黄芪多糖、泽泻提取物对非酒精性脂肪肝的作用机制

戴唯嘉，刘劲翀，王罗武，肖荐林，杜颖瑜，彭文佳

摘要：目的：探讨不同浓度梯度下黄芪多糖、泽泻提取物（以下简称黄泽汤） 对非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD） 的作用机制。方法：挑选雄性 SPF 级 SD 大鼠50只，体重 180～200 g，随机分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、600、 300、150 mg/kg 黄泽汤组。以灌胃方式给予药物治疗，对照组以等体积纯净水灌胃，模型组以 0.9 % NaCl 10 mg/kg 灌胃。每日 2 次，持续 4 周。检测大鼠血清生化指标检测。结果：与对照组比较，模型组大鼠血清 AST、ALT 水平和肝臟指数均显著性升高（P < 0.01） ，与模型组比较，中、高剂量组与模型组差异有统计学意义（P < 0.05） ;AST、ALT 水平均显著性降低（P < 0.05） ;与对照组比较，模型组大鼠 TG 和 LDL 水平均显著性升高（P < 0.05） ，HDL 水平则显著性降低（P < 0.05） 。与模型组比较，高剂量组对其改变特别显著（P < 0.05） ，TG 和 LDL 均显著性降低（P < 0.05） ，HDL 则显著性升高（P < 0.05） 。结论：不同浓度梯度下黄泽汤对NAFLD的血脂有一点作用，结果显示浓度越高疗效越佳。

关键词：黄泽汤;大鼠;非酒精性脂肪肝（NAFLD）

非酒精性脂肪性肝病是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的病理综合征，包括单纯性脂肪肝及由其演变的脂肪性肝炎和肝硬化。据报道， NAFLD全球发病率6～35 %， 其中20 %将发展成为肝硬化[1]。此外，NAFLD是隐源性肝硬化的主要原因， 也是肝移植的第二大原因，因此，本文就黄芪多糖、泽泻提取物（以下简称黄泽汤） 的不同浓度梯度对NAFLD的作用机制，为临床上NAFLD的治疗提供依据。现报道如下：

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性 SPF 级 SD 大鼠，体重 180～200 g， 由昭衍（苏州） 新药研究中心有限公司提供;饲养于湖南长沙医学院实验动物中心。动物饲养于动物房通风鼠笼中，环境温度控制在 20～22℃，湿度为50 %，12 h∶12 h光亮和光暗循环。 SD 大鼠共分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、600 mg/kg 黄泽汤组、 300 mg/kg 黄泽汤组、150 mg/kg 黄泽汤组。

1.2 药物及试剂

黄芪多糖、泽泻提取物由长沙医学院中医学院研究中心提供。黄泽汤的制备：将中药黄芪多糖、泽泻饮片成粗粉，分别用双蒸水、50 %甲醇和纯甲醇煎煮，提取液浓缩回收，制备为黄泽水浸膏、50 %甲醇浸膏和黄泽汤甲醇浸膏。 用含5 %乙醇和7 % 聚丙烯醋酸纤维素钠溶液作为黄泽汤增溶剂溶解浸膏，制得浓度均相当于每毫升1.0 g黄泽汤的3种提取物混悬液，备用。三酰甘油（TG） 检测试剂盒、高密度脂蛋白（HDL） 检测试剂盒、低密度脂蛋白（LDL） 检测试剂盒、丙氨酸转氨酶（ALT） 检测试剂盒、天冬氨酸转氨酶（AST） 检测试剂盒，BS-180型全自动生化分析。离心机，水浴加热池，AA63/UV1800型紫外可见分光光度。

1.3 实验方法

1.3.1 非酒精性脂肪肝动物模型建立

SD 大鼠喂以高脂饲料（10 %猪油+ 2 %胆固醇+88 %标准饲料） 及饮水，连续喂食8周。包括空白对照组及黄泽汤处理组（设置 600、300、150 mg/ kg 黄泽汤分别为高、中、低剂量给药组） 。 以灌胃方式给予药物治疗，每日 2 次，持续 4 周。对照组以等体积纯净水灌胃，模型组以 0.9 % NaCl 10 mg/kg 灌胃。每日 2 次，持续4周。

1.3.2 大鼠血清制备

实验给药最后一天，全体大鼠连续禁止饮食12 h。称量大鼠体重，以 1 %戊巴比妥钠（40 mg/kg） 腹腔注射麻醉大鼠，腹主动脉取新鲜血液 10 mL，4℃、3000 r/min 离心 1 min，取上清用于常规生化指标测定。

