中年稳压胶囊对SHR大鼠血压干预实验观察

陈春花 许 滔

1. 黔南州中医医院重症医学科，贵州 都匀 558003；2.贵州中医药大学第二附属医院心内科，贵州 贵阳 550000

高血压是临床的常见病、多发病，2002年统计中国高血压患者为1.6亿。随着人民生活质量的不断提高，高血压患者年龄呈现越来越低龄化的趋势，2005年有关我国高血压流行病学研究结果显示中年(45～59岁)高血压患者的患病率达到29.7%[1]，较1991年全国高血压普查结果[2]升高了9.00%。在我国40岁以上人群的死亡原因中，心血管病和脑血管病分别列为第1位和第3位，而总死亡的第一危险因素是高血压[3]。这个年龄区间中患高血压的大多数人还在工作的第一线，由于对西药副作用的畏惧，特别是降压药物对男性性功能的影响，服药依从性差，血压控制达标率低。流行病学调查显示，高血压致残、致死的并发症严重危害了人类健康，对千万个家庭造成损害，耗费国家大量的卫生资源，因此对高血压的有效防治仍然是亟待解决的医学问题和社会问题。其中，中年人群高血压的防治是维持社会和谐尤为重要的一个方面。中医药治疗高血压很有优势，降压药中虽然西药的种类较多，但临床副作用较大，很多人不能耐受，转而寻求副作用少，疗效稳定的中医治疗。中医无高血压病名，根据临床症状多从“眩晕、头痛”等病论治。中医药在治疗高血压上具有标本兼治、药物毒副作用较小、疗效持久等特点, 在改善症状、提高生活质量、稳定疗效、逆转靶器官损害、减少并发症等方面具有独特的优势[4]。通过查阅文献资料，在高血压中医诊疗方案中，辨证多为肝阳上亢、肝火亢盛、痰湿雍盛、肝肾阴虚、阴阳两虚等，80%以上是围绕 肝来调治的。因此总结了中医平肝、清肝、疏肝、养肝治肝诸法，以这种治肝降压理论为指导组方的中年稳压胶囊临床上治疗中年原发性高血压临床疗效较好[5]。因此，本研究将中年稳压胶囊运用于自发性高血压大鼠(SHR)，通过药物对大鼠的血压调控，求证该药的降压作用，探讨中年高血压治肝降压法的作用机制。

1 实验材料

1.1 动物选择 56只10周龄SPF级SHR(自发性高血压)大鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)，均为雄性，体重(250～300 g)；7只10周龄健康SD大鼠(采购公司同上)，雄性，体重(300～350 g)。均用标准颗粒混合饲料喂养(由贵阳医学院实验动物中心提供)。

1.2 主要实验仪器 超纯水仪(台湾艾科)，大鼠无创尾动脉血压仪(成都生物科技有限公司)，Medl-U4C501生物信号采集系统(南京美易科技有限公司)，恒温干燥箱(杭州蓝天化验仪器厂)，全自动高压灭菌锅(日本三洋有限公司)，电子天平(Shangping FA2004 上海仪器厂)，HH-S恒温水浴锅(江苏金坛市正通电子有限公司)。

2 实验方法及结果

2.1 动物分组、饲养、给药

2.1.1 分组 大组分组：随机将SHR大鼠分为空白对照组Ⅰ和实验组Ⅱ(灌服中年稳压胶囊)两大组，每组28只。另设健康SD大鼠组(不给药)。亚组分组：SHR大鼠每组均分为A、B、C、D四个小组(每小组7只)。SD大鼠为E组。

A.(AⅠ、AⅡ)在实验组给药后第1周处死(即第13周龄时)；

B.(BⅠ、BⅡ)在实验组给药后第3周处死(即第15周龄时)；

C.(CⅠ、CⅡ)在实验组给药后第5周处死(即第17周龄时)；

D.(DⅠ、DⅡ)在实验组给药后第8周处死(即第20周龄时)；

E.实验组给药开始后第8周处死(即第20周龄时)。

2.1.2 饲养 大鼠放置在光线适度，空气流通的动物房中饲养，动物自由摄食、饮水，一般每日更换新鲜饲料，饮水1～2 d换一次。动物房温度：22～24 ℃，相对湿度：45%～55%，人工控制光照(昼12 h、夜12 h)。平均每天供应饲料5～7 g/100 g体重，平均日饮水量8～13 mL/100g体重。

2.1.3 药物制备及给药

2.1.3.1 药物制备 中药胶囊制备：中年稳压胶囊(钩藤、天麻、黄芪、天冬、麦冬、生地、熟地、珍珠母、黄芩、白术、丹参等)由贵阳中医学院第二附属医院药剂科加工完成。每粒胶囊含生药0.25 g。

