中草药饲料添加剂对三黄鸡血液生化指标和免疫功能的影响

李姣清， 黄勋和， 余史婷， 翁茁先，2， 张宝菁， 李威娜

（1.广东省山区特色农业资源保护与精准利用重点实验室，广东省五华三黄鸡科技创新中心，嘉应学院生命科学学院，广东梅州514015；2.湖南农业大学动物科学技术学院，湖南长沙410128）

抗生素在一定浓度下能抑制和杀死细菌类微生物，抑制肠道有害菌繁殖，降低发病率，但不规范的使用也会导致病原微生物产生耐药性，引发肠道菌群失衡，且其经过消化吸收后会随血液分布到机体的各个器官组织，使机体的免疫能力下降，影响其健康生长（方磊涵，2018；郭鹏等，2017）。 抗生素长期使用还会让其中的有害成分沉积在畜禽体内，严重危害到人体健康，世界各国分别在不同时期限制或禁止抗生素在动物饲料中的应用。 因此，寻找安全有效的抗生素替代品成为目前迫在眉睫的问题。 中草药存在于大自然中，是我国传统医学预防疾病所用的药物，既能抗病保健，提高生产性能，同时又具有低毒副作用、不易产生耐药性、无药物残留等优点，是一种理想的取代抗生素的绿色饲料添加剂（魏恒，2018；王清峰，2018）。 因此本试验拟筛选出合适的中草药复方制剂作为饲料添加剂，探索其对三黄鸡育雏阶段血液生化指标和免疫功能的影响，确定中草药添加剂的最佳配伍组合和最佳剂量，为其作为有效的抗生素替代品应用于实际生产提供理论依据和实践参考。

1 材料与方法

1.1 中草药制剂的制备 试验用复方中草药以抗菌消炎、理气消食、益脾健胃及增强免疫为组方原则配制。 中草药添加剂主要成分为黄芪、人参、土炒白术、当归、陈皮、山楂、甘草、柴胡、熟地、玄参、生地等，购于梅州市中医院医院。 采用水煎法提取中草药有效成分，称取药材10.0 g，加10 倍量蒸馏水浸泡30 min， 加热至沸腾文火保持30 min，用六层纱布过滤，药渣再加8 倍量蒸馏水，加热至沸腾文火保持30 min，六层纱布过滤，合并2次滤液， 滤液经80 ℃恒温水浴浓缩至原生药量1.0 g/mL，115 ℃高压灭菌20 min，4 ℃保存备用。

1.2 试验动物分组及管理 健康的1 日龄五华三黄鸡（150 羽），由广东客家黄畜牧有限公司提供。基础日粮适应性饲喂至7 d 后随机分成5 组，每组3 个重复，每个重复10 羽。 试验期共42 d。Ⅰ组为空白对照组，饲喂基础日粮；Ⅱ组为抗生素组，在基础日粮中按阿莫西林粉剂使用说明添加0.06%的量， 阿莫西林可溶性粉购自河南健恒动物药业有限公司； Ⅲ、 Ⅳ、 Ⅴ组分别在基础日粮中添加0.7、1.0、1.3 g/kg 中草药制剂。舍内笼养，自由采食、饮水，自然通风光照，防疫程序按常规进行，1 日龄马立克疫苗，7 日龄新城疫滴鼻，21 日龄肌肉注射新城疫油乳剂灭活苗。 基础日粮组成分0 ～ 21 d和22 ～ 42 d 两阶段，参照我国肉鸡标准（李连任，2013）配制，基础日粮组成见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.3 样品采集及指标测定

1.3.1 生长指标的测定 试验期间每天早上8:30对试验鸡进行空腹称重，记录增重情况。

1.3.2 血液生化指标的测定 三黄鸡42 日龄时，每个重复随机抽取3 只鸡，于翅静脉采血，离心后吸取上层血清于4 ℃保存， 通过全自动生化分析仪进行血液指标检测。

