分级Ⅳ级的患者血清和关节液Chemerin因子水平均高于K-L分级Ⅲ级的患者(P<0.05)，而K-L分级Ⅲ级的患者也均高于Ⅱ级的患者(P<0.05)。Spearmen相关性分析显示，关节液和血清Chemerin因子水平与K-L分级均呈正相关(r=0.91、0.97，P<0.05)。见表3。

表3 不同K-L分级患者关节液、血清Chemerin因子水平的比较

3 讨 论

骨关节炎是一种老年退行性关节疾病，国内发病率约为10%，但在65岁以上人群中发病率可达50%，严重影响了老年人的生活质量[7]。随着社会老龄化现象的加重，KOA的发病率也会增加，会给社会和家庭带来巨大的精神和经济负担[8]。人们对KOA的病因和发病机制并不完全清楚，尚缺乏有效的治疗手段[9]。有研究报道，减轻体重可缓解KOA的症状，而且肥胖人群中KOA的发病率较普通人群高，这可用肥胖人群中膝关节负重多，容易损伤来解释[10]。但是也有研究发现，肥胖人群中指间关节炎的发病率也较高[11]，这说明肥胖导致的骨关节炎发病率增高不仅与负重有关，还可能与内分泌物质有关。

脂肪细胞因子中瘦素、脂联素、内脂素和抵抗素等已被证实，确实可通过炎症免疫反应，影响骨性关节炎的发生发展[12-14]。CONDE等[15]研究发现，人软骨细胞中可表达Chemerin因子及其受体，而且Chemerin因子的表达可被促炎性因子，如肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6等上调[16]。也有研究证实，Chemerin可刺激体外培养的人软骨及滑膜细胞产生上述炎性因子，在降低Chemerin水平后，这些炎性因子表达也随之下降[17-19]，这都充分说明了Chemerin与多种炎性因子的表达相关，所以其也很可能在骨关节炎的发病过程中发挥重要作用[20]。

本研究中，KOA组关节液、血清Chemerin因子水平均高于对照组；KOA患者关节液和血清Chemerin因子水平与血清hs-CRP水平呈正相关，其中关节液Chemerin因子水平与hs-CRP水平关系更密切；KOA患者关节液、血清Chemerin因子水平与Outer-bridge软骨损伤评分呈正相关，其中关节液Chemerin因子水平与Outer-bridge评分关系更密切。上述结果与马军等[21]的研究结果相符，说明软骨损伤可能会导致Chemerin因子高表达，而且是由关节内软骨直接表达，并影响关节炎性反应。进一步研究显示，血清和关节液Chemerin因子水平与影像学K-L分级均呈正相关，预示着Chemerin因子水平有望成为评估KOA严重程度的指标。

综上所述，脂肪因子Chemerin可影响KOA的炎性反应，其水平与关节损伤严重程度呈正相关，所以笔者推测Chemerin因子可能会成为一个新的骨性关节炎诊断和用于严重程度判断的生物学标志。