2.1.3.2 给药方法 在大鼠适应1周后实验组开始灌服药物，实验组灌服中年稳压胶囊，1粒/次，2次/d。操作时将胶囊内药物取出，每粒胶囊用3～5 mL纯水稀释，再用灌胃针抽取后灌服。对照组不给药。

2.2 血压检测

2.2.1 测压前准备 大鼠到达实验室后，熟悉环境3～4 d。4 d后每天用大鼠测压器固定尾部及37～40 ℃温水烫尾1次，习惯测压步骤。测压前移到测压室熟悉环境，并逐只用配套的固定器固定，尾部用37～40℃温水预热。每次测压前均需用水银血压计对换能器进行定标，每批次均需采用相同定标标准。

2.2.2 测压 打开配套Medlab生物信号采集系统，采取双通道记录血压及脉搏波，水银血压计定标，保存配置。将各组大鼠按编号顺序进行测压，将大鼠放入配备的大鼠固定器内，鼠尾置于固定器外。用35～40 ℃的恒温水浸泡鼠尾约10～25 min使鼠尾变软，此时鼠尾动脉充分扩张。用软布将鼠尾擦干后穿过加压尾套，并使无创尾动脉血压测定系统的脉搏传感器与尾根部背面紧密接触，观测示波器，出现规律的锯齿样波形即为大鼠脉搏波形，脉搏波稳定后即可开始测血压。待动物安静后，加压气球手动给尾套匀速充气加压，随尾套内压力增高脉搏波逐渐减小至消失，数秒后缓慢放气，鼠套压力降低，开始出现脉搏波并逐渐增高，出现脉搏波的起始点对应的血压值即为鼠尾收缩压。如图1所示。重复测量3次，取平均值。

2.2.3 血压检测记录 ①使用软件自带的自动实验选项记录实验结果，选择每隔30 s测定血压一次，共测3次，记录实验数据，记算平均值，其间安抚大鼠，使其保持安静状态。②将记录图片按软件自带操作储存。

3 结果

各组大鼠血压比较：正常SD大鼠不同时期SBP无统计学差异(P>0.05)，同期SD大鼠与各SHR大鼠组血压SBP存在显著差异(P<0.05)。SHR空白组及实验组初始血压SBP无统计学意义(P>0.05)。给药后同期各SHR大鼠血压结果对比：第1周空白组及实验组SBP无统计学意义(P>0.05)；各组与初始血压相比较，无显著差异；给药后第3周开始空白组各组SBP与初始血压相比较，有显著差异(P<0.05)；空白组及实验组SBP有显著差异(P<0.05)；给药后第5周血压对比分析：空白组及实验组SBP有显著差异(P<0.05)；期间最高血压SBP达到202 mmHg，测压过程中两只空白组SHR大鼠死亡，可见口吐粉红色泡沫，解剖可见肺淤血。给药后第8周空白组及实验组SBP有显著差异(P<0.05)。见表1。

表1 各组大鼠不同期血压均值

4 结论及讨论

4.1 原发性高血压病因病理认识 高血压作为当今社会严重危害人类健康的常见病、多发病，在100多年前由Riva-Rocci发明袖带血压计后才对其生理、病理有所认识。到20世纪50～60年代进行了大量的流行病学及临床研究，其作为心血管病的主要危险因素得以证实。原发性高血压的发生趋向于年轻化，但该病发生的病因不明, 目前认为是在一定的遗传背景下由多种后天环境及其他因素 (包括饮食、精神应激及体重、避孕药、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征等) 相互作用使血压的正常机制失代偿所致。本实验所选用的 SHR大鼠为一近交品系，是国际高血压协会推荐的遗传性高血压大鼠之一，其高血压发生率为100 %，出生后 6～8周血压开始上升，成鼠血压可达26.7 kPa(200mmHg)以上[6]。SHR大鼠高血压发生率高，无明显原发性肾脏或肾上腺损伤，做为目前原发性高血压最佳动物模型。其雄性SHR大鼠的发病率高而且稳定，是中年高血压最好的实验对象。从实验结果可见SHR大鼠在第10周时血压已经升高。且随着周龄增加，空白对照组血压持续升高(至14周龄开始比较初期血压有显著差异(P<0.05)。由此可见原发性高血压发生发展与遗传因素密切相关。16周龄空白组SHR大鼠最高血压SBP达到202 mmHg，测压过程中两只空白组SHR大鼠死亡，可见口吐粉红色泡沫，解剖可见肺淤血，推测该周龄高血压大鼠发生心脏靶器官损害较重，死于心衰。

