2014-2018年江苏省禽类外环境禽流感病毒监测结果分析

余慧燕，许 可，黄昊頔，祁 贤，鲍倡俊

禽流感是由禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)在各种家禽及野生禽类中引起疫病的传染性疾病[1]。目前主要有H5、H7、H9三类亚型禽流感病毒可以感染人类。近年来，全球多个国家或地区发生各种不同亚型的禽流感疫情，波及范围很广，对养殖业造成重大损失。同时某些亚型禽流感病毒可以跨越宿主屏障对人类造成感染，这对人类健康及公共卫生安全构成了严重威胁。江苏省地处我国长三角区域，水网密布，湖泊众多，养殖业发达，是受禽流感病毒影响较大的省份之一。科学研究表明，禽类接触史是人感染禽流感病毒的重要因素[2]。通过对活禽市场、家禽养殖场等高危场所的监控，可以对禽流感的流行规律及防控措施提供重要的参考意义。因此，本文旨在分析2014-2018年江苏省禽类市场外环境禽流感病毒时空流行病学特征的研究，对于开展江苏省禽流感的防控工作具有重要的指导意义。

1 材料与方法

1.1标本采集 在全省13个市设立城乡活禽市场、家禽屠宰加工厂、家禽散养户集中地区、家禽规模养殖场(户)、野生候鸟栖息地5类监测场所；根据监测方案要求，随机选取笼具表面擦拭标本、粪便标本、宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本、禽类饮水、清晰禽类的污水、其他等6类不同类型外环境涂抹拭子标本，共采集禽流感外环境标本27 942份。按照《人感染H7N9禽流感疫情防控方案(第3版)》的要求，所有采集的标本在4 ℃环境下保存，并保证在24 h内送至实验室于-80 ℃环境下保存备用。

1.2标本检测 从外环境标本中提取病毒 RNA后(ABI 全自动核酸提取仪，磁珠法核酸提取试剂盒购自ABI公司，货号为AMB1836-5)，采用实时荧光定量 PCR 方法对所有标本进行流感病毒A通用(FluA) 的核酸检测，其中阳性标本再进行 H5、H7、H9 禽流感亚型的分型检测，甲型流感病毒及禽流感病毒 H5/H7/H9 亚型核酸检测试剂盒购自江苏硕世公司，货号分别是 JC10103 和 JC10301)。

1.3方法 利用描述性流行病学方法分析江苏省禽流感病毒的流行特征，利用Excel及ArcGIS软件对数据进行整理，利用Matlab软件对数据进行统计分析，率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义，地图绘制及结果可视化利用ArcGIS软件完成。

2 结 果

2.1基本情况 2014-2018年累计检测覆盖江苏省13个行政区域内禽流感外环境标本27 942份(图1)，检测出A型通用阳性标本3 867份，阳性率为13.84%。其中，H5亚型阳性标本330份，H9亚型阳性标本1 905份，H7亚型阳性标本986份， H5和H9混合亚型标本157份，H9和H7混合亚型阳性标本293份，H5和H7混合亚型阳性标本116份，H5、H9、H7混合亚型阳性标本61份。

图1 江苏省各大市样本采集情况Fig.1 Sample collection in each city of Jiangsu Province

不同检测场所的外环境检测标本阳性率(表1)表明：城乡活禽市场是A型禽流感病毒高发场所，禽流感病毒阳性率为19.18%。不同检测场所禽流感病毒检出率差异具有统计学意义(χ2=17.405 8，P<0.05)。

不同标本类型禽流感病毒检测结果(表2)表明：宰杀或摆放禽肉案板表面和清洗禽类的污水的禽流感病毒检出率较高，阳性率分别为23.30%和20.61%。不同检测标本类型的禽流感病毒检出率差异具有统计学意义(χ2=5.527 7，P<0.05)。

表1 不同检测场所禽流感病毒检测结果Tab.1 Positivity rate of the bird flu samples in the external environment in different areas in Jiangsu province from 2014 to 2018

表2 不同标本类型禽流感病毒检测结果Tab.2 Positivity rate of different types of bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province from 2014 to 2018

2.2时间分布情况 2014-2018年外环境禽流感A型通用检出率分别为12.46%、10.81%、20.41%、13.00%、12.55%，不同年份禽流感病毒检出率差异不具有统计学意义(χ2=3.18，P>0.05)。

