黄芩素对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移的影响及其相关机制

裴晓东，孙占勇，陈世军

（郑州市第一人民医院普外科，河南 郑州 450000）

乳腺癌是女性发病率较高的恶性肿瘤之一，严重威胁女性的生命健康，目前乳腺癌发病率逐年升高且呈低龄化趋势［1-2］。据全球流行病统计数据显示，2012年全球约有170万乳腺癌新发病例，并有521 900例患者病死［3］。虽然近年来针对乳腺癌的筛查及放射治疗、化学治疗等手段有了长足进步，但乳腺癌的具体发病机制和侵袭转移机制仍不十分清楚，因肿瘤细胞侵袭、转移造成的治疗失败也屡见不鲜。因此，抑制肿瘤的侵袭、转移已成为乳腺癌等肿瘤防治研究的焦点之一。黄芩素是一种从唇形科植物黄芩的根茎中提取的有效成分［4］。研究表明，黄芩素具有抗肿瘤、抗炎和抗细菌感染等生物学活性，对心血管疾病也表现出一定的防治作用［5］。ZHAO等［6］研究发现，黄芩素可通过调控肿瘤相关的巨噬细胞极化来抑制乳腺癌的侵袭和转移。YU等［7］研究表明，黄芩素可通过激活长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）PAX8-AS1-N来抑制乳腺癌的生长。lncRNA是一类长度大于200个核苷酸且不能编码蛋白质的RNA，可参与调控多种肿瘤的发生、发展过程。转移相关肺腺癌转录本1（metastasisassociated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）是一种在肿瘤组织中高表达的lncRNA［8］；有研究证实，MALAT1可促进乳腺癌细胞的侵袭、转移，并导致肿瘤细胞耐药［8-9］。基于此，本研究通过检测黄芩素处理后人乳腺癌MDA-MB-231细胞转移能力和侵袭能力的变化，进一步探讨黄芩素对乳腺癌侵袭、转移的作用；并通过观察黄芩素处理后人乳腺癌MDA-MB-231细胞中上皮-间质转化（epithelialmesenchymal transition，EMT）标志物上皮型钙黏蛋白（cadherin 1，CDH1）、蜗牛家族转录抑制因子1（snail family transcriptional repressor，SNAIL）、波形蛋白（vimentin）表达水平以及MALAT1 mRNA表达变化，探讨其分子生物学机制；旨在为临床应用黄芩素治疗乳腺癌提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器人乳腺癌细胞株MDAMB-231购自上海中国科学院细胞库。实验用黄芩素（CAS 491-67-8，货号465119-100MG）、二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）购自美国Sigma公司，RPMI-1640培养基和胎牛血清购自美国Gibco公司，放射免疫沉淀法（radio immunoprecipitation assay，RIPA）裂解液、结晶紫染色液购自上海碧云天生物技术有限公司，甲醇（分析纯）购自北京国药化学试剂有限公司，CDH1、SNAIL、vimentin一抗购自美国Abcam公司，辣根酶标记山羊抗小鼠免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G二抗和内参β-肌动蛋白（β-actin）一抗购自北京中杉金桥公司，pcDNA3.1载体为本实验室保存，聚偏二氟乙烯（polyvinylidene difluoride，PVDF）膜购自美国Millipore公司，转染试剂Lipofectamine 2000购自美国Life公司，二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量试剂盒、增强型电化学发光液（enhanced chemical luminescence，ECL）、TRIzol试剂、反转录试剂盒、SYBR Green Master Mix染料购自美国ThermoFisher公司；荧光倒置显微镜购自德国Zeiss公司，细胞培养箱、7500型实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）仪购自美国ThermoFisher公司，蛋白质印迹实验电泳装置购自北京六一仪器厂，天能化学发光成像系统购自上海天能科技有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养将MDA-MB-231细胞接种于含体积分数10%胎牛血清、1×105U·L－1青霉素和100 mg·L－1链霉素的RPMI-1640培养基中，置于37℃、含体积分数5%CO2培养箱中稳定培养，培养48 h后收集对数生长期细胞用于后续实验。

