HIE患儿的神经行为评分与外周血NPY、Cys C、TNF-α水平的相关性

朱萍，赵杰，程雪莲，李德亮，高航

（南阳市中心医院 新生儿重症监护室，河南 南阳 473000）

缺氧缺血性脑病 （Hypoxic Ischemic Encephalopathy，HIE）是新生儿期严重致残性疾病，发病率占活产新生儿2%，重度HIE致死率高达25%[1]，部分存活者可在生产发育后期出现运动发育障碍，引发智力低下、脑瘫、神经发育迟缓、视觉障碍等，不仅影响小儿生存质量，还给家庭、社会带来沉重负担，故需尽早诊断、发现、治疗[2-3]。目前临床认为，HIE发生与免疫炎症反应和脑部缺血缺氧有关，血清肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorα，TNF-α）、胱抑素C（Cystatin C，Cys C）能够客观反映炎症状态，在脑缺血发作、脑出血等疾病中，可显著增高，参与神经元修复和损伤过程[4-5]；神经肽Y(Neuropeptide Y，NPY)是一种重要神经递质，存在于中枢神经系统中，当交感神经受到刺激后，可升高NPY，但具体作用机制尚未阐述。而本文不仅分别阐述了NPY、Cys C、TNF-α在HIE患儿神经行为功能状态中作用机制以及相关性，还分析了NPY、Cys C、TNF-α是否可作为影响HIE患儿神经功能状态的独立影响因子以及疾病的预测价值，探讨范围较广。报告如下。

1 资料和方法

1.1 资料 回顾性分析380例HIE患儿。性别：男性193例，女性187例；分娩方式：顺产238例，剖宫产142例；胎龄：≤37周124例，＞37周256例；病情严重程度：轻度242例，中度81例，重度57例。此次试验在2019年3月至2020年3月期间开展。同时根据神经行为评分分为2组，即神经功能正常组（n=78；≥35分），神经功能异常组（n=45；＜35分）。

纳入标准：⑴符合HIE临床诊断标准[6]；⑵母孕期身体健康。排除标准：⑴存在肾脏病、心脏病、严重感染性疾病者；⑵因先天性疾病、遗传代谢病、感染病致脑损伤；⑶出现吸入性肺炎、颅内出血者。神经功能评分采用新生儿行为神经测定(neonatal behavioral neurological assessment；NBNA)评分[7]，评估一般估价、3项原始反射、4项被动肌张力、4项主张肌张力、6项行为能力，最高分40分，＜35分判定神经功能异常，≥35分神经功能正常（35～36分为可疑阶段；≥37分为神经功能正常）。

1.2 方法 检测方式：抽取受检者3 ml肘静脉血，采用高速离心机分离血清，3000 r/min，维持10 min，提取血清后，运用双抗体夹心ELISA检测法检测TNF-α、Cys C，放射免疫法测定NPY，γ放射免疫分析仪为HH6003型（由北京核海高技术有限公司提供），试剂盒购自上海强生试剂公司或解放军总医院科技中心提供。严格按照试剂盒说明书执行操作。

1.3 观察指标 ⑴经单因素分析两组各项基本资料（包括分娩方式、性别、胎龄、严重程度、Cys C、TNF-α、NPY），再对存在差异的指标进行二元Logistic回归分析；⑵经Pearsom法分别分析，神经行为功能状态与TNF-α、NPY、Cys C相关性；严重程度与TNF-α、NPY、Cys C相关性；⑶分析Cys C、TNF-α、NPY的预测价值以及特异性、敏感性。

1.4 统计学处理 采用统计软件SPSS22.0处理数据，相关性采用Pearsom法；计数资料用（n，%）表示，行χ2检验；计量资料用（±s）表示，行t检验；多因素采用二元Logistic回归分析；预测价值评估采用ROC曲线分析。P<0.05为差异有统计学意义。相关性散点图运用Graghpad Prism软件绘图分析。

2 结果

2.1 单因素分析 经单因素分析，两组对比性别、分娩方式、胎龄不存在统计差异性（P＞0.05），而对比严重程度、Cys C、TNF-α、NPY存在明显差异性（P＜0.05）。见表1。

表1 对比两组各项资料

2.2 多因素分析 以“神经行为功能状态”为因变量（赋值：0=是，1=否），以“严重程度、Cys C、TNFα、NPY”为自变量，纳入Logistic回归分析（赋值见表2）。多因素Logistic回归分析显示，严重程度、Cys C＞800μg/L、TNF-α水平＞100 ng/L、NPY≥33 ng/ml均为影响HIE患儿神经功能状态的独立影响因子（P<0.05），见表3。

