血清IgG4与IgG比率在IgG4相关性疾病中的诊断价值

曹颖，王冰莹，杜鸿，曹伟，杨勇

(苏州大学附属第二医院检验科，江苏苏州215000)

IgG4相关性疾病(IgG4-related diseases, IgG4-RD)是一种慢性、进行性炎症伴纤维化的疾病，常累及淋巴结、胰腺、颌下腺、泪腺等多个脏器，并且有IgG4阳性的浆细胞浸润在累及的组织或者器官中[1]。此病多发生在中老年男性，早期临床表现缺乏一定的特异性，病变部位易形成肿块性病变，常被误诊为肿瘤，因此及时诊断IgG4-RD有一定的困难[2]。研究发现，大多数IgG4-RD患者的血清IgG4水平升高[3-4]，血清IgG4水平检测简便、快捷且敏感度较高，为IgG4-RD的诊治提供了较好的参考依据。2014年，IgG4-RD国际研讨会组织全球10个国家的专家提出《IgG4相关性疾病诊断和治疗的国际专家共识》，指出根据亚洲和美国Mayo医学中心提出的IgG4含量为1.35 g/L作为参考值上限的诊断标准，约有5%的健康人和过敏性疾病等患者也会检出血清IgG4水平升高，并且在一些自身免疫病患者中，血清IgG4也有较高的阳性率[5]。因此，血清IgG4含量不能作为确诊IgG4-RD的检查，IgG4绝对值在IgG4-RD中的诊断效能还需进一步验证[6-7]。

本研究将血清IgG4绝对值检测与IgG4/IgG比率2个指标联合应用于IgG4-RD诊断，分析其在IgG4-RD与其他自身免疫病的鉴别诊断中的意义，为IgG4-RD的实验室诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1标本采集 收集2019年5月至2020年8月苏州大学附属第二医院体检或就诊人群，共3组。健康人对照组：体检健康者80例，年龄(45±13)岁，其中，男性40例，女性40例，自身抗体及其他所有检查结果均无异常。IgG4-RD疾病组：IgG4-RD确诊患者33例，其中，男性18例，年龄(58±9)岁；女性15例，年龄(62±13)岁，所有患者均符合IgG4-RD亚洲和美国Mayo医学中心诊断标准[8-9]，均在用药治疗前静脉采血，且有实验室和影像学确诊的结果，组织活检显示IgG4阳性浆细胞/IgG阳性浆细胞>50%，伴有组织纤维化，同时除外其他免疫性疾病和恶性肿瘤。其他自身免疫病组：共150例，包括干燥综合征患者40例，符合美国风湿病协会与欧洲风湿病防治联合会2016年制定的干燥综合征诊断标准，年龄(59±9)岁；SLE患者40例，符合美国风湿病学会2012年制定的SLE诊断标准，年龄(50±12)岁；类风湿关节炎患者40例，符合美国风湿病学会2010年制定的类风湿关节炎诊断标准，年龄(60±11)岁；硬皮病患者30例，符合美国风湿病学会2012年制定的硬皮病诊断标准，年龄(56±11)岁，均采集诊断初期的第一次静脉采血标本。本研究获医院医学伦理委员会批准(文件编号JD-LK-2020-120-01)，利用以往临床诊疗中获得的医疗记录和生物标本，不会对受试者的权利和健康产生不利的影响，已申请免除知情同意，并得到批准。

1.2仪器与试剂 IMMAGE 800特定蛋白仪、IgG免疫比浊法测定试剂盒(BECKMAN COULTER公司)、IgG4免疫比浊法测定试剂盒(柏荣诊断公司)。

1.3方法 在高速低温离心机中以离心半径10 cm、4 000 r/min离心10 min分离血清，使用免疫比浊法在IMMAGE 800特定蛋白仪上进行血清IgG4、IgG检测，并计算其血清IgG4与IgG比率(IgG4/IgG)。仪器与试剂均在完成定标和质控品检测在控后使用。参考试剂说明书相关参数，IgG检测线性范围：0.33～60 g/L；精密度：重复性[以变异系数(CV)表示]：3.6%，中间精密度[以CV表示]：2.52%；参考区间：7.51～15.60 g/L。IgG4检测线性范围：0.400～4.200 g/L；精密度：批内CV≤10.0%，批间相对偏差(R)≤15.0%；参考区间：0～2.00 g/L。IgG和IgG4试剂在临床研究前均已进行性能验证，符合相关标准。

