快速检测蔬菜水溶性农药残留的超高效液相串联质谱方法

张忠一 耿春辉 张嘉楠 段培姿 王爱卿

（1.沧州市农产品质量检验监测中心 河北沧州 061000；2.衡水市食品药品检验检测中心 河北衡水 053000；3.秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心 河北秦皇岛 066000；4.衡水市农业环境与农畜产品质量监督管理站 河北衡水 053000）

氧乐果、乙酰甲胺磷、甲胺磷、灭多威、久效磷属于高毒农药，禁止在蔬菜、瓜果、茶叶、菌类、中草药材上使用，而氧乐果、灭蝇胺等在实际检测过程中经常被检出，为保障人民健康，建立一种快速、简便、准确的检测方法意义重大。

各农药的溶解度分别为氧乐果5 g/100 g 水、灭蝇胺1.1 g/100 g 水、乙酰甲胺磷79 g/100 g 水、甲胺磷200 g/100 g 水、灭多威5.8 g/100 g 水、久效磷100 g/100 g 水。目前检测该类农药的主流方法为液相色谱串联质谱法[1]，本试验方法基于以上几种农药的化学性质，对前处理和仪器方法加以创新，采用甲醇提取，C18 色谱柱分离，达到快速准确、高效低耗的试验目的，可以作为有效的筛查手段。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：Waters UPLC Xevo TQ 超高效液相串联质谱仪（美国沃特世公司）、高速离心机、T18 均质机（德国IKA公司）、KS501 振荡混匀器（德国IKA 公司）、50 mL 离心管（康宁公司）。

试剂：甲醇（色谱纯）、甲酸（色谱纯）、乙酸铵（色谱纯）、水（应符合GB/T6682 一级水指标）。

标准品：氧乐果、灭蝇胺、霜霉威、乙酰甲胺磷、甲胺磷、灭多威、久效磷（农业农村部环境质量测试中心，1mg/mL）。

1.2 样品处理

称取已粉碎5.00 g 试样至50 mL 刻度离心管中。加入5 mL 甲醇，均质0.5 min，加水30 mL，剧烈振荡5 min，定容至50 mL，混匀，8 000 rpm 离心5 min。过0.22 μm 滤膜，上机。

1.3 仪器条件

液相部分设置如下。

色谱柱：BEHC18 （长50 mm，内径2.1 mm，粒径1.7 μm）。流动相：A相甲醇；B相5 mM 乙酸铵0.1%甲酸水；流速0.3 mL/min。进样量：2 μL，柱温40 ℃。

液相梯度设置如表1 所示。

表1 液相梯度设置表

1.4 质谱条件

电离模式：ESI+。扫描方式：MRM。离子源温度150 ℃。脱溶剂温度550 ℃。毛细管电压3 200 V。质谱方法设置如表2 所示。

表2 多反应监测参数设置表

2 结果与分析

2.1 色谱条件的优化

本方法色谱条件主要进行了两方面的优化，一方面选择了农药残留检测中常用的C18 反相色谱柱，对极性较强的目标物保留的时间较短，能有效缩短检测时间，配合合理的前处理方法完全可以取得较好的谱图效果；另一方面流动相采用的甲醇体系，与乙腈体系比较，甲醇体系洗脱能力弱一些，能够避免目标物保留时间过于集中，影响峰型（见图1）。

图1 目标化合物（0.02 mg/kg 添加量黄瓜基质）总离子流图

2.2 前处理方法的优化

简化前处理步骤，针对极性农药水溶性的特点，实现极性农药的快速液质筛查，采用甲醇溶液提取，与流动相体系适应，消除溶剂效应，通过提取过程和稀释过程，在保证定量限在最高限量值以下的前提下，有效降低基质效应。

2.3 线性范围和定量限

配制2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL浓度基质标准溶液，上机，保留时间、标准曲线线性方程、相关系数r、定量限如表3 所示。

表3 线性方程、定量限情况表

2.4 样品分析及加标回收率试验

按照前处理步骤和仪器设置条件进行标准添加检测，在0.04 mg/kg 添加量下，重复测定6 次得出相对标准偏差和平均回收率，从表4 可以看出，试验重复性和回收率取得较好效果。

表4 回收试验情况表

3 结论

该方法简便、快速、低成本，重复试验数据稳定，定量限能够满足GB 2763—2019 中对农药的最大残留限量要求，线性关系良好，适合大批量蔬菜的水溶性农药快速筛查。按照此方法，两天内完成筛查某地蔬菜风险监测任务157 批次，其中氧乐果不合格2 批次。