肿瘤病理诊断中冰冻切片技术的应用价值

赵振刚

（吉林省吉林市人民医院 病理科，吉林 吉林 132001）

0 引言

随着人们生活环境、饮食结构、生活压力等的不断变化，肿瘤的发病率在临床上不断的增加。肿瘤是指机体中正常细胞在不同的始动因素与促进因素长期作用下，所产生的增生与异常分化所形成的新生物[1]。肿瘤一般分为良性肿瘤和恶性肿瘤，良性肿瘤可以通过药物和手术进行有效的治疗；恶性肿瘤进入中晚期一般错过了最佳的治疗时期，预后差，患者一般只能够通过化疗等来延长生命[2]。冰冻切片技术是临床诊断肿瘤疾病常用的病理学诊断方法，其利用低温冰冻病灶组织，对病灶组织实施切片、固定、染色等处理，通过显微镜观察和判断肿瘤性质，为手术治疗提供依据[3]。鉴于此，本文将1900 例肿瘤病理标本为例进行分析，总结冷冻切片技术的方法，试探讨其对疾病病理诊断的影响，报告具体内容请看下文。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究例数有1900 例，研究时间在2019 年11月至2020 年11 月，观察对象是肿瘤病理标本，对比分为两组，各950 例。对照组中男性标本例数与女性标本例数各自为500 例、450 例；患者年龄为28～55 岁，平均（41.23±2.11）岁；标本类型：卵巢260 例、子宫240 例、淋巴结220 例、乳腺130例、甲状腺100 例。研究组中男性标本与女性标本的构成比为511:439；患者年龄为27～55 岁，平均（40.58±2.14）岁；标本类型：卵巢270 例、子宫250 例、淋巴结210 例、乳腺120 例、甲状腺100 例。对比分析两组的各项信息，具有可比性（P＞0.05）。

纳入标准：①1900 例标本主人同意实施手术治疗；②经告知后所有标本主人均自愿参与，并签署相关文件；③本次研究获取伦理委员会的审核通过。

排除标准：①标本主人的心、肝、肾等器官存在严重器质性病变；②标本主人近段时间接受过重大手术治疗，无法再次实施手术治疗；③标本主人的精神异常，听觉与语言存在障碍，不能配合完成标本采集。

1.2 方法

1900 例肿瘤病理标本收集完成后，放入恒温式冰冻切片机中，将提前准备好的浓度为95%的乙醇90 mL+浓度为10%的甲醛5mL 加入恒温式冰冻切片机中，随后开展相应的检测。

研究组开展冰冻切片技术处理，详细方法为：（1）标本的选择与保存。①在手术过程中，需要保证标本适中且新鲜，标本组织大小为15mm×15mm，厚度维持在0.2～0.5cm，在获取标本的时候，注意不要损伤周围组织，并且尽量避开坏死组织和出血部位。②标本收集好后，需要将标本放置在冷冻的环境，结合实际需求和标本的抗寒程度，合理调节冷冻环境的温度。通常情况下，乳腺的冷冻温度控制在-29～-21℃；卵巢的冷冻温度维持在-21～-19℃；淋巴结、肝脏以及肾脏的冷冻温度保持在-18～-17℃。冷冻时间≤3min，但是肝脏、淋巴结和甲状腺的冷冻时间控制在2～2.5min。（2）标本切片处理。①取出标本后进行切片处理，首先将标本放置在玻璃片上，加入固定液对标本进行固定处理，固定时间大约为1min；②随后采用清水冲洗标本，确保固定液冲洗干净后加入提前预温的苏木精，静置2min 后进行水洗，采用盐酸分化与水洗，放入温开水中呈现蓝色，随后加入水溶性伊红进行水洗；③加入梯度乙醇进行脱水处理，随后采用水风机将乙醇吹干，最后进行封片处理。

对照组展开常规石蜡切片技术处理，具体方法为：标本的选择与保存方法同冰冻切片技术相同，术后将标本放入浓度为10%的福尔马林溶液+二甲苯中，开火进行煮沸，煮沸后吸掉标本上的溶液，随后放入丙酮溶液中再次进行煮沸，煮沸后再次吸掉标本上的溶液，最后将标本放入温度为70℃的石蜡溶液中进行制片，大约30min 后完成制片。

1.3 观察指标

（1）将手术病理学检查作为参照标准，对比分析两组的检测结果，仔细记录恶性肿瘤、良性肿瘤以及交界性肿瘤的例数，计算总确诊率。

（2）观察两种切片技术的检测质量，邀请本院2 名资深病理学医师进行评估，主要评估清晰度、细胞形态以及细胞结构，并进行打分，每项为10 分，分数越高，评定为检测质量越良好。