1.3.3 免疫器官指数的测定 三黄鸡42 日龄时，每个重复选取3 只接近该重复平均体重的三黄鸡屠宰，分离脾脏、胸腺、法氏囊，用滤纸吸干血水后称鲜重，计算其免疫器官指数：

免疫器官指数=免疫器官质量 （g）/活体质量（kg）。

1.3.4 血清中球蛋白的测定 三黄鸡42 日龄时，每重复组选取3 只接近该重复平均体重的三黄鸡鸡，通过翅静脉采血2 mL 于离心管中，并分离血清，置-20 ℃保存，采用酶联免疫吸附试验法测定血清中免疫球蛋白A （IgA） 、 免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM ） 含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.4 数据处理 本试验所有数据采用统计软件SPSS 22.0 进行单因素方差分析和Duncan’s 法进行多重比较，结果用“平均值±标准误“表示，以P < 0.05 为差异显著判断标准。

2 结果与分析

2.1 中草药饲料添加剂对三黄鸡体重的影响由表2 可知， 中草药Ⅳ组三黄鸡平均日增重较对照组比提高了11.94%，差异显著（P < 0.05），同时也明显优于抗生素处理（P < 0.05）；中草药处理Ⅳ组的三黄鸡成活率高于对照组， 但与抗生素组相比差异不明显（P > 0.05），由此可知，基础日粮中添加适当比例的复方中草药制剂在三黄鸡生长上可以达到和抗生素同样的促生长效果。

2.2 中草药饲料添加剂对三黄鸡血液生化指标的影响 由表3 可知， 中草药饲料添加剂可以有效增加三黄鸡血液中总蛋白和白蛋白的含量，其中试验Ⅳ组较对照组和抗生素组相比血清中总蛋白分别增加15.3%、13.5%，差异显著（P < 0.05）；试验Ⅳ组血清白蛋白含量与对照组比显著提高17.6%（P ＜0.05）； 在胆固醇和甘油三酯方面，试验Ⅳ组显著低于其他处理组（P < 0.05）；此外试验组与对照组相比，反映肝功能的谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量差异不明显（P ＞0.05）。

表2 中草药饲料添加剂对三黄鸡体重的影响

表3 中草药饲料添加剂对三黄鸡血液生化指标的影响

2.3 中草药饲料添加剂对三黄鸡免疫器官指数的影响 由表4 可知， 在三黄鸡的基础日粮中添加不同比例的复方中草药制剂可影响其免疫器官的发育， 其中复方中草药添加Ⅳ组的胸腺和法氏囊发育指数与对照组和抗生素相比显著提高（P <0.05）；试验Ⅳ组脾脏发育指数和法氏囊发育指数与对照组相比， 分别提高了11.31%、12.77%（P <0.05）；试验结果显示，抗生素对胸腺、脾脏、法氏囊的发育稍有抑制作用， 但与对照组相比差异不明显（P > 0.05）。

表4 中草药饲料添加剂对三黄鸡免疫器官指数的影响

2.4 中草药饲料添加剂对三黄鸡血液非特异性抗体水平的影响 由表5 可知， 复方中草药添加Ⅳ组血液中IgG 含量显著高于对照组和抗生素组，分别提高了11.03%、16.05%；复方中草药添加Ⅳ组血液中IgM 含量较对照组和抗生素组分别提高了17.39%、18.42%； 但血液中IgA 含量在试验期间各组含量变化无明显差异（P > 0.05）。 由此可见， 本试验的复方中草药制剂可以有效提高三黄鸡的非特异免疫能力。

