气相色谱法测定蔬菜中4种有机磷农药残留

◎ 蒋居琼

（北海市食品药品检验所，广西 北海 536000）

有机磷农药是一种含磷有机化合物农药，是一种广谱高效的化学杀虫剂[1]，主要用于植物病、虫、草害的防治，广泛用于农业生产，在农作物产品中会有不同程度的残留。有机磷农药对人、牲畜毒性很大，在农业生产中不遵守规定的方法、剂量使用，可能会超标，危害人体健康。《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）结合实验室农药残留分析，设定了农产品中多种农药的最大残留限值，为农产品质量安全评价提供了技术支持[2]。作为通用型方法的标准，NY/T 761—2008[3]方法可适用于54种有机磷农药的测定。在日常测试中，实验人员通常使用标准建议的分组模型来提高检测效率，同时检测多种农药。检测部门常用气相色谱[4-5]、气相色谱-质谱联用[6-7]、液相色谱[8]、液相色谱-质谱联用[9-10]进行有机磷农残检测，其中气相色谱分析是国家标准方法，与其他方法相比，该方法具有高选择性、高分离效率、高灵敏度和高分析速度等特点[11]，广泛用于有机磷农药残留检测，同时气相色谱分析法在应用中对参与其中的人员也提出了严格要求，检验人员自身需要具有良好的工作素质，并结合实际情况合理应用气相色谱分析法[12-13]，对蔬菜的有机磷农药残留进行测定，进而对蔬菜进行质量监控，确保农产品的绿色安全化种植。

1 材料与方法

1.1 主要仪器

7890A气相色谱仪（FPD检测器，安捷伦科技有限公司）、MS204S电子分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）、热高速冷冻离心机、涡旋混合器、氮吹仪及九阳家用破壁机（九阳股份有限公司）。

1.2 主要试剂

4种有机磷农药标准品：氧乐果、敌敌畏、三唑磷、毒死蜱，标准样品全部由中国农业部环境保护科学研究监测所处购买，标准品全部为100 μg·mL-1浓度标准溶液。4种有机磷农药由丙酮试剂配成混合标准储备溶液，每组浓度为10.0 μg·mL-1，置于2 ℃条件下保存。测试用水是GB/T 6682—2008指定的I类水；丙酮，色谱纯；乙腈，分析纯；氯化钠，分析纯。

1.3 混合标准工作溶液的配制

将装有标准物质（100 μg·mL-1）氧乐果、敌敌畏、三唑醇和毒死蜱的安瓿瓶从冰箱中取出，置于室温下，然后分别从各标准物质取1 mL全部转移到10 mL容量瓶中，用丙酮调节体积至刻度，得到10 μg·mL-1混合标准原液。将10 μg·mL-1的混合标准原液用分步稀释法配制成0.500 μg·mL-1、0.400 μg·mL-1、0.300 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1和0.050 μg·mL-1的混合标准溶液。

1.4 方法

1.4.1 样品前处理

将蔬菜样品切碎，用破壁机研磨成匀浆。准确称取10.0 g制备好的试样于带塞塑料瓶中，加入乙腈20 mL，加入2 g氯化钠，在旋涡混合器涡旋1 min，将离心管置于离心机中，于4 000 r·min-1转速条件下离心5 min，收集上层提取液在45 ℃水浴减压旋转蒸发仪上蒸馏至近干，加入2.0 mL丙酮后在涡旋混匀器上充分混匀，用0.2 μm过滤器过滤，转移到自动进样器样品瓶中进行测量。

1.4.2 仪器条件

色谱柱：DB-17弹性石英毛细管柱（30 m×530 μm×1 μm）；编号：125-1732；升温程序：150 ℃，保持2 min，升温20 ℃·min-1至250 ℃，保持5 min；恒流：8 mL·min-1；检测器温度：250 ℃；氢气：75 mL·min-1；空气：100 mL·min-1；尾吹气流量：10 mL·min-1；进样方式：直接进样法；进样体积：1.0 μL；进样口温度：220.0 ℃。

