原子吸收法测定饲料中铜的不确定度评定

◆作者：熊玲芳

◆单位：广东粤海饲料集团

1 不确定度的评定依据

1.1 测量依据

根据 JJF1059.1-2012《测量确定度的评定与表示》和GB/T 13885-2017《动物饲料中钙、铜、铁、锰、钾、钠和锌含量的测定原子吸收光谱法》中的原子吸收光谱法测定饲料中铜的含量，找出了影响测量结果不确定度的各种因素，对测定结果的不确定度进行评定，可为实验室在该检测过程中进一步提高检测数据的准确性和可靠性做参考。

1.2 测量步骤

称取样品 1～5g（精确到0.0001g），坩埚中进行干灰化，加入盐酸进行消煮，将消解液定容至50.0mL，过滤，待上机检测。标准溶液配制：吸取1.000mL 铜标准溶液（1000μg/mL）于 100 mL容量瓶中，定容制备成10μg/mL的铜储备液，再分别吸取0mL、5.0 mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL 的铜储备液于50mL 容量瓶中定容配制成 0μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL、3.00μg/mL、4.0μg/mL的铜标准工作液。依次测定标准空白及标准曲线，然后测定样品溶液空白及样品溶液，通过标准曲线求得样品溶液中铜的含量（μg/mL），根据公式计算出饲料中铜的含量（mg/kg）。

1.3 数学模型

试样中铜含量以X 计，单位为毫克每千克（mg/kg），按（1）

C1：测试液中含铜量μg/ml；

C2：试剂空白液中含铜量μg/ml；

N：试液定容后稀释倍数；

m：试样质量，单位为克g。

2 不确定度评定和计算

2.1 不确定度的来源

饲料中铜含量的测量不确定度来源主要有4 个方面：（1）质量引入的不确定度；（2）体积引入的不确定度；（3）标准曲线引入的不确定度；（4）测量重复性引入的不确定度。

2.2 质量引入的不确定度urel（m）分析：

天平引入的不确定度：从校准证书中可以找到所用的电子天平在称量0≤m≤50g 时，不确定度为 0.17mg（k=2），则其标准不确定度为：

实验中称量样品质量的平均值为m=4.7714g，则相对标准不确定度为：

2.3 样品处理过程体积引入的不确定度urel（v）分析：

试液制定过程中引入的不确定度主要是由容量瓶的允差和温度引起的水体积变化两部分，则该过程引入的不确定度包括如下：

2.3.1 由50mL容量瓶产生的不确定度，50mL容量瓶的证书所标示的扩展不确定度为0.03 mL（k=2），则 50ml 容量瓶标准不确定度为：

2.3.2 由于实验在26.5℃的环境下进行，容量瓶校正温度为20℃，温度相差6.5℃，水的体积膨胀系数为 2.1×10－4mL/℃，假定为均匀分布（k=√3）（以下容器同此），温度引入标准不确定度为：

样品试液定容为50mL 时，其相对标准不确定度为：

2.4 标准曲线引入的不确定度urel（b）分析：

2.4.1 标准品纯度引入的不确定度urel（b1），标准品证书给出的扩展不确定度为：0.7μg/mL（k=2）， 标 准 品 浓 度 为 ：1000 μg/mL，则相对标准不确定度为：

2.4.2 标准溶液稀释引入的不确定度urel（b2）：

由1.2 可知，标准溶液稀释引入的不确定度主要由100～1000μL 移 液 枪 、100mL、50mL容量瓶、10mL 刻度移液管引入。

2.4.2.1 100～1000μl 移 液枪，从校准证书中找到其扩展不确定度为移取标准溶液1000μL，则其标准不确定度为：

校准移液器时室温为24℃，实验温度为26.5℃，则温度引入的标准不确定度为：

移取1.000mL 试液时，其相对标准不确定度为：

2.4.2.2 100mL 容量瓶，从校准证书中找到扩展不确定度为0.05mL（k=2），则标准不确定度为：

温度引入的标准不确定度为：

定容为100mL 时，其相对标准不确定度为：

2.4.2.3 50mL 容量瓶，从校准证书中找到扩展不确定度为0.03mL（k=2），则标准不确定度为：

温度引入的标准不确定度为：

定容为50mL 时，其相对标准不确定度为：

2.4.2.4 10mL 刻度移液管，从校准证书中找到其扩展不确定度为 0.005mL（k=2），则标准不确定度为：

温度引入的标准不确定度为：

吸取10mL 时，其相对标准不确定度为：

在执行会计集中核算机制过程中，最大的问题就是财务管制与会计核算没有关联性。[2]在单位中虽然设置了财务管制这一职位，但是通常是由会计核算中心来开展单位的会计核算作业。在核算中心没有安排专门的会计以及出纳，报账员自己完成了核算这一项工作，这就不利于单位经济的顺利发展。

2.4.2.5 标准溶液稀释、定容引入的相对标准不确定度合并为：

2.4.3 标准曲线最小二乘法拟合引入的不确定度urel（b3）：

标准曲线最小二乘法拟合引入的不确定度urel（b3），对Cu的标准溶液的每个浓度测量3次，共15 次，测得标准浓度的吸光值，其对应值如表一所示，以浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标拟合曲线方程y=ax+b，得到回归方程：A=0.0195C-0.0003，相关系数r2=0.9999

表1 标准工作液各浓度的吸光值

样品试液浓度为C0=1.78 μg/mL（表二），p=7，n=15，测该拟合曲线的标准不确定度为：

相对标准不确定度为：

式中：A:为标准曲线的斜率；

Aj: 为不同浓度黄曲霉毒素B1工作溶液对应的吸光值；

c0:为样品试液浓度的平均值；

c:为样品铜含量的平均值；

p:为测量样品次数；

n:为测量铜工作溶液的次数。

2.4.4 仪器本身带来的不确定度：从校准证书中可以找到所用的原子吸收光谱仪的扩展不确定度为 0.007μg/mL（K=2），标准溶液的平均浓度=2.00μg/mL，则相对标准不确定度为：

2.4.5 标准曲线引入的相对标准不确定度合成：

表2 样品7 次测定的结果

表3 测定饲料中铜的相对不确定度

2.5 测量重复性引入的不确定度urel（x）分析：

根据饲料中铜含量分别进行了7 次独立测定的结果（见表二）计算，铜含量的标准偏差为

平均值标准不确定度为：

平均值相对标准不确定度为：

2.6 合成相对标准不确定度

将上述不确定度各个分量列于表三：

计算合成相对标准不确定度采用各个相对标准不确定度平方后求和再开根，即合成相对标准不确定度：

2.7 扩展不确定度

U=0.285×2=0.570 ≈ 1mg/kg

所以，饲料中铜的测定结果为：

19±1mg/kg（K=2）。

3 结语

采用原子吸收光谱法测定饲料中铜的含量，重复性试验的标准偏差引入的不确定度最大，在试验过程中要注意这项不确定度的相关操作，以确保试验结果的准确性和可靠性。