榆林地区女性人乳头瘤病毒感染现状和亚型分布情况调查研究

汪海英 孟丹

(神木市医院;1.科教科;2.妇科,陕西 榆林 719300)

人乳头状瘤病毒是一种双链嗜上皮无包膜的小DNA病毒，属乳多空病毒科，在人和动物中分布广泛[1]。然而地区不同，HPV的人群感染率不同，优势型别也不同。并且现有的疫苗对其它型别的交叉预防能力有限，因此特定地区的HPV流行病学资料的获得很有必要[2-6]。为研究榆林地区女性感染HPV情况，收集我科自2015年至2019年女性宫颈HPV检测病例，探讨本地区女性HPV感染率及感染亚型分布。报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2015.2至2019.2来我院就诊，有性生活史，自愿接受宫颈HPV检测的女性共30 000例，者均无其他宫颈疾病，其中年龄20～72岁，平均(49.23±4.14)岁。患者均未进行过宫颈手术及盆腔放疗，且非月经期。

1.2方法 (1)石蜡切片：将宫颈腺癌及正常宫颈石蜡组织标本切片3～5片，4 μm厚度，不同石蜡组织切片前对刀片进行消毒。(2)提取DNA，将各组织切片置入高速冷冻离心机(德国eppendorf5810R)离心，加入150μL裂解液，充分混匀，金属浴(100℃，10 min)，13 000 r/min，10 min后取中层溶液待用。(3)PCR扩增：使用基因扩增仪(新加坡Gene amp pcr system 2400)扩增，将PCR反应管，经4 s离心后，编号，加入不同物质和空白对照，离心，扩增。(4)杂交、孵育、染色：取离心管，贴上标签，加入膜条，置入A液及相关PCR产物，盖紧管盖，沸水浴10 min，置入分子杂交仪(江苏兴化分析仪器厂)1.5h，取50 ml离心管，置入B液，预热，将杂交箱中离心管液体置入B液离心管，洗涤5 min，移至孵育液孵育，室温，30 min，A液洗涤2次，共10 min，使用C液洗涤2 min；加入显色液显色30 min，移至去离子水浸泡，观察。使用人乳头状瘤病毒基因分型检测试剂盒(亚能生物技术有限公司)检测基因分型。观察指标：根据检查结果，对女性子宫颈感染HPV的分型特点及相关因素进行分析和总结。

2 结 果

2.1HPV感染年龄分布 HPV感染人群中，以21～30岁的检出率最高(19.30%)，31～40岁次之(11.58%)，41岁以上只有(5.25～3.42%)。见表1。

表1 不同年龄 HPV 阳性构成比

2.2HPV感染亚型分布表 所采集的30 000例标本中检出HPV阳性3 000例，阳性率10.00%，23种亚型被检出19种，MM4、73、83、44未检出。高危型检出率占68.43%，低危型检出率占31.57%。见表2。

表2 HPV感染亚型分布表

3 讨 论

人乳头瘤病毒的基因序列与生物学行为之间相关性很高，型别不同的人乳头瘤病毒在致病性上存在差异[7]。在自然人群中人乳头瘤病毒的感染率大约在1.4%～25.6%之间，近年来对宫颈癌的研究发现，宫颈癌发生的必要条件便是高危型人乳头瘤病毒感染，感染者发生癌前病变的风险比未感染者高出52倍[8-9]。据统计[10]，有50%的人在一生之中至少感染一次HPV。临床检测HPV的方法中，DNA原位杂交法一般用于回顾性研究，具有较高的敏感性和特异性，但价格较贵。血清检测HPV特异性IgG可以用来判断患者的感染情况，但是不能确定感染部位。

人乳头瘤病毒基因根据地域不同分布复杂，以深圳和西藏地区来说，其高危人乳头瘤病毒筛查结果显示，感染率分别为14.0%和9.19%，流行的人乳头瘤病毒亚型分别为16、58、52与16、33、58、52、31。本次研究结果表明，所采集的30 000例标本中检出HPV阳性3 000例，阳性率10.00%，23种亚型被检出19种，MM4、73、83、44未检出。高危型检出率占68.43%，低危型检出率占31.57%，相比我国其他地区水平处于中等，本次受检女性中以11、16、58、52 为常见感染亚型，从中也可以看出人乳头瘤病毒分布存在地域差异。人乳头瘤病毒的感染年龄多见于中年女性，且其感染密切影响着宫颈病变程度，细胞学分级与感染可能性呈1:2倍左右的正相关增加。本次研究结果发现，HPV感染人群中，以21～30岁的检出率最高(19.30%)，31～40岁次之(11.58%)，41岁以上只有(5.25%～3.42%)，表明随年龄的增加，感染的风险逐渐降低，其原因可能与年青妇女性生活频繁有关。

综上所述，榆林地区女性人乳头瘤病毒感染阳性率为10%，以11、16、58、52 为常见感染亚型，高危型检出率占68.43%，低危型检出率占31.57%。