现代医学认为原发性高血压发病机制主要集中在肾素-血管紧张素-醛固酮系统 (Renin-angiotensin-aldosterone system, RAAS) 激活、精神神经因素、血管内皮功能异常、胰岛素抵抗、肾性水钠潴留等方面,目前多围绕RAAS系统激活研究, 其中肝脏产生血管紧张素原 (AGT)，被肾小球入球小动脉的球旁细胞分泌肾素所激活，生成血管紧张素Ⅰ (AI) , 然后经肺循环的转换酶 (ACE) 作用，生成的血管紧张素Ⅱ(AII)是RAAS的主要物质, 作用于血管紧张素Ⅱ受体 (AT1) , 使小动脉平滑肌收缩, 刺激肾上腺皮质球状带分泌醛固酮, 通过交感神经末梢突触前膜的正反馈使去甲肾上腺素分泌增加,导致血压升高[7]。现代研究对于血管紧张素Ⅱ各项研究较多，但对作用于AGT降压的药物研究报道少见。

4.2 中医对高血压病因病机的认识 中医学并无“高血压”病名，但在我国的历代经典医籍文献中，对高血压病常见临床相类症状临床症状、证候表现、病因病机、病程演变规律及防治方法均已有详尽的论述。高血压临床常见症状有眩晕、头痛、心悸、颈部疼痛，伴恶心、呕吐、耳鸣等。因此对应于高血压临床症状，较为常见的中医病名多集中在“眩晕”“头痛”“肝阳”“肝风”等范畴。其中论述最为广泛的是“眩晕”“头痛”。中医有关于眩晕、头痛的最早记录可追溯至殷商时期，甲骨文记载“疾首”病名。另《周礼·天官》有“春时有痟首疾”的记载，清·袁枚《随园随笔·今疾病见古书》：“即《説文》之‘酸痟头痛’也”。对于眩晕、头痛的病因病机认识，最早且较为系统的则见于《黄帝内经》。《素问·至真要大论》有 “诸风掉眩，皆属于肝”的记载。以后医家多宗《内经》之说命名，宋代《全生指迷方》首次将眩晕作为独立病证专门论述。古之医家对眩晕、头痛的认识，多认为人体由于情志内伤、饮食失调、劳逸失衡、禀赋不足体质虚衰等各种起因的综合作用下，机体出现阴阳消长失调，特别是肝肾阴阳失调，由于肝肾阴虚，肝阳上亢，产生下虚上盛的病理现象，故见头痛、头晕、耳鸣等症。病久不愈，阴损及阳，则往往引发肾阳不足，亦可阴损于前，阳亏于后，最后产生了阴阳两虚之证。若阳胜化风、化火，肝风入络则见四肢麻痹，甚至口眼歪斜；肝火上冲，可见面红目赤，善怒。风火相煽，灼津成痰，若肝阳暴亢，则阳亢风动，血随气逆，挟痰挟火，横窜经络，扰乱心神，蒙蔽清窍，发生中风昏厥。近现代中医研究者对高血压进行了广泛研究，普遍认为高血压一病，主要病因为情志失调、饮食不节、久病劳伤、先天禀赋不足等。主要病理环节为风、火、痰、瘀、虚，与肝、脾、肾等脏腑关系密切。病机性质为本虚标实，肝肾阴虚为本，肝阳上亢，痰浊内蕴为标。高血压辨证分型有以脏腑分型，有以八纲分型，又有综合分型，或与现代医学相结合的分型等等。其中最早见于五十年代陈可翼将其分为肝热上冲型、阴虚肝旺型、怔忡型、胸痹型、肝风型、肝肾两虚型、中风型、妇女冲任不调型八个证型[8]。以后也有以阴阳为总纲，分为阳亢、阴虚阳亢、阴阳两虚和阳虚型。80年代中医《内科学》教材中则将八纲辨证与脏腑辨证结合起来，将本病分为肝火亢盛、阴虚阳亢、阴阳两虚和痰湿壅盛型[9]。中医认为，肝为五脏之一，其为阴中之阳，具有升发，喜条达，恶抑郁，体阴而用阳特性。其功能主疏泄、藏血、主筋而华爪、开窍于目，与胆相表里。其主疏泄即为肝气有疏通、畅达、宣泄的功能。如肝失疏泄，则气机不畅、淤血阻滞、经脉不利，以致血液不行，导致水肿等症状。中年人由于工作压力大，家庭压力大，居住要求、物质要求均较高，肝气不舒自在情理，同时“年过半百，阴液自半”，肝失涵养，肝郁化火，风阳上扰而成眩晕，正如《内经》云“阳气者，烦劳则张，精绝，辟积于夏，使人煎厥”，因此临床上中年高血压患者肝阳上亢、肝火亢盛、肝肾阴虚阳亢证型最为多见。

