非小细胞肺癌260例DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变状况及临床意义

杜鎣淦，孙绍星，陆允平，周志有

肺癌的发病率及死亡率居于恶性肿瘤之首[1]，是严重危害人们生命健康的恶性肿瘤之一。肺癌根据病理类型分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌。其中NSCLC占绝大多数，约为85%，其病死率占据世界癌症首位[2-3]。目前，因肺癌治疗手段单一，导致晚期肺癌患者生存期短，生存质量难以得到保障。因此对其病理研究与治疗显得尤为重要[4-5]。本研究通过检测NSCLC患者癌组织细胞中甲基转移酶3A（DNMT3A）、基因关联蛋白A（MGA）及磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基r基因（PIK3CG）突变状况，以探究其检测意义。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2015年2月至2019年10月浙江省金华市中心医院收治的260例NSCLC患者，男119例，女141例；年龄20～80岁，平均（48.3±8.2）岁；腺癌（ADC）186例，鳞癌（SQC）74例；其中120例发生淋巴结转移；102例有吸烟史，158例无吸烟史。本研究经过伦理委员会批准，且在征得患者本人及家属的同意下进行。

1.2 方法采集所有患者术中切除的癌组织或活体组织，送至长沙健路医学检验所检测DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突变情况。具体方法：（1）通过组织切片机（上海寰熙医疗器械有限公司，KD-3358）将组织切成4 m切片，置于EP试管中使其充分消化。（2）利用双链DNA试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）提取DNA，将所提取的DNA采用扩增阻滞突变系统进行DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变检测；提取的DNA作为模板，使其进行聚合酶连反应扩增，反应结束后根据聚合酶连反应仪输出的结果判断其突变情况。若突变位点有扩增，且Ct值≤35，则表明该样品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变阳性；若突变位点无扩增，且Ct值＞35，则表明该样品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变阴性。

1.3 观察指标观察肺癌患者癌组织细胞中DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变情况，并分析其与病理特征的关系。

1.4 统计方法采用SPSS 25.0统计软件进行分析，计数资料采用2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变情况260例NSCLC患者中DNMT3A基因突变阳性50例（19.2%），MGA基因突变阳性31例（11.9%），PIK3CG基因突变阳性23例（8.8%）。

2.2 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变与病理特征的关系NSCLC患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变与性别、吸烟情况无关（均P＞0.05），与病理类型有关（P＜0.05），且发生淋巴结转移的患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突变率明显高于未发生淋巴结转移患者。见表1。

表1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变与病理特征的关系 例

3 讨论

肺癌由多基因参与，且病变过程复杂，临床研究发现越来越多的基因与肿瘤相关[6-8]。目前，肺癌治疗主要通过对敏感基因突变患者实施靶向药物治疗，其有一定的疗效。肺癌分子靶向治疗所关注的是NSCLC患者基因突变的共存及耐药机制，随着医疗技术及检测仪器的进步，多重基因检测被应用于临床[9-10]。患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变、基因间的双突变及多突变的检测对靶向药物的选择提供了理论依据[11-12]。

DNMT3A表达指标与肝细胞癌及黑色素瘤有关，DNMT3A突变发生于11号外显子移码突变，常发生在急性髓细胞白血病中，其突变率可高达30%[13-14]。MGA可调节靶基因Max和T-box表达的双特异性转录因子，它与碱性螺旋异源二聚化参与细胞增殖来调节基因表达[15]。MGA可作为转录激活因子或阻遏蛋白，转录激活依赖于Max。因MGA基因内含子的剪接突变可导致MGA突变，该基因突变常在肺癌、白血病及淋巴瘤中表达。PIK3CG（p110-r）是类磷脂酰肌醇3激酶家族中唯一成员，它与IA类家族成员一起生成重要的第二信使PIP2。然而，PIK3CG与IA类酶不同，后者将信号传导至受体酪氨酸激酶下游，而前者将信号传导至GPCR下游[16]。p110-r作为催化亚基，其在磷酸化磷脂酰基醇的脂质和蛋白发挥激酶作用。其主要表达在白蛋白中，且通过与Ras和G-蛋白耦联受体作用参与免疫细胞应答和炎性刺激中。PIK3CG作用于细胞外信号传导使细胞表面受体与细胞内信号传导网络相连接，激活后下游信号可促进细胞的存活、增殖生长和运动。PIK3CG突变主要发生于4号外显子的突变，该基因突变常表达于骨髓恶性肿瘤[17]。

本研究结果显示，260例NSCLC患者中DNMT3A基因突变阳性50例（19.2%），MGA基因突变阳性31例（11.9%），PIK3CG基因突变阳性23例（8.8%）；NSCLC患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突变与性别及吸烟情况无关，但与病理类型、淋巴结是否发生转移有关，且淋巴结转移会提高DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突变率。