1.3.3 血清生化指标检测

采集血清按照试剂盒说明书进行含量测定。

1.4 统计学处理

运用 SPSS 23. 0 统计软件处理数据，数据用 x±s 表示，单因素方差分析和 LSD 检验进行组间比较， 以 P < 0. 05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同浓度下黄泽汤对非酒精性脂肪肝大鼠ALT、AST指标的影响

与对照组比较，模型组大鼠血清 AST、ALT 水平和肝脏指数均显著性升高（P < 0.01） ，与模型组比较，中、高剂量组与模型组差异有统计学意义（P < 0.05） ;AST、ALT 水平均显著性降低（P < 0.05） ，结果见表1。

2.2 不同浓度下黄泽汤对非酒精性脂肪肝大鼠TG、LDL、HDL指标的影响

与对照组比较，模型组大鼠 TG 和 LDL 水平均显著性升高（P < 0.05） ，HDL 水平则显著性降低（P < 0.05） 。与模型组比较，高剂量组对其改变特别显著（P < 0.05） ，TG 和 LDL 均显著性降低（P < 0.05） ，HDL 则显著性升高（P < 0.05） 。结果见表2。

3 讨论

黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖，淡黄色，粉末细腻，均匀无杂质，具引湿性。黄芪多糖可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用。泽泻为泽泻科植物泽泻的干燥块茎。泽泻性味甘淡寒，归肾、膀胱经，可利湿清热、化浊降脂[2]。泽泻主要化学成分有三萜类化合物、倍半萜类化合物、二萜类化合物及生物碱黄酮大黄素淀粉蛋白质氨基酸等。

NAFLD是指无过量酗酒史而出现以肝脏细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征，主要包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎和非酒精性脂肪性肝炎相关性肝硬化。随着社会生活水平的提高和饮食结构的改善，其发病率逐年升高且呈低龄化趋势。中医认为病位在肝，病机特点以脾胃虚弱、肝郁气滞、肝郁脾虚、肾精亏虚等为主，辨证以健脾化湿，疏肝健脾，化痰祛瘀等为治则[3]。

王斌[4]通过对应用异功泽泻汤治疗的52例非酒精性脂肪性肝炎患者及水飞蓟宾胶囊治疗的48例患者进行对照观察，发现异功泽泻汤在降低血脂、改善肝功能等方面均优于水飞蓟宾胶囊，泽泻可抑制外源性TG、TC的吸收，影响内源性TC代谢及抑制TG肝内合成，从而改善肝脏的脂肪代谢。孙晓红[5]通过对34例使用泽泻饮合京三棱丸治疗的非酒精性脂肪肝进行研究发现，泽泻饮合京三棱丸能有效改善TC、TG的水平，治療脂肪肝临床疗效显著。姜国贤等[6]报道了32例口服调肝降脂（青蒿、柴胡、山楂、茯苓、泽泻、法半夏、白芍、肉豆蔻、韭菜汁等） 中药治疗非酒精性脂肪肝的临床研究结果，发现泽泻通过抑制外源性三酰甘油在肝内的合成，影响与胆固醇代谢有关的酶及抑制肝内三酰甘油合成等药理数用而发挥抗脂肪肝效果。本文系统性地研究阐明了不同浓度梯度下黄泽汤对非酒精性脂肪肝的作用机制。但是本研究仍然存在不足，需要进一步实验来验证黄泽泻对肝细胞脂肪蓄积的缓解作用及其机制，因为脂肪蓄积是肝损伤的根本原因。

参考文献

[1]牙程玉，毛德文，王挺帅，等.非酒精性脂肪性肝病中西医研究进展[J].中西医结合肝病杂志，2021，31（2）：5.

[2]王建平，傅旭春.泽泻的化学成分和药理作用研究进展[J].浙江医学，2012，34（14）：3.

[3]刘冬.非酒精性脂肪性肝病相关代谢紊乱遗传易感性研究进展[J]. 中华实用诊断与治疗杂志，2016，30（11）：3.

[4]王斌，曹燕平，张红旭，等.水飞蓟宾治疗非酒精性脂肪性肝炎临床疗效观察[J].中国肝脏病杂志：电子版，2011，3（2）：4.

[5]孙晓红，张旖晴，刘涛，等.四合汤加减治疗非酒精性脂肪肝的疗效及机制研究[J].世界中医药，2019（3）：5.

[6]姜国贤，喻国华，余传友.调肝降脂法治疗非酒精性脂肪肝32例[J].陕西中医，2010（5）：3.