1.2.2 划痕愈合实验检测细胞转移能力取对数生长期MDA-MB-231细胞，按每孔5×105个细胞接种于6孔板中，随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组，每组设3个复孔，分别加入终浓度0、20、40、80、160μmol·L－1黄芩素溶液，置于37℃、含体积分数5%CO2培养箱中培养。待细胞生长至铺满培养皿底部时，使用10μL的无菌吸头划过细胞表面，使用预热的磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）清洗2遍，将残余的细胞碎片洗去，继续置于37℃、含体积分数5%CO2培养箱中培养24 h。分别于0、24 h时使用倒置显微镜拍照，应用Image J软件测量划痕宽度，并计算细胞转移率。细胞转移率＝（0 h划痕宽度－24 h划痕宽度）／0 h划痕宽度×100%。

1.2.3 Transwell小室实验检测细胞侵袭能力取对数生长期MDA-MB-231细胞，随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组，分别加入终浓度0、20、40、80、160μmol·L－1黄芩素溶液干预12 h，随后进行Transwell小室实验。取干预12 h的各组细胞，每孔2.5×105个细胞接种于预铺基质胶的小室中，将小室置于24孔板中，上室使用含体积分数1%胎牛血清的RPMI-1640培养基，下室使用含体积分数15%胎牛血清的RPMI-1640培养基，置于培养箱中孵育24 h，随后取出小室并使用PBS清洗3次，甲醇固定30 min，结晶紫染色30 min。染色结束后使用细胞刮刀将上室中的细胞轻轻刮下，PBS润洗2次，将刮下的上室细胞收集于干净的1.5 mL离心管中。PBS清洗后的小室置于显微镜下拍照，然后使用冰醋酸洗脱黏附在下室的细胞，使用酶标仪检测波长260 nm处下室洗脱细胞的吸光度值，将洗脱的上室细胞合并至下室细胞中再次测量吸光度值，并计算侵袭率。侵袭率＝下室洗脱细胞的吸光度值／上室细胞合并至下室细胞后的吸光度值×100%。实验重复3次，取均值。

1.2.4 蛋白质印迹法检测各组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白表达取对数生长期MDA-MB-231细胞，按每孔8×105个细胞接种于6孔板中，随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组，分别加入终浓度0、20、40、80、160μmol·L－1黄芩素溶液，置于37℃、含体积分数5%CO2培养箱中培养48 h后，使用50μL RIPA裂解液裂解细胞并提取细胞总蛋白，取2μL裂解液上清蛋白样品使用BCA法测定蛋白浓度。取30 mg样品蛋白，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳、PVDF转膜后，使用50 g·L－1的脱脂牛奶室温封闭1 h，分别加入β-actin、CDH1、SNAIL和vimentin一抗（稀释比例均为1∶1 000），于4℃下孵育过夜，使用1×TBST洗膜3次，每次10 min，洗去一抗后，加入辣根酶标记山羊抗小鼠IgG二抗（稀释比例1∶5 000），于37℃下孵育30 min，1×TBST洗膜3次，每次10 min，使用ECL发光液显影，天能化学发光成像系统采集图像，Image J图像分析软件测定蛋白质条带灰度值，以目的蛋白灰度值与内参蛋白（β-actin）灰度值比值表示蛋白相对表达量。实验重复3次，取均值。

1.2.5 实时荧光定量PCR检测各组细胞中MALAT1 mRNA表达取对数生长期MDA-MB-231细胞，以每孔5×105个细胞接种于6孔板中，随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组，每组设3个复孔，分别加入终浓度0、20、40、80、160μmol·L－1黄芩素溶液，培养48 h后弃掉培养基，PBS清洗细胞2遍，随后各组细胞中加入1 mL TRIzol试剂，根据试剂盒说明提取总RNA。取1μg总RNA根据反转录试剂盒说明书进行反转录获得cDNA模板，反转录条件为42℃维持30 min，95℃维持2 min，cDNA模板保存于－20℃冰箱。采用qRT-PCR法检测MALAT1 mRNA表达。MALAT1上游引物序列为5′-GGATCCTAGACCAGCATGCC-3′，下游引物序列为5′-AAAGGTTACCATAAGTAAGTTCCAGAAAA-3′；甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）上游引物序列为5′-GTCTCCTCTGACTTCAACAGCG-3′，下游引物序列为5′-ACCACCCTGTTGCTGTAGCCAA-3′。根据SYBR GREEN染料试剂盒说明书以cDNA模板为底物进行扩增，反应体系总体积为15μL，其中上下游引物共1μL（10μmol·L－1），cDNA模板1μL（200 ng），SYBR GREEN染料5.5μL和水7.5μL。扩增循环条件为95℃变性5 min，60℃退火30 s，72℃延伸20 s，循环45次；以GAPDH为内参，根据2－ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量。