1.4 统计学方法

研究所得数据均录入至Excel 2010 中予以校对，采用SPSS 23.0软件进行处理，（）表示计量资料，（%）表示计数资料，用t和χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 评价分析两种切片技术的检测结果

从表1 的结果可以发现，在准确率上，对比对照组（84.21%），研究组（96.84%）明显更高，差异较大（P＜0.05）。

表1 评价分析两种切片技术的检测结果[n(%)]

2.2 对比分析两种切片技术相关指标的差异

从表2 的结果能够看出，在清晰度评分、细胞结构评分以及细胞形态评分上，研究组高于对照组（P＜0.05）。

表2 对比分析两种切片技术相关指标的差异（,分）

表2 对比分析两种切片技术相关指标的差异（,分）

3 讨论

近年来，肿瘤的患病人数不断增加，死亡率也在不断提高，已成为人口死亡的重要疾病原因。据相关统计发现，肿瘤的患病率在全球范围内呈上升趋势，其中胃癌、肠道癌均位于我国发病率排行榜前几名，对患者家庭以及社会均造成了极大的困扰[4]。很多肿瘤疾病的早期症状不明显，等到引起患者的注意，确诊的时候已经处于晚期，降低了临床治疗效果，提高了患者的病死率，给患者的身体健康与生命安全构成极大的威胁[5]。故临床加强对肿瘤疾病的检查是非常重要的。

随着临床医学水平的发展与完善，病理学技术也发展迅速，在疾病诊断与鉴别中发挥着重要的作用，已成为肿瘤疾病的重要检查手段。常规石蜡切片是一种常规病理学检测技术，但是检测效果不理想。而冰冻切片技术是指取出标本后快速冷冻，冷冻到一定的硬度后进行切片，该技术可以保存标本的酶活性和结构，方便后期病理学检查[6]。根据操作方法的不同，冰冻切片技术分为：①低温恒冷箱冰冻切片；②甲醇循环制冷冻切片；③二氧化碳冰冻切片；其中低温恒冷箱冰冻切片的应用范围最广、效果最佳。冰冻切片技术的操作过程简单，不需要进行固定、脱水和包埋等，可有效缩短制片时间；该技术不会影响标本组织的结构、类脂以及脂肪等成分，可以准确判断肿瘤疾病的良性和恶性，方便后续方案的制定[7]。吕雪琼等[8]在研究中发现冰冻切片技术用于肿瘤疾病的诊断效果显著，能够准确诊断出肿瘤的良恶性，这与本次研究结果相似。本次研究发现，研究组经冰冻切片技术检查后，其准确率明显高于采用常规石蜡切片技术检测的对照组（P＜0.05），提示冰冻切片技术检测的诊断效果更佳。

王晓艳[9]在一项研究中将56 份病理组织样本作为研究对象，经快速冷冻切片技术与常规石蜡切片技术处理后，研究结果发现，在清晰度、细胞结构以及细胞形态评分上，快速冰冻（8.34±0.64）分、（8.11±1.02）分、（8.51±0.56）分明显高于常规石蜡（6.27±1.20）分、（7.02±0.85）分、（6.84±1.25）分，这与本次研究结果相似。本次研究发现，在清晰度评分、细胞结构评分以及细胞形态评分上，研究组高于对照组（P＜0.05），表明冰冻切片技术可以更加清晰地观察标本组织的细胞形态与细胞结构，提高切片质量，从而提升检出率。需要注意的是，虽然冰冻切片技术的病理诊断价值较高，但是在实际操作过程中制成连续切片和较薄的切片较为不易，若是操作人员在冷冻过程与切片过程中的操作不规范都会影响检测结果，比如：①切片获取标本组织的体积过大会影响切片和染色效果；②冷冻时间过长，会导致标本出现水结晶情况，从而影响组织细胞的形态、结构以及清晰度[10]。因此，需要严格要求病理科技术人员，定期组织技术人员进行学习和培训，确保可以熟练掌握冷冻切片技术，防止出现误差，影响检测结果的准确性与真实性。

综上所述，相较于常规石蜡切片技术，冰冻切片技术用于肿瘤病理的诊断效果理想，检出率更高，可以更加清晰地观察到组织细胞的形态和结构，准确判断出良恶性肿瘤，为后续治疗提供参考，具有较好的临床推广意义。