表2 多因素Logistic回归赋值

表3 HIE患儿神经功能状态影响因素的多因素Logistic回归

2.3 分析各指标间相关性 神经行为功能状态与TNF-α、NPY、Cys C呈负相关性（P＜0.05）；病情严重程度与TNF-α、NPY、Cys C呈负相关性（P＜0.05）。如表4所示。同时HIE患儿中102例神经功能异常组，神经功能评分（32.58±3.86）分，TNF-α（156.86±12.35）ng/L、NPY（65.89±10.26）ng/ml、Cys C（3.16±0.43）mg/L。具体相关散点图见图1～3。

表4 分析神经功能状态、病情严重程度与TNF-α、NPY、Cys C相关性

图1 神经行为功能评分与TNF-α相关性

2.4 预测价值TNF-α的AUC预测值0.703，NPY的AUC预测值0.703，Cys C的AUC预测值0.628。如表5所示。依据AUC及标准误，采用Z检验AUC差异。TNF-α与Cys C的AUC比较：Z=（0.703-0.628）/（0.030*0.030+0.033*0.033）^（0.5）=1.682，P值=[1-NORMSDIST（1.682）]*2=0.072，NPY与 Cys C 的 AUC 比 较：Z=（0.703-0.628）/（0.030*0.030+0.033*0.033）^（0.5）=1.682，P值=[1-NORMSDIST（1.682）]*2=0.072。以ROC曲线靠左上方约登指数的最大切点作为最佳临界值，该点预测敏感度、特异度。ROC曲线见图4。

表5 分析各项指标预测价值

图4 TNF-α、NPY、Cys指标分别对神经功能状态的ROC预测曲线

图2 神经行为功能评分与NPY相关性

3 讨论

图3 神经行为功能评分与Cys C相关性

HIE是因脑组织缺血缺氧引起的神经行为功能障碍性病变，常发生在新生儿期，由于新生儿生理结构特殊，机体娇嫩，一旦发生脑组织缺血缺氧，可迅速导致脑动脉边缘损害，诱发血管源性脑水肿，同时还可随着血压波动，使得血管破裂、出血，损伤基底节区和神经元，故对于HIE患儿需选用准确、有效的特异性指标评估预后[8]。NBNA评分具有良好可信度，联合实验室指标，可更准确评估HIE神经功能状态。

本研究结果显示，经Pearsom法分析，神经行为功能状态与TNF-α、NPY、Cys C呈负相关性，说明血清指标能够在一定程度上评估HIE患儿神经行为功能状态。Cys C最早在六十年代发现，由122个小分子蛋白组成，常在术后、肿瘤患者中具有高表达性[9]。机体正常状态下，Cys C在体内细胞、组织内表达较小，当脑组织损伤时，损伤的脑血管皮质细胞和神经胶质细胞可产生大量保护性Cys C，通过血脑屏障进入血液循环，促使Cys C水平升高。本文结果显示，Cys C与HIE患儿神经功能异常评分的r=0.322,P＜0.001，说明血清Cys C可在一定程度上反映神经系统损伤程度，与受损程度呈正相关性。TNF-α是脑缺血、缺氧时产生的重要炎症介质[10]。适量TNF-α对机体可起到保护作用，但释放过度，可造成机体损伤。当脑组织损伤后，血管内皮细胞、星状胶质细胞神经元、小胶质细胞可分泌大量TNF-α，导致TNF-α水平明显升高。张蕾[11]学者在一文中虽与本次研究相同，证明了血清TNF-α可参与HIE患儿脑损伤过程，且与NBNA评分密切相关，但仅限于血清炎症因子探讨，而本文进行了多项指标研究。NPY属于神经递质，当机体交感神经受到外界刺激后，可协同去甲状腺素，作用局部微小血管，增强5-羟色胺缩血管效应，引发痉挛[12-13]。尤其当新生儿脑组织缺血缺氧状态越严重时，体内代谢可出现功能性紊乱，导致血小板聚集破坏，引发微循环障碍，促使NPY水平异常升高[14-15]。此外，本次通过二元Logistic回归分析显示，病情严重程度、Cys C、TNF-α、NPY均为影响HIE患儿神经功能状态的独立影响因子，能够在一定程度上反映HIE患儿真实神经功能状态。经ROC曲线分析，TNF-α的AUC预测值0.703，NPY的AUC预测值0.703，Cys C的AUC预测值0.628，说明Cys C、TNF-α、NPY三项指标在评估HIE患儿神经功能异常状态时，均具有一定预测价值。