马超凡,常昭宇,吕香汝,罗灵焕,马飞越,王鑫雨,俞佳钰,孙梦鑫,李沐森
(吉林农业科技学院动物科技学院132109)
寄生虫病具有传播性并可导致多种继发性疾病,不仅危害观赏禽的健康,同时也对其观赏性造成了影响。 常见的观赏禽寄生虫包括线虫、吸虫、绦虫、组织滴虫以及球虫等。 但禽蠕虫病在临床症状上没有明显特异性,难以区分,而通过实验室检查就可做出有效地诊断[1]。 因此我们在2020 年8 月到11 月,通过实验室检查方法对吉林市江南公园所饲养的全部观赏禽类进行寄生虫感染情况调查, 为公园提供寄生虫病流行动态资料以及防治的科学依据。 针对观赏禽所感染寄生虫种类,向园方提供用药方案以及饲养管理等相关建议。 试验报告如下。
1.1.1 试验器械
玻璃烧杯(1000mL、500mL、250mL、100mL、50mL)、60 目金属粪筛、40 目金属粪筛、尼龙筛兜、离心机、玻璃试管、试管夹、玻璃棒、胶头滴管、载玻片、盖玻片(40mm×24mm)、金属镊子、光学显微镜,双目摄影显微镜,摄影倒置相差显微镜,移液器。
1.1.2 试验试剂
饱和氯化钠溶液(1000mL 水中加入380g 的NaCl)、50%甘油水溶液
1.1.3 试验动物
江南公园饲养的全部观赏禽类,其中包括丹顶鹤(8 只)、蓑羽鹤(4 只)、灰鹤(6 只)、白鹤(7 只)、灰冠鹤(6 只)、苍鹭(5 只)、鸸鹋(4 只)、秃鹫(4 只)、天鹅(4 只)、鸳鸯(6 只)、绿头野鸭(9只)、孔雀(13 只)、白鹇(4 只)和大雁(6 只)共14 种观赏珍禽。
1.2.1 样品采集与处理 通过园内工作人员的协助, 对每只观赏禽进行标号(标注观赏禽的品种以及序号数)并采集它们的新鲜粪样(每只观赏禽采集20g 粪样)逐一装进相应观赏禽的消毒自封袋中, 当日便带到实验室对样本进行检测。 于2020 年8月到11 月期间,每周采集一次粪便样本,共采集16 次。
1.2.2 检查方法
1.2.2.1 直接涂片检查法
在载玻片上将1 滴50%甘油水溶液与1g 被检粪样混合均匀,去除杂质后制成待查样片,放到显微镜下观察,发现可疑的虫卵图片拍照备查。
1.2.2.2 尼龙筛兜淘洗法
取5g 被检粪样置于烧杯中捣碎并加入自来水混匀,将混匀后粪液用60 目金属粪筛进行过滤2 次,再利用尼龙筛兜进行多次淘洗,直至淘洗液变清,然后用胶头吸管吸取尼龙筛兜底的粪渣混合液体,制成待查样片,放到显微镜下观察,发现可疑的虫卵图片拍照备查[2]。
1.2.2.3 饱和氯化钠溶液漂浮法
取5g 被检粪样放入烧杯中捣碎并加入饱和氯化钠溶液均匀搅拌。 将杯中液体通过40 目金属筛过滤2 次。 将滤液缓慢加入试管中至液面凸起,静置30min。用玻璃棒蘸取液面滤液,涂在载玻片上,加盖玻片,制成待查样片,放到显微镜下观察,发现可疑的虫卵图片拍照备查[2]。
1.2.2.4 离心沉淀法
将5g 被检粪样置于烧杯中捣碎并加入自来水充分搅拌,将搅拌后的粪液通过40 目金属筛进行2 次过滤后。 用胶头滴管向一对离心管内加入滤液到达离心管的1/2 高度处, 称量等质,再将离心管对称放置于离心机中进行5min 的离心, 转速为2000r/min。 取出离心管,用胶头滴管吸除离心管中4/5 的上清液,将保留的上清液和沉淀物吹吸均匀,吸取少许混合液,滴加到载玻片上,加盖玻片,制成待查样片,放到显微镜下观察,发现可疑的虫卵图片拍照备查[2]。
1.2.3 虫卵计数方法 通过斯陶尔氏法进行计数。将4g 观赏禽粪便加入装有56mL 饱和氢氧化钠(0.4%)的溶液的三角烧瓶内,加入一些玻璃珠,塞紧容器口,充分振荡,使粪样溶解,再用移液器吸取混合液0.15mL 粪液,滴加到3 张载玻片上,加盖片,在显微镜下查找虫卵, 将所见虫卵总数乘以100 即为每克粪便虫卵数[3]。
2.1 检出虫卵
图1 尼龙筛淘洗法检出10X40(倍)
图2 饱和氯化钠漂浮法检出10X40(倍)
图3 尼龙筛淘洗法检出10X40(倍)
图4 尼龙筛淘洗法检出10X10(倍)
通过试验调查, 我们初步了解掌握了吉林市江南公园所饲养的观赏禽寄生虫感染情况。 公园珍禽饲养管理科学,饲料和饮水清洁卫生,每年进行春秋两季驱虫,寄生虫防疫体系完善。
表1 吉林市江南公园观赏珍禽寄生虫感染情况
园中大部分观赏禽未感染寄生虫。 从感染观赏禽自身因素考虑:存在感染的丹顶鹤、孔雀均是春季孵化的幼龄禽,进入观赏区时间短,未适应观赏区环境,导致其免疫力下降;受到寄生虫感染。 从环境因素考虑:由于室内圈舍空间较小,空气流通不畅,禽类抱团取暖,容易造成互相感染,特别是2020 年9 月份多场强台风的袭扰,造成圈舍阴暗潮湿,孔雀异刺线虫的感染率突增,从其他因素考虑:夏季鼠妇、蚂蚁以及苍蝇等中间宿主滋生,为寄生虫传播提供有利环境[4]。 秃鹫为食肉禽,夏季常有虫蝇聚集在饲喂的鲜肉上,虫蝇可携带粪便中的蛔虫卵,这是造成秃鹫感染蛔虫的因素之一。
4.1.1 要做好每年驱虫工作,针对所检测出的寄生虫做集体性预防用药,并定期更换用药,防止寄生虫产生耐药性。
4.1.2 要做好饲料检验,防止被污染的饲料作为寄生虫病传播的载体进入观赏禽体内。
4.1.3 对刚入园的观赏禽先进行分笼隔离饲养并对其取样检测,看是否感染寄生虫以及其他传染病,确保健康方可与同种观赏禽同笼饲养。
4.1.4 对观赏禽类的饲养密度进行合理地安排,要保证足够的生活空间,并做好通风与清洁工作。
4.1.5 禁止游客随意投食或抛掷异物,减少观赏禽与外来病原的接触。
4.1.6 及时清除粪便并发酵处理以杀灭虫卵。消灭禽舍内的蚯蚓。
4.2.1 毛细线虫的治疗使用甲苯咪唑按50mg/kg 体重,一次内服。
4.2.2 球虫的治疗 使用氨丙啉, 按250mg/kg 体重混入饮水,连用1 周,然后减半,连用2~3 周。
4.2.3 蛔虫的治疗使用苯硫咪唑, 按25mg/kg 体重混饲或饮水。
4.2.4 异刺线虫的治疗 使用噻苯唑,按0.5g/kg 体重混入饲料一次内服。