血小板参数随增龄变化模式

王东侠，刘希赞，吕春颖，范 华，孙艳舫，杨淑莲

(1.廊坊市中医医院，河北 廊坊 065000；2.中国中医血液专病医疗中心，河北 廊坊 065000；3.杨淑莲名中医工作室，河北 廊坊 065000)

血小板虽没有细胞核，但其复杂程度丝毫不逊色于任何有核细胞，近些年，随着检测仪器的发展，科研工作者可以很方便地对血小板相关参数进行准确测定，且血小板及其相关参数在心脑血管病[1-3]、糖尿病[4]、感染[5]、肿瘤[6]等诸多领域得到广泛应用。但血小板本身多形、多变，又易受外界因素影响，诸如仪器[7]、缓冲液、海拔、人种[8]、地域[9]、遗传[10]等，需要深入研究血小板及其参数在参考人群中的分布情况，继续沿用传统的单一参考区间已不能满足临床实践和研究的需求。为研究廊坊市汉族参考群体血小板参数的分布情况，同时建立本实验室血小板相关参数的参考范围，我们采用多阶段分层抽样方法，随机抽样选取了289例参考个体的血常规数据，分析了血小板诸参数之间的关系以及随增龄的变化模式，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从2017-06—2018-08月间在廊坊市中医院体检的3 563例参考人群中随机抽取298例作为研究对象，其中男142例，女156例；年龄10～95岁，中位年龄46岁；均为河北省廊坊市常住居民，汉族；排除有吸烟习惯、重度饮酒、高血脂、出凝血疾病、糖尿病、冠心病、高血压、贫血、癌症、慢性阻塞性肺病及慢性应用药物(服用苯妥英钠，保泰松，磺胺类，扑尔敏，氨基水杨酸，氯喹，维生素K，阿司匹林等药物)、代谢综合征、肝肾功能异常个体。

该研究于2017年1月获得医院伦理学委员会批准，受试者或其亲属均签署知情同意书。

1.2 实验仪器

采用Sysmex K-800i全自动血液分析仪(西斯美康，日本)检测血常规数据，由2名固定检验技师操作，严格执行质控程序，保障实验批内和批间精密度，污染物携带及重复性均在允许范围内。

1.3 方法

采用多阶段分层方法抽取研究对象，每10岁为一层，10～90岁分8个层次，每层随机抽取男、女各20例作为研究对象。抽取受试者清晨空腹、坐姿静脉血1mL，EDTA-K2抗凝，18～20 ℃条件保存样本，1～2 h内完成检测，Sysmex K-800i全自动血液分析仪检测血常规数据。应用Epidata双录入建立数据库，从血常规检测结果中抽取白细胞、血红蛋白、血小板计数(platelet count，PLT)、血小板压积(plateletcrit，PCT)、血小板分布宽度(platelet distribution width，PDW)、平均血小板体积(mean platelet volume，MPV)、大血小板比例(large cell ratio，LCR)7项参数进行分析。

1.4 统计学方法

应用SPSS 20.0完成统计分析，数据均进行正态性检验，定量数据采用均值和标准差描述，定性数据采用中位数和极差描述，参考范围采用均值和95%CI表示，2组间定量数据比较采用独立样本t检验，相关分析采用Pearson检验，为排除性别和年龄影响，将性别和年龄纳入相关模型采用偏相关分析控制混杂，显著性水平选取α=0.05。

2 结 果

2.1 血常规一般情况

研究发现不同性别间白细胞[男：(6.50±1.51)×109/L & 女：(6.14±1.38)×109/L，P=0.036]和血红蛋白(男：141.45±17.29 g·L-1& 女：131.64±12.04 g·L-1，P<0.001)含量不同，但不同性别间血小板计数[男：(45.97±214.61)×109/L & 女：(48.44±215.39)×109/L)]及其相关参数差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 血小板参数间相关分析

血小板参数与年龄的单相关分析显示，只有PLT和PCT与年龄存在负相关(PLT，r=-0.195，P=0.001；PCT，r=-0.174，P=0.003)，即随着年龄增长，PLT和PCT呈下降趋势。

将年龄和性别作为控制因素，引入偏相关模型，进行多因素分析，试图剔除年龄和性别对分析结果的影响，进一步计算血小板参数偏相关系数，发现PLT和PCT存在较强正相关(图1A)，PDW、MPV和LCR存在较强正相关(图1B)。PLT与PDW、MPV、LCR存在较弱负相关(P<0.05)，而PCT与PDW、MPV、LCR无相关性(P>0.05)。

图1A PLT与PCT的相关性；图1B PDW、MPV与LCR的相关性。

2.3 血小板相关参数与年龄的关系

数据显示PLT和PCT随年龄增长逐渐降低，如图2A、2B所示。因此，我们把受试者根据年龄分成8组，每组以10岁为限度。PLT和PCT随增龄逐渐下降，基本趋势符合线性关系(图3A、3B)。PDW、MPV和LCR随年龄增长逐渐升高，但均在50～60年龄段达到峰值，随后快速下降，呈现单峰分布(图2C、2D、2E)，年龄和参数呈非线性关系。同期白细胞计数呈随机性变化(图2F)。