1.2.6 MALAT1过表达载体的构建在PubMed数据库中获得MALAT1基因mRNA序列，以此为模板设计PCR引物，并在引物两端引入限制性酶切位点Bam H1和HindⅢ。PCR扩增获得MALAT1 mRNA产物。过表达载体构建使用的MALAT1 mRNA-序列的上游引物序列为5′-CTAGCTAGCGCTTACAATCTTAGAGTGGTAGGCA-3′，下游引物序列为5′-CCGCTCGAGTCTAACATAGTTCAACCCACCAAAG-3′。双酶切pcDNA3.1载体和MALAT1 PCR产物，根据限制性内切酶说明书配制反应体系，酶切过夜，获得其线性片断，使用T4 DNA连接酶将MALAT1 mRNA序列与酶切后的载体相连，并转化至感受态大肠杆菌中进行扩增。利用载体的氨苄青霉素抗性筛选出转化大肠杆菌阳性克隆并测序，测序结果正确的克隆用于提取过表达载体并保存菌种。

1.2.7 细胞转染及过表达MALAT1细胞中CDH1、vimentin、SNAIL蛋白和SNAIL mRNA表达检测取对数生长期MDA-MB-231细胞，按每孔5×105的密度接种于6孔板中，随机分为对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组，每组设3个复孔，分别加入终浓度0、20、40、80、160μmol·L－1黄芩素溶液，待细胞汇合度约为65%时，更换为不含血清和抗生素的RPMI-1640培养基培养4 h。按Lipofectamine 2000说明书配制转染试剂和pcDNA3.1-MALAT1过表达质粒（2μg）混合液，其中转染试剂与质粒体积比为2∶1，室温静置20 min后滴加至6孔板中，每孔500μL，将6孔板置于培养箱培养24 h，应用蛋白质印迹法检测细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白表达，方法同“1.2.4”；实时荧光定量PCR法检测MALAT1 mRNA表达量，方法同“1.2.5”。

1.3 统计学处理应用SPSS 13.0软件进行数据统计与分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Student-Newman-Keuls（SNK）法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 5组MDA-MB-231细胞转移率比较对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组MDA-MB-231细胞转移率分别为（91.23±2.12）%、（75.34±1.30）%、（66.42±5.03）%、（42.01±2.37）%、（29.38±6.01）%。20μmol·L－1黄芩素处理组和40μmol·L－1黄芩素处理组与对照组细胞转移率比较差异无统计学意义（P＞0.05）；80μmol·L－1黄芩素处理组和160μmol·L－1黄芩素处理组细胞转移率低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。80μmol·L－1黄芩素处理组和160μmol·L－1黄芩素处理组细胞转移率低于20μmol·L－1黄芩素处理组，差异有统计学意义（P＜0.05）；160μmol·L－1黄芩素处理组细胞转移率低于80μmol·L－1黄芩素处理组，差异有统计学意义（P＜0.05）。其余各剂量黄芩素处理组之间细胞转移率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 5组MDA-MB-231细胞侵袭率的比较结果见图1。对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处组MDA-MB-231细胞侵袭率分别为（102.19±1.35）%、（81.34±2.08）%、（76.41±4.21）%、（52.42±4.02）%、（35.33±2.11）%。20μmol·L－1黄芩素处理组和40μmol·L－1黄芩素处理组细胞侵袭率与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；80μmol·L－1黄芩素处理组和160μmol·L－1黄芩素处理组细胞侵袭率低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；160μmol·L－1黄芩素处理组细胞侵袭率低于20μmol·L－1黄芩素处理组和40μmol·L－1黄芩素处理组，差异有统计学意义（P＜0.05）；其余各剂量黄芩素处理组之间细胞侵袭率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

图1 5组MDA-MB-231细胞的侵袭能力（结晶紫染色，×200）Fig.1 Migration of MDA-MB-231 cells in the five groups（crystal violet staining，×200）

2.3 5组MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白相对表达量比较结果见图2和表1。20μmol·L－1黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。40μmol·L－1黄芩素处理组细胞中SNAIL蛋白相对表达量低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；CDH1和vimentin蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。80μmol·L－1黄芩素处理组和160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中CDH1蛋白相对表达量高于对照组和20μmol·L－1黄芩素处理组，vimentin和SNAIL蛋白相对表达量低于对照组和20μmol·L－1黄芩素处理组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中CDH1蛋白相对表达量高于40μmol·L－1黄芩素处理组，vimentin和SNAIL蛋白相对表达量低于40μmol·L－1黄芩素处理组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。其余各剂量黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

