柯乐猪与国外品种猪精子活力的比较分析

冯文武，李 平，陈大芳，李 俊，杨 蓉，蒋桂荣，王 钦，苏娜芬

（1.贵州省种畜禽种质测定中心，贵州 贵阳 550018；2.沿河土家族自治县农业农村局，贵州 铜仁 565300）

公猪精液品质直接影响到后代的数量、质量以及猪场的经济效益[1]，精子活力是评价精液品质的重要指标[2]。不同品种公猪精液品质会因其遗传特性有所差异。王立强等研究表明，杜洛克猪和长白猪种公猪的精子活力与窝产仔数、窝产活仔数及初生窝重极显著正相关[3]。我国地方猪种的精子活力有较多研究。李家连等[4]研究表明，梅山公猪精子的活力较好可能是梅山猪繁殖性能较好的原因之一。胡启蒙[5]、甄林青[6]的研究也表明，梅山猪获能精子运动能力显著优于杜洛克猪的获能精子。柯乐猪是腌肉型[7]地方猪种，品种归属乌金猪，因主产并集散于贵州西北部毕节市赫章县可乐彝族苗族乡而得名，其腿部肌肉发达，是生产宣威火腿（云腿）和威宁火腿的上等原料，具有较好的商业化开发前景[8-10]，但其繁殖力低，产业化开发亟需有针对性地提高其繁殖力。李平等研究表明[11]，活力检测结果与苏醒时长有关，17 ℃条件下保存的精液转移至37 ℃条件下苏醒5 min时检测为宜。本试验以柯乐猪、杜洛克猪、长白猪精液为研究对象，对三者保存不同时间后苏醒5 min的活力进行检测分析，试图从精子活力的角度探讨其繁殖性能差异的原因，以便在生产过程中为改善柯乐猪繁殖力提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验于2020年12月在贵州省种畜禽种质测定中心实验室进行。试验选择健康无疾病并具有完整的系谱档案的柯乐猪、杜洛克猪、长白猪3个品种的成年种公猪各5头份精液为试验对象，依据采精体积进行原精密度检测，换算稀释比例，采用相同稀释剂稀释后置于17 ℃条件下保存。

1.2 仪器设备

精液质量分析系统（Minitube）、恒温预热版、载玻片、盖玻片、移液枪（Eppendorf）、17 ℃保存箱。

1.3 检测环境及方法

在贵州省种畜禽种质测定中心精液检测室进行检测，室内环境温度控制在20～22 ℃，湿度控制在55%～65%。取两个剂量的常温精液轻轻摇动均匀，分别用移液器吸取精液20μL置于载玻片上并加盖玻片，在37 ℃条件下苏醒5 min后，用200～400倍显微镜观察每样片不同液层内的精子运动状态，利用精液质量分析系统进行全面评定。计算公式如下：

M：活力；n1：第一视野活力；n2：第二视野活力；n3：第三视野活力。

1.4 数据统计与分析

数据统计采用Excel表格处理，分析采用SPSS软件（IBM Co.,Armonk,NY,USA），进行单因素方差分析，采用Duncan法进行多重比较，分析差异是否显著，检测数据以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 地方品种与国外品种猪12 h精子活力分析

柯乐猪与杜洛克猪、长白猪12 h精子活力检测结果见表1。从表1可知，3个猪种12 h精子活力均符合国家标准要求的70%以上，活力依次为柯乐猪＞杜洛克猪＞长白猪；参考WHO（World Health Organization）分级，柯乐猪、杜洛克猪、长白猪a级（快速前向运动）+b级（呈中速直线运动）精子之和均较高，依次分别为93.61%、91.19%、87.53%；静止精子数柯乐猪最低。

2.2 地方品种与国外品种猪36 h精子活力分析

柯乐猪与杜洛克猪、长白猪36 h精子活力检测结果见表2。从表2可知，3个猪种36 h精子活力依然符合国家标准要求的70%以上，活力依次为杜洛克猪＞柯乐猪＞长白猪；参考WHO分级，杜洛克猪、柯乐猪、长白猪a级+b级精子之和保持较高水平，依次分别为87.60%、87.32%、74.02%；静止精子数柯乐猪保持最低。

表2 柯乐猪与国外品种36 h精子活力

2.3 地方品种与国外品种猪72 h精子活力分析

柯乐猪与杜洛克猪、长白猪72 h精子活力检测结果见表3。从表3可知，3个猪种72 h精子活力同12 h相比，发生较大变化，其中柯乐猪和杜洛克猪活力仍然符合国家标准要求，且柯乐猪优于杜洛克猪，a级+b级精子之和分别为75.90%、70.77%；长白猪精液活力下降到要求以下，仅为66.43%；静止精子数柯乐猪保持最低。

表3 柯乐猪与国外品种72 h精子活力

3 讨论

3.1 柯乐猪精子活力优于杜洛克猪及长白猪

本试验结果表明，柯乐猪在12 h、72 h精子活力a级和b级精子高于杜洛克猪和长白猪，36 h精子活力与杜洛克猪相近，且静止精子数在3个检测时间段中，均保持最低，这与陈永霞等[12]研究的，梅山猪快速运动比例依次高于杜洛克猪、巴克夏猪、大白猪、长白猪，且不动精子比例以梅山猪最低，梅山猪a级和b级比例均为最高，a级+b级之和高于大白猪、长白猪、杜洛克猪、巴克夏猪的结果基本相同。提示柯乐猪同梅山猪等地方猪精子活力与外元猪相比，存在差异且比较具有优势。

3.2 柯乐猪、杜洛克猪精子活力下降趋势优于长白猪

综合柯乐猪与杜洛克猪、长白猪精子活力的下降情况，柯乐猪与杜洛克猪的精子活力在12 h、36 h、72 h内检测结果没有明显差异，下降趋势保持稳定，两者与长白猪精子活力在3个时间段检测结果差异明显，长白猪的下降趋势较为明显，这与任广志等[13]和孙德林等[14]研究的杜洛克猪公猪精液长时间保存时，活率显著优于长白猪，杜洛克猪下降不明显、长白精液活率出现急剧下降结果相符，说明柯乐猪与杜洛克猪在精子活力下降趋势较为稳定，并优于长白猪。

3.3 长白猪精液不宜长时间保存

本研究结果表明柯乐猪与杜洛克猪保存72 h后，活力检测仍符合国家推荐性标准[15]所规定的活力70%以上，但长白猪活力72 h降至66.43%，达不到使用要求。说明长白猪在实际应用中，精液不适宜长时间保存，这与梅军四等[16]研究的长白种公猪精液仅适合短期保存的结论相符。

4 结论

贵州地方猪种柯乐猪精液稀释后，活力优于杜洛克猪和长白猪，下降趋势同杜洛克猪一样不明显，在72 h后检测时保持良好活力，高于70%，优于长白猪精液活力。