2 结果和分析

2.1 提取方式的选择

用破壁机搅碎样品，代替NY/T 761—2008中用匀浆机处理样品，破壁机可以破坏蔬菜样品的细胞壁结构，使残留的有机磷农残更充分的被乙腈提取出来[14]。

2.2 提取试剂的选择

大部分有机磷农药具有中等极性或弱极性，依据相似相溶原理，可以选择乙腈、丙酮、石油醚等作为提取溶剂。蔬菜和水果含水量较高，丙酮、乙醇等有机溶剂与水互溶；丙酮沸点低易挥发而且会过多提取水分；石油醚具有麻醉作用，对实验操作人员具有一定的安全风险；乙腈对大多数农药溶解性好，易与水相分离，穿透力大，对脂肪、色素等杂质的提取能力小，可直接用气相色谱法测定提取物。因此，选择乙腈作为提取液。

2.3 定性分析

在相同气相色谱条件下检测4种有机氯农药的单独标准品，记录每种农药的色谱峰保留时间，作为定性依据。然后用丙酮稀释上述混合标准储备溶液，使各成分浓度达到1.0 μg·mL-1，制备标准工作溶液，按1.4.2气相色谱条件进行测定。使混合标准品的色谱峰与各有机氯农药的色谱峰保持时间相对应，4种有机磷类农药的出峰顺序依次为敌敌畏、氧乐果、毒死蜱、三唑磷，如图1所示，保留时间分别为2.53 min、5.83 min、7.21 min、11.61 min。

2.4 定量分析

采用标准曲线法对四种有机氯农药残留量进行定量分析。将准确配制的0.050～0.500 μg·mL-1的各种有机磷标准品的工作溶液，通过峰面积对浓度进行线性回归分析，建立标准曲线，拟合线性方程和线性相关系数，结果见表1。从表1可以看出，敌敌畏、氧乐果、毒死蜱、三唑磷4种有机磷农在0.050～0.500 μg·mL-1线性关系良好，解释了峰值面积和浓度之间存在良好的相关性，能够满足实验室的快速测试要求，满足蔬菜农药残留分析检测的要求。

图1 农残混合标准品色谱图

表1 待测农药的线性方程及相关系数表

2.5 加标回收率和精密度测定

为考察该方法的回收率和精密度，选择已经测定不含该4种农残的蔬菜样品番茄、青椒、黄瓜、芹菜为背景，分别加入4种有机磷类农残浓度为0.05 mg·mk-1、0.20 mg·mk-1、0.40 mg·mk-1的混合工作液，充分混合后，按上述方法处理，每个浓度水平平行测6次。按照“1.4.1”方法进行提取、浓缩和测定，并计算各待测成分的回收率和精密度。测定结果如表2所示，4种有机磷类农药的加标回收率为81.0%～115.8%，精密度（RSD）为1.0%～8.7%，回收率和精密度均符合痕量分析要求，能够满足实验室对蔬菜有机磷农残的检测需求。

表2 4种有机磷农药的加标回收率和相对标准偏差表

2.6 样品检测

采用上述方法，笔者所在的实验室2020年全年抽测蔬菜水果品种共1 787批，对实验室常检样品芹菜、黄瓜、番茄、油菜、韭菜、青椒、菠菜、苦瓜和茄子中4种有机磷农药进行检测，结果显示油菜和菠菜中毒死蜱有检出，其他3种农药残留无检出。多种叶类蔬菜农残超标与农药进入蔬菜的途径有关，一方面是农药附着在蔬菜和水果表面，另一方面是植物在生长过程中农药直接进入蔬菜和水果。叶菜类的比表面积大，容易吸附化学分子。

3 结论

气相色谱分析作为检测蔬菜中有机磷农药残留的方法，在测定蔬菜中有机磷农药残留时，必须注重两个方面：①在降低样品中杂质干扰的同时，必须从不同样品中充分提取残留的有机磷农药，因此提取必须充分，保证提取步骤的有效性。②必须选择与样品相容的色谱柱，以保持样品的有效分离。本文以乙腈为溶剂提取有机磷农药残留，由于样品称样量小，整个过程的溶剂消耗也相应减少，提取、混合、浓缩、测定和分析农药残留的时间也大大缩短。方法操作简单，提取效果好，快速节能，可同时处理多组样品，显著提高样品预处理效率，进一步提高实验室检测效率，适用于蔬菜水果中有机磷农药残留的快速检测。