图2 5组MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白的表达Fig.2 Expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in MDA-MB-231 cells in the five groups

表1 5组MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白相对表达量的比较Tab.1 Comparison of relative expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in MDA-MB-231 cells among the five groups（±s）

表1 5组MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白相对表达量的比较Tab.1 Comparison of relative expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in MDA-MB-231 cells among the five groups（±s）

注：与对照组比较a P＜0.05；与20μmol·L－1黄芩素处理组比较b P＜0.05；与40μmol·L－1黄芩素处理组比较c P＜0.05。

组别n CDH1 vimentin SNAIL对照组0.12±0.11 0.87±0.03 0.92±0.06 20μmol·L－1黄芩素处理组3 0.22±0.02 0.72±0.12 0.81±0.05 40μmol·L－1黄芩素处理组3 0.36±0.05 0.64±0.13 0.69±0.10a 80μmol·L－1黄芩素处理组3 0.45±0.02ab 0.42±0.05ab 0.51±0.03ab 160μmol·L－1黄芩素处理组3 0.59±0.03abc 0.28±0.08abc 0.38±0.04 abc

2.4 5组MDA-MB-231细胞中MALAT1 mRNA相对表达量比较对照组和20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量分别为1.01±0.02、0.81±0.03、0.72±0.05、0.48±0.05和0.39±0.04。20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。80μmol·L－1黄芩素处理组和160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于20μmol·L－1黄芩素处理组，差异有统计学意义（P＜0.05）；160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量低于40μmol·L－1黄芩素处理组，差异有统计学意义（P＜0.05）；其余各剂量黄芩素处理组细胞中MALAT1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.5 5组过表达pcDNA 3.1-MALAT1 MDA-MB-231细胞中MALAT1 mRNA及CDH1、SNAIL、vimentin蛋白相对表达量比较结果见图3和表2。转染pcDNA3.1-MALAT1过表达载体MDA-MB-231细胞和转染空载体MDA-MB-231细胞中MALAT1 mRNA相对表达量分别为13.93±0.02、0.98±0.02，转染pcDNA3.1-MALAT1过表达载体MDA-MB-231细胞中MALAT mRNA相对表达量高于转染空载体MDA-MB-231细胞，差异有统计学意义（P＜0.05），说明过表达载体构建成功并在MDA-MB-231细胞中表达。转染pcDNA3.1-MALAT1过表达载体后，20、40、80、160μmol·L－1黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。不同剂量黄芩素处理组细胞中CDH1、vimentin和SNAIL蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

图3 5组过表达pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白的表达Fig.3 Expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in overexpressing pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231 cells in the five groups

表2 5组过表达载体pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白相对表达量的比较Tab.2 Comparison of relative expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in overexpressing pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231 cells among the five groups（±s）

表2 5组过表达载体pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231细胞中CDH1、SNAIL和vimentin蛋白相对表达量的比较Tab.2 Comparison of relative expression of CDH1，SNAIL and vimentin protein in overexpressing pcDNA3.1-MALAT1 MDA-MB-231 cells among the five groups（±s）

组别n CDH1 vimentin SNAIL对照组0.18±0.12 0.82±0.04 0.89±0.04 20μmol·L－1黄芩素处理组3 0.21±0.05 0.78±0.10 0.81±0.03 40μmol·L－1黄芩素处理组3 0.28±0.04 0.84±0.11 0.79±0.12 80μmol·L－1黄芩素处理组3 0.23±0.01 0.72±0.04 0.81±0.05 160μmol·L－1黄芩素处理组3 0.24±0.02 0.76±0.09 0.83±0.03

