邓允,姜晶,张晓波,张东晴,李攀,吴思蒙,张雪燕,张继红
(北华大学附属医院 病理科,吉林 吉林)
酒精与二甲苯是病理科病理组织脱水机中最常用的脱水试剂。由于在脱水过程中存在液体携带与损耗,在废液处理过程中会对环境造成二次污染[1]。因此,为了保护环境,节约成本,本科室于2015年购置了赛尼科技公司的废液回收机以回收酒精与二甲苯。然而,经回收后重新利用的酒精与二甲苯其应用效果能否满足病理工作的需要仍需验证[2]。本科室从2019年1月到2019年5月对回收酒精和二甲苯在病理组织脱水机中的应用进行了大胆尝试,并取得了宝贵的实践经验。
2019年1月到2019年5月本科室接收的所有病理标本:其中1月份总例数为1872例,组织块数为4480块;2月份总例数为1288例,组织块数为3085块;3月份总例数为1868例,组织块数为4731块;4月份总例数为1852例,组织块数为4344块;5月份总例数为1831例,组织块数为4213块。
LeicaASP300S病理组织脱水机、SR20病理科废液回收机、SYD-B病理石蜡包埋机、LeicaRM2245轮转式切片机、LeicaST5020多功能染色机、LeicaCV5030自动盖片机、切片石蜡及脱水机石蜡为国产石蜡。
二甲苯废液来自于自动染片机和组织脱水机更换液体时换下来的二甲苯。回收二甲苯时,将再生的二甲苯桶放置在标有再生二甲苯连接管的下方,并连接管路。将石蜡污染物桶放置在排渣管下方,并连接管路。将乙醇污染物桶连接到标有再生的乙醇连接管处。将装有二甲苯废液的上料桶,置于机器进液口上方。在主菜单下按回收二甲苯程序,按启动键,此时废液进入废液桶内。
1.4.1 校准混合物标准样本
制作1%校准混合物标准样本:在495 mL的二甲苯中加入5 mL的99.9%纯乙醇来建立校准混合物。由于步骤中会有一定的变量,此校准混合物样本为用户进行测试时使用的准则[3]。测试员测试此校准混合物样本时可看出1%的污染程度读数,从而有信心判断出此方法去读数的准确性。
1.4.2 测试步骤
①用洁净的100 mL圆筒型量筒加入二甲苯,加入量85 mL(液体半月形底部与85 mL的刻度一致)。
②注入水于量筒内,直到体半月形底部与100 mL的刻度一致。此刻已经注入15 mL水。
③用塞子把含有混合物的量筒封口并转动,然后静止混合物,并确保所有水分会沉淀在量筒的底部,而量筒内二甲苯/水之间分离点之上没有任何水分黏在量筒内壁。这个分隔点会在量筒的15 mL刻度上出现。二甲苯浮于水的上面。
④以量筒内水及额前本分隔线液体半月型水平线底部作为分离点,仔细检查和记录在量筒内水和二甲苯之间的分隔点。
⑤接步骤4的方法减去15 mL水的分量,在加上0.1的修正系数就等于再生二甲苯的杂质的百分比。
酒精来自于组织脱水机更换液体时换下来的酒精[4]。回收酒精时,将再生的酒精桶放置在标有再生酒精连接管的下方,并连接管路。将酒精渣液桶放置在排渣管下方,并连接管路。将装有酒精废液的上料桶,置于机器进液口上方。在主菜单下按回收酒精程序,按启动键,此时废液进入废液桶内。
酒精计是液体比重计的一种,如果要检测再生前的乙醇浓度和再生后的乙醇浓度,可以使用酒精计检测。因为液体比重计检测时受环境温度影响,所以检测时要将乙醇完全冷却到室温。将冷却后乙醇倒入1000 mL量筒中,液面应高于液体比重计。将液体比重计放在溶液内,静止后读取刻度上的浓度。测时要将乙醇完全冷却到适温。将冷却后乙醇倒入1000 mL量筒中,液面应高于液体比重计。将液体比重计放在溶液内,静止后读取刻度上的浓度。
Leica ASP 300S病理组织脱水机中的酒精浓度梯度为70%→80%→85%→90%→95%→100%→100%,对于100%酒精之前的酒精,本科室全部使用回收酒精,并且本科室将LeicaASP300S病理组织脱水机中的2桶透明二甲苯全部使用回收二甲苯。
本科室于2019年1月进行了二甲笨浓度测定,发现二甲苯/水的分隔点是在15 mL。杂质含量:(15-15)+0.1=0.1%,故本科室再生的二甲苯的浓度99.9%。
本科室在每次回收完酒精之后,都要进行酒精浓度的测定,经测定本科室的再生酒精浓度在83%~95%。
经废液回收仪再生液体在Leica ASP300S病理组织脱水机中应用之后,所有组织的脱水、透明、浸蜡均正常,经回收液体脱水的组织肉眼观均无“发白”区[5],包埋时组织软硬度正常,切片时不感觉切片困难,所有组织均能够正常切片,所有切片均染色正常,镜下组织厚薄均匀,核浆分明,见图1~4。
图1 经回收液体脱水的脂肪组织
图2 经回收液体脱水的胃窦组织
图3 经回收液体脱水的子宫肌瘤组织
图4 经回收液体脱水的甲状腺组织
目前经废液回收仪再生液体(酒精和二甲苯)在本科室除了应用于LeicaASP300S病理组织脱水机的脱水工作之外,还用于LeicaASP300S病理组织脱水机的清洗工作,且清洗效果良好。
酒精和二甲苯作为病理科常用的染色与脱水试剂,在病理科的消耗量较大,并且在某些工作量较大的科室需要经常更换[6]。以往病理科在处理这些废弃的液体时,往往直接导入废液专道或者交于医疗垃圾处理中心处理,这样做往往会造成污染并且价格昂贵[7]。因此,废液回收机的出现实现了资源的循环利用,大大节省成本,降低了环境污染,具有经济效益和环保效益。
需要回收的二甲苯溶液一般都含有乙醇及其他成分,温度达到乙醇沸点(78 ℃)时,乙醇和水分等低沸点的成分回流到乙醇污染物桶内,该污染物含有乙醇等其他成分不能利用,需要弃掉这些废物。低沸点成分回流结束后,阀门切换到二甲苯侧,开始收集二甲苯[8]。完成回收二甲苯后,蒸馏器停止加热,进行延时排渣程序,排渣阀打开后,渣液将排放到石蜡污染物桶内。渣液中包含高沸点的物质及非挥发性物质(石蜡、细胞碎片等)。之后排渣阀门关闭,蜂鸣器提示声报警,程序结束。
废液回收仪对酒精的回收是根据酒精的沸点来设定加热文档,进行加热、蒸馏、冷却,回收到清洁酒精。
废液回收仪回收液体在本科室的LeicaASP300S病理组织脱水机中进行了广泛应用,取得了较好的脱水效果,节约了科室成本,但也有一些问题需要注意,即待回收酒精中是含有脂肪的,而废液回收仪在回收过程中是无法去除这些脂肪的,因此随着回收酒精的循环利用,酒精中的脂肪含量会蓄积很多,造成组织脱水不佳。因此,当回收酒精经历了反复脱水、反复回收几个循环之后,所得的回收酒精就应该作为染色酒精使用,使用一周之后弃去,以保证脱水机的脱水质量。