4.3 高血压中医治疗思路 中医治疗高血压与现代医学以降低血压为目的的思路不同，是以改善患者的症状、体征，进而达到降低血压的目的。不论各位医家对高血压病的病因病机分型有何不同，治则总离不了辨证论治的范畴。其中，常见的基本辩治思路多从肝肾着手，治法上多尊古方，诸如平肝熄风法、补益气血法、补肾填精法、燥湿祛痰法、活血化瘀法；以及温补肝阳法、引火归元法、益气养阴、益气活血法等。根据中年人高血压的常见证型围绕中医肝辨证的簇集现象，认为中年原发性高血压治疗上当宗平肝潜阳、补益肝肾、滋阴熄风之法，即围绕中医治肝为主，根据患者病情采用平肝、清肝、疏肝、养肝等法，标本兼治。

中年稳压胶囊根据平肝、清肝、疏肝、养肝治肝降压机制而成方。以期为中年高血压人群提供较为有利的治疗手段和疗效，改善该类人群的生活质量。全方选用天麻、桑叶、钩藤、菊花、生石决明、牡蛎、珍珠母、决明子、夏枯草、栀子、茵陈、黄芩、水牛角、罗布麻、银花、豨签草、南沙参、二地、二冬、石斛、制首乌、龟板、鳖甲、玄参、黄芪、黑蚂蚁、枳实、石菖蒲、薏苡仁、茯苓、车前子、川芎、丹参、当归、红花、三七、葛根、益母草、三七花、石莲子、怀牛膝、蜈蚣、全蝎共四十三味药。方中天麻性味甘、平，归肝经，有息风止痉，平抑肝阳，祛风通络功能。现代研究[10]有降低外周血管、脑血管和冠状血管阻力，并有降压，减慢心率作用。钩藤性味甘、凉。归肝、心包经。有清热平肝，息风定惊之效。现代药理研究[11]证实钩藤、钩藤碱及钩藤总碱对各种动物的正常血压和高血压都具有降压作用，此外，还有抑制血小板聚集及抗血栓、降血脂等作用。菊花性味辛、甘、苦，微寒，归肝、肺经，功效疏散风热，平抑肝阳，清肝明目，清热解毒。《神农本草经》记载：“主诸风头眩、肿痛”。《本草纲目拾遗》记载：“专入阳分。治诸风头眩”。决明子对动物有降压[12]、降血脂及抗血小板聚集作用[13]。结合桑叶、生石决明、牡蛎、珍珠母共同平肝抑阳。夏枯草辛、苦，寒。归肝、胆经，功效清热泻火，明目，散结消肿。茵陈[14]、水牛角[15]等清热药有降压、降血脂、抗氧化作用。罗布麻平抑肝阳，清热，利尿，罗布麻叶煎剂有降压作用[16]，配合栀子、黄芩、银花、豨签草清泄肝热。天冬中含天冬酰胺，可使外周血管扩张、血压下降[17]。生地甘、苦，寒。归心、肝、肾经，补益肾阴，与南沙参、熟地、麦冬、石斛、制首乌、龟板、鳖甲、玄参皆有补益肝阴治本之效。黄芪益气；枳实、石菖蒲疏肝理气；车前子有效成分可扩张血管以及兴奋副交感神经,阻抑交感神经，可改善胰岛素抵抗所致的交感神经兴奋性增加，从而降低IR，提高胰岛素敏感性[18]，联合薏苡仁、茯苓淡渗利湿以加强降压作用。丹参、红花能活血化瘀。葛根，现代研究表明不仅能直接扩张血管，有明显降压作用[19]，葛根素还能抑制血小板凝集、改善微循环及广泛的β-受体阻滞作用[20]。三七花、石莲子清心火，二者均有降压作用。怀牛膝引气下行。蜈蚣、全蝎归肝经，善能息风镇痉，攻毒散结，通络止痛。诸药合用，共奏平肝潜阳、清泻肝热、疏肝理气、滋补肝阴、活血养血之效。对于原发性高血压，尤其是中年高血压的治疗以达标本兼顾之效。

原发性高血压人群中，中年高血压病患逐年增加，中青年正处于生活和事业的高峰期, 有效控制血压, 防治心脑血管疾病危险因素, 减少高血压靶器官损害的发生率、致残率、致死率, 对中青年高血压患者意义尤为重大。本研究通过观察不同给药时期药物对SHR大鼠血压影响的结果，评估中年稳压胶囊对SHR大鼠的降压作用。通过实验观察到给药一周对SHR大鼠的血压影响不明显。给药三周观察提示中年稳压胶囊可以推迟高血压大鼠高血压上升平台期。给药五周结果提示中年稳压胶囊对大鼠高血压有显著明显降压效果，根据研究证实中年稳压胶囊可以有效控制成年SHR大鼠高血压发展。基于高血压发病机制中西医病因病机研究，认为治肝降压理论与RAAS系统中血管紧张素原的靶向调控可能有密切关系，有待于进一步研究证实。