不同月份外环境禽流感病毒检测情况见表3所示。各月份禽流感A型通用阳性率在0～26.68%之间，其中，2014年8月份阳性检出率最低(0.43%)，2016年3月份阳性检出率最高(26.68%)。

表3 2014-2018年不同月份外环境禽流感病毒阳性率检出情况(%)Tab.3 Positivity rate of the bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province in each month from 2014 to 2018 (%)

2014-2018年月平均外环境禽流感病毒阳性率检出情况及变化趋势如图2所示。1月份和12月份禽流感外环境样本A型禽流感病毒阳性检出率最高，6-8月份禽流感外环境样本A型禽流感病毒阳性检出率最最低，全年各月份平均禽流感外环境样本A型病毒检出率呈“U”型分布，不同月份外环境禽流感A通用型检出率差异具有统计学意义(χ2=24.39，P<0.05)。

图2 2014-2018年月平均外环境禽流感病毒阳性率检出情况及变化趋势Fig.2 Average positivity rate of the bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province in each month from 2014 to 2018

2.3地域分布情况 各行政区域外环境禽流感病毒标本检测情况如图3所示，江苏省13个地级市行政区划均有通用A型禽流感病毒核酸阳性检出，阳性率在3.58%～22.37%之间。其中，淮安市禽流感A通用型阳性检出率最低(3.58%)，镇江市禽流感A通用型阳性检出率最高(22.37%)其次是常州市(21.98%)和南京市(21.96%)，不同行政区域外环境禽流感A通用型检出率差异具有统计学意义(χ2=26.61，P<0.05)。

图3 各行政区域禽流感标本检测情况Fig.3 Cases with avian influenza virus infection in each region of Jiangsu Province

3 讨 论

自2013年中国发生人感染H7N9禽流感疫情以来，各地禽流感外环境监测工作被作为禽流感防控体系建设中的一项重要内容正逐渐得到重视[3]，相关研究证实禽流感病毒在外环境中大量存在，同时，人感染禽流感病毒与活禽市场和禽类暴露有关[4-5]。加强禽流感外环境病毒监测，对于动态跟踪外环境中禽流感病毒的污染情况及指导相关部门有针对性的采取防控措施具有重要的指导意义。

研究结果表明，2014-2018年全年均有阳性禽流感病毒检出，其中以12月(18.39%)和次年1月(20.58%)为较高，与季节性流感相似，呈现出明显的冬季和春季的外环境禽流感病毒高发模式，该研究结果与以往研究结果一致[5-7]。因此，我们应加大每年春季和冬季的禽流感病毒监测力度，做好高发季节人感染禽流感病毒的防控工作。

通过对禽流感亚型进行分型发现，H9亚型是江苏省禽流感外环境中主要存在的类型，与国内其他地区的相关研究报道一致[8-9]。

从地区分布上看，江苏省不同行政区禽流感外环境样本阳性检出率具有显著性差异，位居前3的分别为镇江市(22.37%)、常州市(21.98%)和南京市(21.96%)。究其原因，主要是这些地区人口密度较大，活禽市场及交易摊位多，人员复杂，市场存在着监管不到位现象[10-11]。因此，应加强对阳性高发区的活禽交易市场的监管和指导。

活禽市场是人感染禽流感病毒的主要来源地[12-13]。本文通过比较不同监测场所的禽流感外环境标本发现城乡活禽市场的禽流感病毒检出阳性率最高，同时，不同类型标本的比较表明宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本以及清洗禽类的污水的禽流感病毒阳性检出率最高。提示在禽类的宰杀和清洗环节中，暴露人员存在感染的风险，因此在禽流感防控工作中，要加强对城乡活禽市场的管控，对宰杀或摆放禽肉的案板及清洗禽类的污水要及时进行消毒。同时，要通过各种媒体宣传的形式，加强对大众的健康教育宣传，提醒禽流感病毒的传播方式，预防措施和治疗方法等，尽可能减少人感染禽流感病毒的风险。关闭活禽交易市场能有效降低人感染禽流感病毒的风险[14]，但是，单个城市的短期关闭活禽市场只能作为一种应急措施，短时期内降低市场环境对禽流感病毒传播的风险，想要最大程度降低人感染禽流感病毒的风险，应采取区域性多个城市同步关闭活禽交易市场的措施[15]。此外，采用集中交易和宰杀的禽类交易模式是对政府和相关部门的一个考验，政府应出台相应的政策，对市场进行全方位监管，建立高效的应急响应机制，提高资源调度和利用水平。

利益冲突：无