合并巨细胞病毒感染对小儿乙型肝炎疫苗初次免疫应答的影响

叶明 徐璐 赵子华 段双霞

巨细胞病毒(HCMV)易进入母体导致新生儿出现先天性感染，使胎儿出现发育迟缓现象，出生后免疫功能降低，持续感染发生可能性加大[1]。我国是HCMV感染率较高的国家，而新生儿免疫功能低下，对病毒抵抗力小，被感染时身体免疫机能会遭受严重破坏[2-3]。乙肝疫苗在1992年成为我国计划免疫疫苗之一，新生儿出生后24 h内需要接种乙肝疫苗[4]。临床上关于HCMV感染对乙肝疫苗效果的影响研究结果较少，本研究通过对比有HCMV感染和无HCMV感染的新生儿初次免疫应答情况，了解HCMV的可能影响机制。

资料与方法

一、一般资料

选取新乡市中心医院2017年1月至2018年1月148例足月出生且出生后24 h内完成接种乙肝疫苗的新生儿(未接种第二针乙肝疫苗)，其中纳入确诊为HCMV感染的患儿74例计为观察组，另选未被HCMV感染的新生儿74例计为对照组。观察组男、女分别为42、32例，日龄20～34(25.52±3.09)d；对照组男、女分别为41、33例，日龄21～35(25.57±3.05)d，两组资料基本相当(P>0.05)。本研究经院医学伦理委员会通过。纳入标准：①日龄20～35 d；②父母乙肝指标均为阴性，抗HBsAb滴度≥10 mIU/mL；③家长知情同意。排除标准：①其他肝炎病毒感染者；②其他病原感染(风疹病毒、EB病毒及弓形体)及遗传代谢疾病；③先天性畸形；④存在自身免疫性肝炎。

二、研究方法

(1)初次免疫后检测两组血清乙肝表面抗体(抗-HBs)、白细胞介素(IL)-2、IL-6水平，早上空腹抽取静脉血2 mL。ELISA检测血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平。

(2)记录两组对乙肝疫苗初次免疫应答情况 用CMIA法检测抗-HBs，儿童HBsAb，HBsAb阴性者检测HBV-DNA。正常应答：抗-HBs>100 mIU/mL，低应答：抗-HBs在10～99 mIU/mL，无应答：抗-HBs<9 mIU/mL且HBsAb、HBV-DNA均为阴性。

(3)检测两组细胞免疫指标水平，取入选对象静脉血1 mL，采用流式细胞仪上机检验CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

三、统计学分析

结 果

一、两组血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平比较

观察组抗-HBs、IL-2水平低于对照组，IL-6水平高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组抗-HBs、IL-2、IL-6水平比较(±s)

二、两组乙肝疫苗初次免疫应答比较

观察组新生儿对乙肝疫苗初次免疫保护应答率67.57%低于对照组85.14%(P<0.05)，见表2。

表2 两组乙肝疫苗初次免疫应答比较[n(%)]

三、两组细胞免疫指标比较

观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于对照组(P<0.05)，CD8+水平高于对照组(P<0.05)，见表3。

表3 两组细胞免疫指标比较(%，±s)

讨 论

婴儿感染HCMV多为先天性感染，新生儿免疫功能低下，对病毒的抵抗力较小，病毒进入体内后易造成细胞免疫功能低下，进而会对机体免疫功能造成损害[5-6]。我国乙型肝炎发病率较高，乙肝病毒携带者多，接种乙肝疫苗后机体会出现免疫应答情况，可有效预防和控制乙肝病毒的传播[7]。HCMV感染对乙肝疫苗效果的影响目前研究结果较少，为进一步了解HCMV对乙肝疫苗效果的影响，本研究对148例新生儿进行观察，记录新生儿初次免疫应答情况，分析其HCMV可能影响机制，现已经取得有效成果。

本研究中，观察组血清IL-2、抗-HBs水平比对照组低，血清IL-6水平比对照组高，观察组新生儿对乙肝疫苗初次免疫保护应答率比对照组低，表明被巨细胞病毒感染的患者初次免疫应答率低于未被病毒感染的患者。接种乙肝疫苗后，乙肝病毒表面抗原进入机体，机体免疫功能发生作用产生特异性抗体，当乙肝病毒再次进入机体，特异性抗体与外来抗原反应产生免疫反应[8-9]，因此，乙肝疫苗作用的激发，特异性抗体的出现是以机体自身免疫功能发生作用为前提的[10]。HCMV可以感染机体多个器官和组织中的间质细胞、实质细胞和血细胞，例如肝脏中的细胞，肝脏不止有内分泌、消化器官，还有免疫器官，机体被HCMV感染后，免疫功能下降，IL-6过度分泌，IL-2下降，促进免疫细胞再生和肝功能修复，机体免疫调节功能紊乱[11-12]。当被HCMV感染的患儿接种乙肝疫苗时，免疫功能低下的机体对乙肝疫苗的免疫反应明显下降，分泌血清抗-HBs水平降低，特异性抗体数量不够，初次免疫应答强度变弱，免疫应答率变低[13]。韩启军等[14]对小鼠进行实验的研究结果与本研究结果相似。

本研究中，观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比对照组低，而CD8+水平高于对照组，表明受HCMV感染的患儿相对于未被感染的患儿而言其免疫功能更加低下。CD4+作为一种分泌性细胞因子，具有趋化、活化淋巴细胞功能和炎症细胞的作用。CD8+可抑制T细胞增殖和B细胞抗体免疫反应，CD4+/CD8+降低是免疫功能破坏程度的重要指标[15]。HCMV感染导致细胞功能和结构紊乱，此时细胞表面抗体识别抗原和处理抗原能力减弱，新生儿体内对病毒具有清除能力的细胞增殖速度及免疫功能降低[16-17]。温丽等[18]对103例巨细胞病毒感染儿童的研究结果与本研究结果相似。

综上，合并巨细胞病毒感染会抑制新生儿机体免疫功能，使机体对乙肝疫苗初次免疫时抗-HBs水平、IL-2、IL-6水平降低，免疫应答率降低，应答强度减弱。