辽宁省抚顺市疾病预防控制中心 (辽宁 抚顺 113006)
内容提要: 目的:探究分析生物安全柜动态条件下空气细菌污染监测效果。方法:2019年8月~2019年11月,本中心通过平板自然沉降法获取生物安全柜外区域的消毒空气与柜内消毒净化空气,在工作状态下、静止状态下每隔10min采集相关样本,并统计细菌的数量,根据检测实际情况,比较不干预以及干预(限制环境内人员的活动)状态下的细菌浓度,并采用统计学方法对比分析细菌数量。结果:生物安全柜操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数量小于生物安全柜外区域的细菌数目(P<0.05)。干预状态下操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数目均小于不干预状态下的细菌数目(P<0.05)。结论:生物安全柜处于工作状态时,对空气中的细菌污染监测更为稳定,不容易被人员活动、工作状态影响,细菌数量、细菌种类的监测准确性比较高。
近年来,空气中的细菌污染现象越发严重,严重影响人类身体健康的同时,也给临床医疗工作造成了不小的影响。为提高临床诊断、检测技术,生物安全柜在各大医疗机构、各大检测中心的微生物实验室中广泛应用,而很多具有高度传染性特点的微生物操作均在生物安全柜中完成[1]。比如培养皿、标本接种、标本混匀等,这些可形成液体薄膜、可诱发明显压力差的相关操作均可演变为感染性气溶胶,并随着气溶胶在空气中的扩散导致实验室爆发感染[2]。而导致实验室爆发感染的主要原因与实验室操作人员的不当操作、错误操作密切相关,一旦爆发感染,很容易形成交叉感染,增加临床治疗难度。基于此,本研究探究分析生物安全柜动态条件下空气细菌污染监测效果,现研究报道如下。
2019年8月~2019年11月,本中心通过平板自然沉降法获取生物安全柜外区域的消毒空气与柜内消毒净化空气,空气中的细菌便是本次研究对象。本次研究纳入的生物安全柜属于Ⅱ级设备,研究前均对生物安全柜进行充分消毒,达到无菌标准后投入研究。根据本次研究的特点,比较生物安全柜柜中以及柜外区域空气中细菌的数量。
在生物安全柜柜中、柜外的中心点以及四个角落放置平板培养皿,不能存在过远偏离,应选择规格为90mm的平板培养皿,让空气中的菌落能够自然沉降,细菌的培养环境是36°C,细菌的培养时间是48h,分别在不同操作时间点记录相应的细菌数量。
(1)生物安全柜中、柜外区域操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数量;
(2)干预状态下与不干预状态下生物安全柜中、柜外区域操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数量。
采用SPSS 22.0统计学软件对数据进行分析。
进行操作后,生物安全柜中的细菌数目无明显变化,操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数量基本相当(P>0.05);进行操作后,生物安全柜外区域的细菌数目变化明显,操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数目均不同,有升有降,存在显著差异(P<0.05);生物安全柜中各个操作时间点的细菌数目均小于生物安全柜外区域(P<0.05),见表1。
表1. 生物安全柜中、柜外区域的细菌数目比较(CFU/m3)
干预状态下操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空气中的细菌数目均小于不干预状态下的细菌数目(P<0.05),见表2。
表2. 干预状态下与不干预状态下的细菌数目比较(CFU/m3)
在微生物实验室中同时进行多种类型的试验,会进一步增加试验操作的压力差,会导致气溶胶在实验室空气中进一步扩散,继而导致实验室中的菌落失衡,造成二次感染,尤其是本身感染性比较高的细菌,属于实验室一级危险生物。所以必须有更安全的地方存储这些危险生物[3]。
现今,各大检测中心、微生物实验室、医院检验科等机构均采用生物安全柜来乘装、储存高感染性细菌。临床有大部分研究文献[4]认为,生物安全柜本身具有强大的保护性,可妥善储存高感染性细菌,不会增加试验操作的压力差,可降低气溶胶扩散现象,可减少实验室感染现象。再者,生物安全柜本身的空气污染监测准确性比较高,即便是在生物安全柜工作状态下就是生物安全柜动态条件下,虽然柜中空气与柜外空气的质量存在明显差异,但是柜中空气中的细菌数量明显小于柜外空气中的细菌数量。
生物安全柜柜内本身是由特殊气流组织结构与高效空气过滤器组成的一种具有箱型属性特点的净化功能负压装置,本身具有强大的空气净化功能。而生物安全柜柜外则是实验室,本身是空气污染易感区域与高发区域,也是人流量大、人员流动频繁区域,难以维持洁净空气,只能通过消毒、杀菌等操作净化空气,减少空气中的细菌数量。而生物安全柜中可通过负压引流,让污染物跟随压力顺着通道在压力通风口环绕。而生物安全柜操作台中的气凝胶也可顺着气流与污染物一起进入后排网栅,其中70%可通过进风过滤器再次过滤后回到工作区,30%则会顺着过滤器进入房间内或是房间外,保护级别、保护功能比较强大。因此,生物安全柜中的细菌数量远远小于柜外。
由上可知,生物安全柜动态条件下空气细菌污染监测效果显著。