注：横坐标为年龄分组，纵坐标以均值和95%可信区间CI表示。

3 讨 论

血小板是骨髓内巨核细胞脱落的胞质片段，平均寿命约10 d，主要功能是参与血液凝固。近年来，血小板衍生参数的临床探索逐渐开展，越来越多的内科医生认识到衍生参数的重要意义，了解血小板参数在参考人群的分布特点，并逐步建立参数的参考范围以辅助临床进行诊疗决策。

我们首先研究了血小板各参数间的相关关系，发现在平衡了性别和年龄后，各参数间依旧存在较强的偏相关关系，其中PLT和PCT呈高度正相关，PDW、MPV和LCR呈较强的正相关。通常仪器计算的总血小板计数是指3～30 fL的血小板计数，而大血小板比例中的巨大血小板指24～26 fL的血小板[11]。当巨大血小板比例升高时，血小板平均体积就会增加，离散度也加大，从而导致PDW增加。

研究参考人群血小板计数的文献[8]提示，诸多因素会影响其数值，其中年龄和性别是广泛关注的2个因素。虽然近期研究[12]显示不同性别的血小板计数不同，但同时也有学者提出质疑[13]，认为关于性别的报告结果互相矛盾，较大宗的病例报告也显示儿童期不同性别的PLT没有区别[14]。我们的研究结果也未发现性别差异，但是否与每个年龄组样本含量不足有关，有待后续研究。

多数研究认为PLT随年龄增长而降低[14-16]，一项纳入4万多例健康者的大宗研究显示，75岁以上老年人的PLT相对于5岁以下的儿童，男性PLT降低35%，女性降低25%。甚至有学者[16]提出，高龄老年人轻度的PLT降低也许是生理性改变。血小板计数下降速度是不均匀的，大约半数的PLT下降发生在0～10岁，15～50岁PLT下降缓慢，超过50岁以后速度加快，但要慢于儿童期[14]。我们的研究显示，80岁以上的老年人较10～20岁的年轻人PLT平均降低15%，低于国外的报道[14]，可能是由于我们没有纳入血小板降低显著的10岁以下的儿童群体。国外研究数据显示[15-16]，每10年PLT平均下降9×109/L，我们的研究结果是每10年平均下降5×109/L。国外研究[14]显示整体PLT随年龄增长而下降，在50岁时出现微弱的逆向升高表现，虽然尚不清楚具体原因，但该现象与我们的研究一致。

PLT、PCT与年龄呈线性负相关，但MPV随年龄增长逐渐增大[17]，很容易使有些学者将MPV增大与增龄导致的动脉硬化关联起来[18-19]，但如果试图以此解释MPV随增龄而增加略显牵强，MPV与年龄并非简单的线性正相关关系。本研究显示MPV、LCR、PDW高度相关的3个参数随增龄呈现一种典型的非线性分布特征，即在廊坊汉族参考人群中，上述参数随受试者年龄增长而缓慢增大，50～60岁时达到峰值，随后迅速下降。国外研究[14]由于年龄覆盖面不足(研究组最大年龄65岁)，所以只能看到MPV等随年龄增加而增大的部分结果。本研究通过严格的对象筛选和科学抽样，以最低限度的样本量实现最大限度的年龄段覆盖，最终报告MPV、LCR、PDW高度相关的3个血小板参数随增龄呈现右侧偏锋分布，即MPV、LCR、PDW到60岁以后会下降，这种现象也是MPV与动脉硬化关联无法解释的。

虽然我们通过前瞻性设计严格控制了多种混杂因素(如吸烟)[20]，但MPV总体水平仍略高于国外。新近研究显示[21]肥胖会影响MPV，但研究中我们并未严格要求受试者的BMI，推测该原因可导致MPV数值略高。血小板参数表型分布特征是遗传和环境共同作用的结果，MPV等随年龄变化，具体原因尚待进一步研究。

早期对血小板的分类主要基于大小和密度，这种分类方法一度被认为与年龄相关。现代研究人员提出了血小板亚群的理念，新的分类理念不仅基于物理，更多基于化学、代谢功能层面的不同[22]。已有研究结果[23]表明，即使在最大限度激活的情况下，血小板依旧可以稳定分成3群，而每群血小板体积不同，推测具有不同的功能，质谱流式的加入使得分群工作更加顺利[24]。不同大小的血小板可能具有完全不同的功能，血小板的体积和功能相关的这种假说也为输血医学带来了新的希望，或许在不久的将来，我们可以根据需要选择体积大小适合的血小板亚群进行输注[25]。

通过对廊坊市汉族人群的血小板参数随增龄分布特征的研究，建立了血小板相关参数不同年龄组的参考范围，为血小板减少性疾病的临床诊断、治疗和病情监测奠定了基础，有助于提高临床诊治效率，对血小板参数的基础研究及临床实践都具有积极意义。