肝素结合蛋白在脑膜炎患者中的表达及其临床意义

刘美玲，李莹莹，郑铠军，冯淑芳，曹建伟 （广东中山市人民医院普通儿科，广东中山 528400）

脑膜炎是最为常见的感染性中枢神经系统综合症，儿童以急性细菌性脑膜炎和病毒性脑膜炎较为常见[1-2]。其中，急性细菌性脑膜炎是导致儿童感染相关性死亡的重要病因之一[3]，在抗生素和重症监护干预下，患儿的病死率仍可达10%，而幸存者出现永久性神经后遗症的概率高达30%[4]。病毒性脑膜炎和细菌性脑膜炎在急性期的临床症状具有相似性，给疾病的鉴别带来一定的困难[5]。肝素结合蛋白(HBP)又称氮唑蛋白或阳离子抗菌蛋白，是人类中性粒细胞先天防御的一部分[6-7]。我们观察了HBP 在细菌性和病毒性脑膜炎中的表达差异，以期为疾病的早期诊断和鉴别提供辅助依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择我院2018 年5 月至2019 年5 月收治的急性细菌性脑膜炎患儿27 例、毒性脑膜炎患儿22 病，以及20 例需取脑脊液检查的非脑膜炎疾病患儿作对照。细菌性脑膜炎患者中男16 例，女11 例，平均年龄(9.1±3.0)岁；病毒性脑膜炎患者男10 例，女12 例，平均年龄(8.2±2.8)岁；非脑膜炎疾病患者男10 例，女10 例，平均年龄(8.6±3.2)岁。3 组间性别、年龄差异无统计学意义(P＞0.05)。脑膜炎的诊断参照《诸福棠实用儿科学》第8 版脑膜炎诊断标准[8]。排除:(1)颅脑外伤、医源性等因素造成的中枢神经系统感染者；(2)合并中枢神经系统肿瘤性疾病者；(3)合并免疫系统缺陷型疾病者；(4)合并血液系统疾病者；(5)入院前已经接受抗生素治疗的患者；(6)随访期间自动要求退出的患者。本研究已通过医学伦理委员会审查。

1.2 方法

脑膜炎患儿在入院后第1 天(抗生素治疗前)收集脑脊液5 mL，外周血5 mL,常温静置30 min，12 000 r/min离心10 min，收集上清液，样本于-80 ℃冰箱中保存。采用酶联免疫吸附法对样本中的HBP 进行定量检测，人HBPELISA 试剂盒(#ZN2034，百奥莱博生物)检测范围为62.5～4 000.0 μg/L。测定步骤参照试剂盒说明书进行。

1.3 研究指标

1.3.1 HBP 的表达 比较血清和脑脊液中HBP 在各组研究对象间的水平差异，以及评估血清和脑脊液中HBP 的相关关系。

1.3.2 疾病诊断的效率评估 将血清和脑脊液中HBP 水平作为患者早期诊断的因素，绘制受试者工作特征曲线(ROC 曲线)，分析上述指标对疾病早期诊断的价值。诊断金标准为病理学诊断(脑脊液培养)。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 血清和脑脊液中HBP 表达水平的变化及相关性

细菌性脑膜炎患者血清、脑脊液的HBP 水平显著高于病毒性脑膜炎和非脑膜炎患者，差异有统计学意义(P＜0.01)，见表1。细菌性脑膜炎患者血清HBP的表达与脑脊液中HBP 的表达呈正相关(r=0.468，P＜0.05)，病毒性脑膜炎患者血清HBP 的表达与脑脊液中HBP 的表达无明显相关性(r=0.264，P＞0.05)。

表1 血清和脑脊液中HBP 的表达水平 (±s，μg/L)

表1 血清和脑脊液中HBP 的表达水平 (±s，μg/L)

与非脑膜炎疾病比较:aP＜0.01；与病毒性脑膜炎比较:bP＜0.01

2.2 HBP 对脑膜炎早期诊断和鉴别诊断的效果

血清、脑脊液HBP 用于细菌性脑膜炎早期诊断的ROC 曲线下面积分别为0.933 和0.884，切割值分别为118.13、99.89 μg/L，灵敏度分别为0.943 和0.875，特异度分别为0.797 和0.764；而用于病毒性脑膜炎早期诊断的ROC 曲线下面积分别为0.463 和0.461，诊断价值较差。见图1。

图1 血清、脑脊液HBP 用于脑膜炎早期诊断和鉴别的ROC 曲线

3 讨论

脑膜炎是儿童常见的重症感染性疾病，以病毒性和急性细菌性脑膜炎较为常见[9]。疾病早期临床症状的相似性导致鉴别诊断困难[5]。目前，对疾病早期诊断和鉴别的辅助生化指标较多，如脑脊液乳酸、脑脊液蛋白、脑脊液葡萄糖、脑脊液白细胞、外周血降钙素原、腺苷脱氨酶及C 反应蛋白等[10-14]，这为临床医师早期诊断和鉴别脑膜炎的病理类型提供了有力的帮助。

二代测序等检验技术的进步让我们发现了越来越多的生化指标可用于脑膜炎的早期诊断和鉴别，HBP 就是其中的一个敏感指标。Linder 等[15]的研究指出，与非感染性危重症患者的血HBP 水平及其他指标相比，严重脓毒症和脓毒症休克患者血HBP水平升高具有显著的预测价值，80%的患者HBP水平升高(30 mg/L)，59%的患者降钙素原水平升高(0.5 mg/L)，10.5 h 后发展为严重脓毒症。Bentzer等[16-18]亦发现，HBP 可作为急性细菌性脑膜炎的一个预测指标，其在急性化脓性脑膜炎患儿脑脊液中的表达水平急剧升高，且作为化脓性脑膜炎诊断指标的敏感度和特异度均接近100%。我们的研究发现，HBP在急性细菌性脑膜炎中的增高水平相对病毒性脑膜炎更为显著，与黄彩芝等[18]研究相似。Kandil 等[17]结果显示细菌性脑膜炎患儿中HBP 升高近200 倍，但黄彩芝等[18]研究指出，化脓性脑膜炎患者HBP 增高倍数仅约10 倍。目前对这一数据差异的原因我们尚不明确，分析可能与患儿采样时的病情程度有关。值得注意的是，虽然细菌性和病毒性脑膜炎患者的HBP水平同样增高，但仅细菌性脑膜炎患者血清HBP 的表达与脑脊液中HBP 的表达呈正相关，而病毒性脑膜炎患者血清HBP 的表达与脑脊液中HBP 的表达无明显相关性。因此我们认为脑脊液中HBP 的升高很可能是由炎症瀑布引发循环白细胞的迁移所造成。本研究还发现，血清、脑脊液HBP 用于急性细菌性脑膜炎早期诊断的ROC 曲线下面积高达0.933 和0.884，而用于病毒性脑膜炎早期诊断的ROC 曲线下面积分别为0.463 和0.461，提示HBP 是细菌性脑膜炎早期诊断的良好指标，而其对病毒性脑膜炎的早期诊断意义不大。