肝癌患者实时超声造影灌注参数与肿瘤微血管的相关性分析

王美霞

(安阳市第三人民医院 超声科，河南 安阳 455000)

肝癌是临床较为常见的恶性实体肿瘤。恶性实体瘤的生长、发展与肿瘤新生血管有着密切联系[1]。肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD)可有效评估肝癌患者肿瘤微血管情况，对于评估患者病情有着重要意义[2]。目前，临床主要采用超声造影对肝癌进行诊断和预后评估。超声造影可利用对比剂提升超声检查的分辨率，同时超声造影能够较好地反映病变组织的血流灌注情况。相关研究显示，新生血管的增加可提高血管通透性，继而使血流灌注发生改变[3]。鉴于此，本研究通过分析肝癌患者实时超声造影灌注参数与MVD的相关性，旨在对肝癌血流灌注情况的超声评估提供参考，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2019年7月至2020年7月安阳市第三人民医院收治的55例肝癌患者的临床资料行回顾性分析。男40例，女15例；年龄42～67岁，平均(54.50±4.07)岁；病程1～4 a，平均(2.40±0.51)a；TNM分期Ⅱ期18例，Ⅲ期37例；病理分类为巨块型19例，结节型16例，弥散型20例。本研究经安阳市第三人民医院伦理委员会审核批准通过。

1.2 选取标准纳入标准：(1)符合《内科学》肝癌的诊断标准[4]；(2)肿瘤无法切除；(3)预计生存期≥6个月。排除标准：(1)大量腹水；(2)合并感染，如肝脓肿等；(3)肿瘤占全肝≥70%。

1.3 造影方法行超声造影前，使用二维超声观察肝癌患者病灶，记录病灶位置、数目及回声特点等。使用对比脉冲序列成像技术，进入造影状态，经肝癌患者肘静脉团注对比剂2.4 mL，然后注入5 mL 9 g·L-1的氯化钠注射液，然后进行造影检查，持续6 min。

1.4 评价指标(1)实时超声造影灌注参数：记录患者行检查时病灶峰值的绝对增强强度(absolute enhancement of lesions，AEI)、病灶达峰时间(time to peak，TTP)及峰值强度(peak intensity，PI)值。(2)MVD：穿刺活检取得样本后切片，使用抗CD34单克隆抗体SP法免疫组织化学染色，严格遵照说明书操作，试剂盒来自贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司；使用100倍生物显微镜[奥林巴斯(中国)有限公司]，选出5个血管高密度区作为观察对象，然后使用400倍光镜统计阳性血管数，肿瘤细胞组织中与肿瘤组织和邻近微血管分界清晰的内皮细胞或细胞组团属于新的肿瘤血管，计为1个微血管，MVD值为5次计数平均值。

2 结果

2.1 实时超声造影灌注参数及MVD化疗3个疗程后，MFD、PI、MVD低于化疗前、化疗1个疗程，TTP高于化疗前、化疗1个疗程，差异有统计学意义(P<0.05)；化疗1个疗程后，MFD、TTP、PI、MVD低于化疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；3个时点AEI比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 不同时点实时超声造影灌注参数及MVD比较

2.2 实时超声造影灌注参数与MVD的相关性分析经双变量Pearson相关性分析结果显示，肝癌患者MVD与MFD、PI水平呈正相关(r>0，P<0.05)，与TTP水平呈负相关(r<0，P<0.05)，肝癌患者MVD与AEI无相关性(P>0.05)。见表2。

表2 实时超声造影灌注参数AEI、MFD、TTP、PI与肝癌患者MVD的相关性分析

3 讨论

新生血管为肿瘤细胞提供营养，并帮助肿瘤细胞代谢废物，促进肿瘤细胞生长与增殖，而增殖的肿瘤细胞进入血液循环后进一步扩散，加重患者病情[5]。MVD可通过特异性抗体评估肿瘤微血管情况，对评估肝癌患者病情与疾病发展有着积极作用，但MVD检查相对费时、费力，临床适用性较低[6]。

实时超声造影可利用二维超声影像及血流多普勒信号反映病变组织及正常组织血流灌注情况[7]。相关研究显示，新生血管在促进肿瘤组织生长的同时可不断释放血管生长因子，进一步促进新生血管生成。同时新生血管外周间隙较大及通透性增高可导致肿瘤血流灌注发生变化[8]。本研究结果显示，化疗3个疗程后，MFD、PI、MVD低于化疗前；化疗1个疗程后，TTP高于化疗前、化疗1个疗程。经相关性分析显示，肝癌患者MVD与MFD、PI水平呈正相关，与TTP水平呈负相关，进一步验证了实时超声造影灌注参数AEI、MFD、TTP、PI与肝癌患者MVD的关系。其原因可能是，MVD数值大表明患者新生血管多，血供丰富。新生血管增多使得对比剂微泡灌注量增加，从而使血肿小界面增加，回声反射强度增强，肿块回声增强，在超声造影中表现为PI增强及TTP增快[9]。肿瘤快速生长可进一步增加血供，增加微血管密度。超声造影可发现，肿瘤组织内微泡数量增加，超声造影中增强部分占肿瘤有效面积比率增大，MFD值升高[10]。肿瘤新生血管分支紊乱，管径增粗，伴有异常血管网存在，同时肿瘤新生血管基底膜不完整，外周间隙大，通透性较高，均可导致肿瘤血流灌注量增加[11]。在低机械指数的超声造影中，对比剂微泡几乎不会被破坏，肿瘤血流灌注量增加使得对比剂微泡也随之增加，从而使超声造影增强明显。但随着化疗对肿瘤细胞的杀伤，肿瘤细胞及肿瘤新生血管生长均受到抑制，MVD值降低，因血流灌注的减少，超声造影参数MFD、PI降低，TTP升高[12]。但肝癌患者MVD与AEI无相关性，其原因可能是肝脏受呼吸运动影响较大，在造影过程中，难以将取样框固定在某一平面特定位置。由于本研究样本量较小，肝癌患者MVD与AEI相关性有待进一步扩大样本量进行研究。

综上所述，实时超声造影灌注参数MFD、PI、TTP与肝癌的MVD具有良好相关性，临床可通过评估超声造影灌注参数分析患者血管新生情况。