表5 中草药饲料添加剂对三黄鸡血液中非特异性抗体水平的影响 g/L

3 讨论

3.1 复方中草药对三黄鸡生长性能的影响 中草药含有糖类、皂苷类、生物碱、挥发性物质和有机酸等多种生物活性成分， 在畜禽生产中应用不仅可以预防和治疗疾病、 增强机体免疫力和抗病力，还可以补充动物所需营养物质、提高食欲、促进畜禽生长。本试验中，复方中草制剂组方中的黄芪具有补气固表的功效，人参可以补脾益肺，土炒白术能健脾益气，陈皮可理气健脾，柴胡可解热抗炎；玄参能解毒散结，生地和甘草可清热解毒，山楂归脾、胃和肝经，具有消食散瘀、行气散结和补脾消积的功效， 上述的中草药配伍为“补中益气汤”，达到“与阴求阳”的功效。 李姣清等（2020）试验研究结果表明， 复方中草药添加到黄羽鸡基础日粮中与对照组相比可以显著增加黄羽肉鸡体重，降低料重比；锡建中等（2015）试验结果表明，复方中草药添加到肉雏鸡饲料中可以显著促进鸡的生长。本试验研究结果表明，在三黄鸡日粮中添加不同浓度的上述复方中草药制剂可显著提高鸡生长性能，降低死亡率。

3.2 复方中草药对三黄鸡血清生化指标和肝功能的影响 血液是动物机体内环境的重要组成部分，其各项指标与机体健康状况密切相关，血液各种化合物含量如果发生异常变化就会导致机体出现相应的病症。雷晓军等（2010）试验结果表明，添加了复方中草药制剂的日粮能提高肉仔鸡血清总蛋白和白蛋白的含量， 表明肉鸡对物质消化吸收的能力增强；于翠平等（2014）报道，添加中草药饲料添加剂的日粮可极显著降低肉鸡的胆固醇以及甘油三酯的含量， 从而有利于维持机体脂类的正常代谢。本试验结果显示，基础日粮中添加复方中草药制剂能不同程度地提高三黄鸡血清中总蛋白和白蛋白的含量，降低胆固醇和甘油三酯含量，从而说明该复方中草药制剂可有效促进三黄鸡的生长。 肝脏是动物的重要器官，不仅对动物的消化、代谢、排泄和血液循环有着密切的关系，而且是动物重要的解毒器官，谷草转氨酶、谷丙转氨酶通常是作为衡量肝功能的有效指标， 当毒物或药物性肝损害时， 转氨酶活力往往显著增高。 本试验显示， 鸡血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量与对照组相比均无明显差异（P ＞0.05） ，说明在日粮中添加本试验的复方中草药制剂对鸡肝功能无不良影响。

3.3 复方中草药制剂对三黄鸡免疫功能的影响胸腺、脾脏、法氏囊是鸡重要的免疫器官，其器官发育状态可在一定程度上反映机体免疫功能的强弱，免疫器官相对质量的增加，说明机体细胞的免疫功能增强。方磊涵等（2018）研究发现，中草药的复方多糖对肉仔鸡的免疫器官发育指数有明显的提高；石念进等（2013）研究发现，中草药复方（黄芪、党参、茯苓等组成）组鸡的胸腺指数、脾脏指数显著高于对照组， 较好地促进了雏鸡的免疫器官发育，有力地增强其免疫力。 本试验结果表明，日粮中添加不同浓度的复方中草药制剂能够提高三黄鸡各免疫器官的相对质量，以试验Ⅳ组（1.0 g/kg复方中草药制剂）的效果最好。

免疫球蛋白是机体所产生的具有抗体活性的一类蛋白， 能与抗原发生特异性结合。 贾玉刚等（2018）研究发现，中草药饲料添加剂可以显著提高藏鸡血液中IgG 和IgM 的含量， 起到较好的免疫增强作用；Cheng 等（2011）研究表明，饲喂黄芪麻杏石甘汤可以显著提高被支气管炎病毒感染的肉鸡血液中lgA 的水平，提高机体的抗病力。本试验结果也发现，与对照组相比，饲料中添加复方中草药制剂可以显著提高三黄鸡血液中IgG 和IgM含量， 这表明本试验中的中草药复方制剂具有增强机体免疫能力的功效。

4 小结

饲料中添加复方中草药添加剂可以促进三黄鸡增质量，降低集约化舍饲的死亡率，增强机体免疫功能，达到或接近抗生素的添加效果，具有良好的替抗前景。