2 389例女性宫颈 HPV感染情况及HPV亚型分析

程海霞,周德祥,段清珍

天津市滨海新区中医医院1：病理科；2.妇科，天津 300451

宫颈癌是我国女性常见的恶性肿瘤之一,且近年来宫颈癌的发病有年轻化趋势[1]。目前已明确人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈病变密切相关，而高危型HPV持续感染是宫颈癌前病变和宫颈癌的主要致病因素[2]，不同地区女性宫颈HPV感染率及亚型分布存在地域性差异[3]。本研究通过对滨海新区女性宫颈HPV感染状况及其亚型进行分析，旨在为本地区宫颈癌的防治工作和针对性疫苗研制提供数据和参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析2019年于本院妇科门诊行宫颈癌筛查的2 389例患者的HPV检测结果，年龄17～73岁，中位年龄38岁。

1.2仪器与试剂 Hema 14D台式高速离心机、东胜龙ETC811基因扩增仪、YN-H16全自动核酸分子恒温杂交仪、OLYMPUS BX41显微镜及病理图像管理分析系统。基因提取试剂盒及PCR-反向斑点杂交法HPV-DNA分型检测试剂盒。

1.3方法

1.3.1标本采集 使用宫颈细胞专用取样刷采集宫颈外口及宫颈管脱落细胞，用棉拭子拭去宫颈口多余的分泌物，用宫颈取样刷在宫颈口顺时针旋转3～5圈，将刷头置于含有细胞保存液的专用样本收集管中，做好标记，及时送检。

1.3.2HPV检测 采用亚能生物公司检测试剂盒，按照试剂盒使用说明操作，使用PCR-反向斑点杂交技术检测患者宫颈细胞中的23种HPV基因亚型，其中17种高危亚型(Hr-HPV)分别为16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82型；6种低危亚型(Lr-HPV)分别为6、11、42、43、81、83 型。

1.4统计学处理 采用SPSS20.0统计软件进行数据分析处理。计数资料以例数或百分率表示，采用χ2检验进行比较。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1HPV感染率 2 389例HPV检测患者中，HPV阳性540例，总感染率为22.60%，其中高危型感染者388例，占HPV感染者的71.85%，低危型感染者74例，占HPV感染者的13.70%，高、低危型混合感染者78例，占HPV感染者的14.44%；单一型感染者389例，占HPV感染者的72.04%，多重感染者151例，占HPV感染者的27.96%。见表1。

表1 2 389例检测者HPV感染情况[n(%)]

2.2HPV亚型总体分布情况 在540例HPV阳性者中，共检出23种HPV 亚型。高危型HPV检出率最高的是HPV16(18.15%)，其次是HPV52(13.52%)、HPV53(9.81%)、HPV51(9.44%)、HPV68(8.89%)；低危型HPV检出率最高的是HPV42(8.70%)，其次是HPV43(7.78%)、HPV81(6.85%)。其中HPV16、HPV52、HPV53、HPV56、HPV81是多重感染例数最多的5个型别。见表2。

表2 540例HPV阳性患者中HPV亚型总体分布情况[n(%)]

续表2 540例HPV阳性患者中HPV亚型总体分布情况[n(%)]

2.3HPV感染的年龄分布情况 按照检测者年龄分为≤30、>30～40、>40～50、>50～60、>60岁。不同年龄者HPV感染率随年龄增大而逐渐增高。>60岁感染率最高，为29.55%，各年龄总感染率比较，差异均无统计学意义(χ2=5.12，P>0.05)。各年龄均以高危型感染为主，其中>60岁高危型HPV感染率最高，为22.73%；低危型HPV感染率最高的是>50～60岁，为5.70%；高、低危型混合感染率最高的是>60岁，为6.82%。见表3。不同年龄者HPV亚型检出情况不同，≤30岁感染率最高的亚型是HPV52(14.74%)和HPV51(14.74%)；其余各年龄者感染率最高的亚型均为HPV16，以>40～50岁最高(21.47%)；HPV52感染率最高的是>60岁(15.38%)。见表4。

表3 各年龄者HPV感染分布情况[n(%)]

表4 各年龄者HPV阳性者各亚型分布情况[n(%)]

3 讨 论

宫颈癌是仅次于乳腺癌的女性第二大常见妇科恶性肿瘤，严重威胁女性健康和生命。某些高危型HPV持续性感染是宫颈癌和癌前病变的主要原因。2012年美国阴道镜和子宫颈病理协会制定宫颈癌筛查指南将高危型HPV检测和宫颈细胞学共同纳入筛查体系，2015年提出将HPV检测作为初筛宫颈癌的策略。HPV 感染的流行病学在不同国家和地区存在地域性差异，因此，各地区对宫颈病变患者进行HPV分型检测及流行病学调查对宫颈癌的早期防治有重要意义。

目前，已分离鉴定的HPV 亚型超过100多种，能感染女性生殖道的有40多种，根据致病性差异分为高危型和低危型，低危型主要与外生殖器尖锐湿疣等良性病变有关，而高危型与宫颈癌和癌前病变密切相关[4]。本研究中滨海新区女性HPV总感染率为22.60%，低于天津地区(31.60%)的平均水平[5]，也低于湖北地区(27.86%)[6]和西安地区(30.45%)[7]，高于江西地区(20.94%)[8]和沈阳地区(18.60%)[9]。我国不同地区HPV感染率存在地域性差异，这可能与年龄、生活习惯及性生活频率等有关。本研究中滨海新区女性HPV感染亚型以高危型为主(71.85%)，略高于天津市区(63.35%)，感染率排前3位的亚型分别是HPV16、HPV52和HPV53，与广州地区优势亚型一致[10]，感染型别与天津市前3位亚型(HPV16、HPV56、HPV58)比较有所差别，与江西地区感染亚型以HPV52、HPV16、HPV58为主亦有不同，而与中国地区流行病学总体调查结果高危型主要是HPV16一致[11]。本地区女性宫颈感染HPV亚型分布与其他地区比较有一定差异，这对本地区针对性的HPV疫苗研发有指导意义。

本研究中HPV感染以单一型为主，占HPV感染者的72.04%(389/540)，多重感染率为27.96%(151/540)，其中高危型感染者中单一感染318例，占高危型感染者的81.96%(318/388)，高危型感染者中多重感染率为18.15%，其中HPV16、HPV52、HPV53、HPV56、HPV81型是多重感染例数最多的5个型别。 HPV的多重感染对宫颈病变的发展有促进作用，因此，加强HPV感染的检测可以对宫颈癌的发生风险进行早期预测。本研究结果表明，滨海新区不同年龄段女性的HPV感染率随年龄增大而逐渐增高，其中>60岁HPV感染率(29.55%)最高，中老年人感染率较高可能与机体免疫力下降有关。各年龄者均以高危型感染为主，其中>60岁高危型HPV感染率(22.73%)最高，且高、低危型混合感染率(6.82%)最高；低危型HPV感染率(5.70%)最高的是>50～60岁。不同年龄者HPV亚型检出情况不同，≤30岁感染率最高的亚型是HPV52和HPV51；其余各年龄者感染率最高的亚型均为HPV16，以>40～50岁感染率(21.47%)最高，这与此年龄段是宫颈癌病变高发年龄段相符。因此，要加强对高危型HPV的检测和随访。

综上所述，HPV检测已成为宫颈癌筛查的常规检测项目，由于HPV感染的分布存在地域性差异，通过对女性宫颈HPV进行检测和感染亚型的分析，了解本地区HPV基因亚型分布特点，对本地区宫颈癌的早期防治和疫苗研发有重要意义。