3 讨论

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，全球每年约210万女性确诊罹患乳腺癌［1］。虽然目前对于乳腺癌的诊断和治疗手段有了明显进步，但是乳腺癌患者的预后一直不太理想。有研究报道，我国3%～10%的乳腺癌患者在确诊时已经发生了远处转移，5 a生存率约为20%［10］。乳腺癌细胞的恶性侵袭、转移是影响乳腺癌患者预后的一个重要原因［11］。关于肿瘤侵袭、转移的研究已成为医学领域重点关注的课题之一。研究证实，lncRNA等分子能够通过调控多种信号转导通路参与调控多种癌症包括乳腺癌的发生、发展以及侵袭和转移过程［12-14］，这为乳腺癌的诊断和治疗提供了新的思路或靶点。有研究发现，一些天然产物可抑制乳腺癌的发生发展，例如补骨脂异黄酮、假白榄酮和党参内酯等均表现出抑制乳腺癌细胞侵袭、转移的作用［15-17］。但天然产物发挥抗肿瘤作用的机制，尤其是其与lncRNA调控有关的分子机制仍不明确，需要进一步研究。

黄芩素为一种从植物中提取的活性物质，具有良好的抗肿瘤活性［7，18-19］。研究表明，黄芩素可通过不同的分子生物学机制对乳腺癌细胞的增殖、侵袭及转移发挥抑制作用［7-9］。KOH等［20］研究表明，黄芩素可以上调干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白2并抑制MDA-MB-231细胞的肿瘤干细胞特征，从而发挥提高化学治疗敏感性的作用。YAN等［21］研究发现，黄芩素能够抑制乳腺癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号转导通路，促进乳腺癌细胞的凋亡和自噬。EMT被认为是驱动肿瘤转移发生的第1步。EMT直接受转录因子例如SNAIL的驱动［22］，而CDH1和vimentin则充当EMT效应器的角色，调控细胞骨架结构的变化。CDH1蛋白水平下降，SNAIL蛋白和vimentin蛋白水平升高被认为是细胞发生EMT的标志［23］。JADALIHA等［9］研究表明，黄芩素可通过抑制Wnt／β-catenin信号转导通路抑制乳腺癌细胞的EMT过程。NGUYEN等［24］研究表明，黄芩素可通过下调富含半胱氨酸蛋白61和赖氨酰氧化酶样蛋白2的表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的EMT过程。以上研究说明黄芩素具有潜在的抑癌生物活性，可对乳腺癌的侵袭、转移起抑制作用。MALAT1是一种促癌非编码RNA，参与多种肿瘤的生成、代谢及血管生成等［25］。MALAT1能够通过竞争性内源RNA调控网络参与调控多种促癌基因的表达，如MALAT1可竞争性地结合miR-26a，使靶向转化生长因子β2（transforming growth factor beta 2，TGF-β2）的内源miR-26a减少，从而上调TGF-β2的表达水平并促进细胞的EMT过程［26］。因此，以MALAT1为靶标寻找潜在的抑制剂具有较完善的理论支持和广阔前景。

虽然目前对黄芩素抑制乳腺癌细胞侵袭、转移及EMT的作用的报道较多，但其具体涉及的分子生物学机制并不明确。基于此，本研究使用梯度浓度的黄芩素处理乳腺癌MDA-MB-231细胞，结果显示，黄芩素可抑制MDA-MB-231细胞的侵袭和转移能力，降低EMT过程中间充质标志物vimentin和SNAIL蛋白水平，上调CDH1蛋白表达；高浓度的黄芩素抑制MDA-MB-231细胞侵袭、转移的效果强于低浓度黄芩素，对EMT标志物蛋白水平的影响更显著。此外，本研究结果还显示，黄芩素可显著抑制MDA-MB-231细胞中MALAT1 mRNA的表达水平，过表达MALAT1后可逆转黄芩素对EMT过程的抑制作用。以上结果证实，黄芩素对MDA-MB-231细胞的侵袭转移具有显著的抑制作用，且该作用与黄芩素的浓度有关，即高浓度黄芩素对侵袭、转移的抑制效果更明显；黄芩素通过影响MDA-MB-231细胞中间充质标志物vimentin和SNAIL蛋白以及上皮标志物CDH1蛋白表达水平，参与调控EMT过程，进而发挥抑制MDA-MB-231细胞侵袭、转移的作用，而MALAT1可逆转黄芩素对MDA-MB-231细胞EMT过程的抑制作用。

综上所述，黄芩素可通过抑制lncRNA MALAT1发挥抑制MDA-MB-231细胞侵袭、转移的作用，这为探索黄芩素生物学功能潜在的分子生物学机制提供了新思路。根据MALAT1及其他lncRNA的作用特点，推测黄芩素抑制MALAT1表达后可通过竞争内源RNA调控网络促进其相关靶向的微RNA表达，进而抑制潜在的下游促癌靶基因并抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移，但需要后续研究进行验证。