促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性纯红细胞再生障碍性贫血的疗效及相关机制

王丽丽，韩明明

河北省保定市第二中心医院检验科，河北保定 072750

纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)是骨髓红细胞系选择性再生障碍所导致的一组少见综合征，包括获得性及先天性两种类型。临床治疗一般以免疫抑制治疗为主，但该治疗方法在不同患者中的疗效不一[1]。PRCA主要发病机制为自身免疫耐受失调、细胞免疫功能持续异常、炎性反应等。可溶性Fas分子(sFas)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、CD4+、CD25+是与PRCA发生相关的重要因子[2-3]。T淋巴细胞具有一定的免疫调节作用，可维持免疫平衡，当发生自身免疫性疾病时会出现T淋巴细胞的功能及数量异常[4]。本研究探讨了促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性PRCA的疗效，以及对炎症因子sFas、TNF-α、IL-2和T淋巴细胞亚群水平的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2020年4月本院收治的老年获得性PRCA 患者80例作为研究对象，采用信封密封法随机分为对照组(给予环孢素A治疗)和研究组(给予促红细胞生成素联合环孢素A治疗)，每组各40例。对照组中男27例，女13例；年龄60～75岁，平均(67.54±6.43)岁；血红蛋白(Hb)42～80 g/L，平均(55.54±5.55)g /L；网织红细胞百分比0.17%～0.65%，平均(0.25±0.03)%。研究组中男28例，女12例；年龄61～76岁，平均(68.63±6.53)岁；Hb 43～81 g /L，平均(55.66±5.38)g /L；网织红细胞百分比0.16%～0.66%，平均(0.26±0.04)%。两组患者性别、年龄、Hb、网织红细胞百分比等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有患者及家属均对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2纳入和排除标准 纳入标准：(1)年龄≥60岁；(2)临床资料完整，治疗依从性较高；(3)符合获得性PRCA诊断标准[5]。排除标准：(1)近6个月内使用过免疫抑制剂、皮质类固醇激素；(2)有心、肝、肺、肾等器官功能不全；(3)合并其他血液系统疾病；(4)合并其他具有贫血表现的疾病。

1.3方法 对照组患者给予环孢素A(福建科瑞药业有限公司，国药准字：H10930026)治疗，3～5(kg·d)，静脉滴注，连续治疗10 d，随后改为口服，120～160 mg/d，并根据血清胆红素、肌酐水平及环孢素A血药浓度调整使用剂量，疗程为6个月。研究组患者给予促红细胞生成素联合环孢素A治疗，环孢素A用法与对照组相同，促红细胞生成素(沈阳三生制药股份有限公司，国药准字：S20010001)80～120 U/kg，每周2次，皮下注射。每个月检测患者血细胞比容(Hct)、Hb水平，当Hct超过33%或Hb超过100 g/L时，可减少促红细胞生成素剂量，维持剂量为60 U/kg，疗程为6个月。

1.4观察指标 (1)比较两组患者临床疗效，显效：贫血情况有较大好转，贫血症状消失，女性Hb>100 g/L，男性Hb>120 g/L，随访3个月无复发；有效：贫血情况逐渐好转，贫血症状改善，女性Hb>100 g/L，男性Hb>120 g/L，白细胞计数约为3.5×109/L，随访3个月后病情稳定或者无进一步恶化；无效：以上标准均未达到[6]。总有效率=(有效例数+显效例数)/总例数×100%。(2)比较两组治疗前T淋巴细胞亚群水平。采集空腹外周血2 mL，EDTA抗凝，采用美国BD公司生产的FACS Calibur流式细胞仪及配套试剂盒检测CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+。(3)比较两组患者治疗前后sFas、TNF-α、IL-2水平。sFas、TNF-α检测采用酶联免疫吸附试验，其检测水平以A值表示；IL-2检测采用放射免疫分析法。

2 结 果

2.1两组患者临床疗效比较 研究组患者治疗总有效率高于对照组，差异有统计学意义(χ2=7.988，P<0.05)，见表1。

表1 两组患者临床疗效比较[n(%)]

2.2两组患者治疗前T淋巴细胞亚群水平比较 研究组患者治疗前CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+水平均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前T淋巴细胞亚群水平比较

2.3两组患者治疗前后sFas、TNF-α、IL-2水平比较 两组患者治疗前sFas、TNF-α、IL-2水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；两组患者治疗后sFas、TNF-α、IL-2水平均较治疗前降低，且研究组均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 两组患者治疗前后sFas、TNF-α、IL-2水平比较

3 讨 论

目前，获得性PRCA的发病机制尚未完全明确，但有研究显示其属于CD4+功能亢进的免疫性疾病，且T淋巴细胞免疫表型、数量的变化都与其发病有关[7-8]。获得性PRCA患者调节性T淋巴细胞(Treg)百分比与患者病情严重程度有一定关系，Treg可抑制CD4+的活性，导致其分泌的转化生长因子-β、IL-35、IL-10水平均较低[9-10]。

获得性PRCA患者T淋巴细胞免疫功能失衡，同时IL-2、TNF-α等造血调控因子的分泌不断增加，这些均可能与其发病相关[11]。CD4+CD25+可通过免疫抑制作用抑制自身反应性T淋巴细胞的活化，维持免疫功能平衡。自身免疫性疾病中，如特发性血小板减少性紫癜、重症肌无力、系统性红斑狼疮、多发性硬化、1型糖尿病等均存在CD4+CD25+水平明显降低。获得性PRCA患者在发病初期CD4+CD25+水平均有所下降，但在联合治疗后患者造血系统功能逐渐恢复，CD4+CD25+也不断接近正常水平[12]。CD4+CD25+通过分泌免疫调节因子不断调节T淋巴细胞来控制自身的反应性，还可直接通过T淋巴细胞发挥作用[10]。人体内CD4+CD25+水平失衡后，其抑制IL-2的能力会有所下降，维持免疫耐受的作用也会下降，体内活化T淋巴细胞增殖，体液免疫亢进，最终引起PRCA。本研究中，研究组患者治疗前CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+水平均低于对照组，提示老年获得性PRCA患者存在免疫功能异常。

研究组患者治疗总有效率高于对照组，提示促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性PRCA的效果优于单独使用环孢素A治疗。sFas是细胞表面的一种凋亡信号受体，能通过促进Fas分子聚合而诱导细胞凋亡，在PRCA患者中呈异常高表达；IL-2、TNF-α是临床常见的炎症因子，当机体免疫功能失衡后，IL-2、TNF-α表达上调，可抑制造血，参与粒-单系造血祖细胞生长，在PRCA的发生和发展中具有重要作用[13]。本研究中两组患者治疗后sFas、TNF-α、IL-2水平均较治疗前降低，且研究组均低于对照组，提示促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性PRCA能够改善患者的造血功能障碍，控制病情发展。

综上所述，老年获得性PRCA患者存在免疫功能失衡，促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性PRCA效果佳，治疗有效率高，能有效调节患者免疫功能，改善造血障碍，值得临床推广应用。