全自动分析系统定量检测HlV-1病毒载量分析

孔玲 大石桥市卫生健康事务中心疾控所检验科 （辽宁 营口 115100）

内容提要： 目的：研究全自动分析系统定量在检测HIV-1病毒载量中的作用。方法：取笔者所在医院2017年4月～2018年4月收治的艾滋病患者68例为研究对象，随机均分成对照组和观察组各34例。对照组给予罗氏自动检测仪检查，观察组给予雅培m2000全自动分析仪进行检查，对比两组检查正确率和符合度。结果：两种方法检测后，观察组HIV病毒阳性率为100%（34/34），对照组检测出阳性30例，阳性率为88.24%（30/34），检测结果均值为（2.990±0.183），差异具有统计学意义（P＜0.05）。观察组平均CD4+T细胞数（567.5±20.6），CD4+/CD8+1.2，病毒载量结果2.98log copy/mL；对照组平均CD4+T细胞数（558.7±25.2），CD4+/CD8+1.0，病毒载量结果3.13log copy/mL。观察组优于对照组，数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：全自动分析系统定量在检测HIV-1病毒载量的应用，具有更高的检测准确率，是未来临床艾滋病病毒检查的重要依据。

HIV-1病毒载量是诊断艾滋病的重要指标[1]。随着生活节奏的改变，我国艾滋病的发病率明显提高，该病的潜伏期长，且很难治愈，因此给患者带来严重的影响[2]。临床检验艾滋病病毒主要采用现代仪器检查。全自动检查仪的效果更理想，本次就将雅培全自动分析仪的使用和检测效果进行分析，取若干患者，通过不同方式的效果比对，证明全自动分析系统量检测在艾滋病病毒载量分析中的作用，现将结果报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

取笔者所在医院2017年4月～2018年4月收治的艾滋病患者68例为研究对象，随机均分成对照组和观察组各34例。其中对照组男性共19例，女性患者15例，年龄29～52岁，观察组男性患者16例，女性患者18例，年龄28～51岁。所有患者均经过正规检查，确诊为艾滋病患者，并且病毒载量从0～10 copy/mL均有覆盖。患者基本资料上差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

对照组给予罗氏自动检测仪检查，观察组给予雅培m2000全自动分析仪进行检查，对比两组检查正确率和符合度。观察组具体方法，使用多种操作方法从血浆标本中纯化核酸，取雅培公司化学试剂和未包被的氧化铁磁珠作为捕获介质，提取样本病毒标本。将磁珠、细胞裂解缓冲液和患者标本混合，并置于50°C细胞裂解缓冲液中孵育25mim，本过程可释放出样本细胞RNA，RNA被吸附到磁珠上，通过优化磁铁吸附过程在单管中进行磁珠捕获，清洗磁珠以便除去未结合的血浆或血清标本组分，重复捕获和清洗过程，保证样本的纯净性。从磁珠上洗脱获得RNA，加水孵育，将缓冲液稀释至极低水平，磁珠被磁铁吸附，核酸被转移到96深孔板中，获得聚合酶链反应的反应板，罗氏自动检测仪的检验方法需要自动自制标本，总共取血浆标本850μL。在一定温度下，蛋白酶与裂解液/结合缓冲液与标本孵育，裂解出艾滋病病毒颗粒，释放出核酸，保护病毒RNA的完整性，蛋白酶和已知拷贝数的HIV-1定量标准物QS带盔甲RNA同裂解试剂和磁性玻璃珠一起加入到制作标本中。混合物经孵育后，HIV-1RNA与HIV-1QS结合于磁性玻璃珠表面。所有未结合的物质均经过洗涤后去除，经磁性玻璃珠分离和完全洗涤步骤，吸附的核酸在较高温度下洗脱下来。样品处理后释放出来的HIV1RNA与HIV-1QS被加入到扩增混合物中，记录所有过程的数据。两组均与ELTIA检验方相比对。对比记录在下文进行记录。

1.3 观察指标

观察两组HIV-1病毒载量和检测正确率，以病理检查结果进行比较，并记录两组的正确率吻合率。

1.4 统计学分析

以统计学软件SPSS19.0完成数据统计，给予计量资料检验，并以±s表示，计数资料以%表示，进行t检验，数据以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 两种方法检测结果比较

两种方法检测后，观察组HIV病毒阳性率为100%（34/34），对照组检测出阳性30例，阳性率为88.24%（30/34），检测结果均值为（2.990±0.183），差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 两种仪器检测HIV病毒载量比较

观察组平均CD4+T细胞数（567.5±20.6），CD4+/CD8+1.2，病毒载量结果2.98log copy/mL；对照组平均CD4+T细胞数（558.7±25.2），CD4+/CD8+1.0，病毒载量结果3.13log copy/mL。观察组优于对照组，数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3.讨论

艾滋病前期的明显症状为淋巴结肿大，一般持续时间为6～12个月，患者身体功能下降明显，口腔检查会发现白状毛斑，这可以作为艾滋病早期的主要依据，临床检查方法包括ELTIA和免荧光试验，两种检验方法均为快速检查，被作为是临床检验的金标准。检测指标为P24抗原，可在有效检验出艾滋病病毒的存在，但早期患者的P24含量较低，阳性检验率较低，可能存在漏诊。为了提高检测效率，临床开始采用全自动分析仪系统进行定量测量。目前，国内实验室免疫检测多采用罗氏、雅培等国外仪器，效果较好，但是成本也较高。因此，在临床中也使用国产发光仪器及试剂来进行检测。ELISA用血清来检测，需要经过30min的血液凝集，然后取血清样本稀释，进行阳性比对，经过60min的孵育后进行洗板和加底物，半个小时避光反应后加终止液，完成所有的反应部分，获得相关数据，根据数据判断其阳性与否。需要进行3次的检验，对比获得结论。为了提高效率，可以采用全自动分析系统进行样本的定量检查，设备上可以采用雅培m2000自动分析仪，本次就将其效果进行分析。研究还表明，雅培m2000与罗氏自动检测仪检查效果上还存在差异，主要表现在，前者无需对样本进行混合处理，交叉污染发生的概率更低，操作更加方便，从而减少检测误差。本次检测中，观察组HIV病毒阳性率为100%（34/34），对照组检测出阳性30例，阳性率为88.24%（30/34）。显示观察组的效果明显优于对照组，但也有研究表明，两种检测方法的效果基本相同，可能与本次样本数量较少有关，但是雅培m2000的操作方便性等优势是可以肯定的。

综上所述，艾滋病患者的早期检测是缓解病情，提高患者生活质量的重要方式。临床检查可以采用快速检验和全自动分析系统定量检测。其中，全自动分析系统定量在检测HIV-1病毒载量的应用，具有更高的检测准确率，是未来临床艾滋病病毒检查的重要依据。