2 结果

2.1各组血清IgG4水平阳性率比较 以血清IgG4水平1.35 g/L作为参考值上限，健康人对照组、其他自身免疫病组、IgG4-RD组阳性率分别为1.25%(1/80)、16.67%(25/150)和100%(33/33)，IgG4-RD组与健康人对照组阳性率差异有统计学意义(χ2=108.306，P<0.05)，对照组与其他自身免疫病组阳性率差异有统计学意义(χ2=12.368,P<0.05)。

2.2各组血清IgG、IgG4、IgG4/IgG结果比较 与健康人对照组比较，IgG4-RD组患者血清IgG、IgG4和IgG4/IgG比率明显升高，差异有统计学意义(t=-19.011、-31.849、-22.643，P<0.05)，其他自身免疫病组患者血清IgG、IgG4也升高，差异有统计学意义(t=-8.787、-3.885，P<0.05)，但IgG4/IgG未见明显升高。见表1。

表1 各组血清IgG、IgG4、IgG4/IgG水平比较

2.3ROC曲线分析 以体检健康者和其他自身免疫病患者为对照组，IgG4-RD患者为实验组，血清IgG4为2.49 g/L时，敏感性为95.45%，特异性为93.04%，曲线下面积为0.988 4；血清IgG4/IgG为13.44%时，敏感性为95.45%，特异性为96.09%，曲线下面积为0.994 5。见图1。与IgG4≥1.35 g/L单独作为IgG4-RD诊断指标(敏感性100%，特异性88.7%)相比，将血清IgG4≥2.49 g/L与IgG4/IgG比率为13.44%联合应用作为IgG4-RD诊断指标(敏感性95.4%，特异性97.8%)时，其他自身免疫性疾病的IgG4阳性率由16.67%下降至3.33%。

图1 血清IgG4、IgG4/IgG诊断IgG4相关性疾病的ROC曲线

3 讨论

目前，IgG4-RD仍然没有国际上认定的诊断标准，血清IgG4含量检测作为一种非有创性检查方法，广泛应用于IgG4-RD的筛查和诊断。但应用以IgG4含量为1.35 g/L作为参考值上限的诊断标准时，其他多种疾病(尤其是自身免疫病)也可出现IgG4阳性，IgG4不能作为独立IgG4-RD的诊断标志物[10]。如何利用实验室已有的血清IgG和IgG4的检测结果，提高对IgG4-RD的诊断效能，对IgG4-RD的诊断与鉴别诊断均具有重要的临床应用价值。

本研究结果显示，与对照组相比，IgG4-RD组及自身免疫病组患者的血清总IgG均有显著升高，血清总IgG可以辅助IgG4-RD的诊断，但是特异性较差，仅为65%，不能作为IgG4-RD的独立诊断指标。以血清IgG4≥1.35 g/L作为参考值上限，收集的263例血清标本中，对照组有1例、自身性免疫病组有25例超过参考值上限，对照组和其他自身免疫病组IgG4阳性率分别为1.25%、16.67%，若以IgG4≥1.35 g/L作为独立诊断标准，会导致其他自身性免疫病出现较高假阳性。而IgG4/IgG只有在IgG4-RD组中显著升高，其他自身免疫组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)，说明IgG4/IgG可能成为IgG4-RD与其他自身免疫病鉴别诊断的依据。通过绘制血清IgG4、IgG4/IgG诊断IgG4-RD的ROC曲线，发现血清IgG4为2.49 g/L、血清IgG4/IgG比率为13.44%时，敏感性和特异性均较高，其他自身免疫病IgG4阳性率由16.67%下降至3.33%，假阳性率明显下降。因此，临床疑似IgG4-RD而血清IgG4升高不明显时，可与血清IgG4/IgG联合应用作为IgG4-RD诊断指标，解决临床诊断IgG4-RD将血清IgG4作为实验室诊断唯一指标特异性较差的问题，从而提高IgG4-RD的诊断效能。