白鹤藤化学成分的研究

李芷彤，梁惠娴，宋雪慧，尹永芹

(广东药科大学，广东 广州 510006)

白鹤藤ArgyreiaacutaLour.为旋花科银背藤属植物，在我国主要分布于广东、广西、海南、云南等地，是民间常用中草药，其全藤入药，具有祛风除湿、止咳化痰、止血生肌、舒筋活络、解毒消痈等作用[1]。民间主要用于内外伤出血、淤血肿痛、肾炎、祛腐升肌以及老年喘息型气管炎和褥疮的治疗[1]。现代药理研究表明，白鹤藤醇提物有显著的止血、抗炎抗氧化等药理作用[2]。目前，文献报道白鹤藤化学成分主要包括生物碱、色素、甾体、皂苷、黄酮、酚酸、树脂糖苷[1-5]。为了在临床上发挥白鹤藤最大的药效作用，需阐明该药物的药效物质基础，为其临床应用及质量控制提供科学依据，有必要对其化学成分进行研究。所以本课题组对白鹤藤的化学成分进行了进一步的研究，从白鹤藤乙醇提取物中分离得到12个化合物，其中化合物1～2、4,6～9、10、12均为首次从该植物中分离得到。

1 材料

高效液相色谱仪(日本岛津公司)；半制备液相(北京创新通恒科技有限公司)；Bruker AV Ⅲ 500 MHz核磁共振仪(德国Bruker公司)；硅胶柱色谱(200～300目；青岛裕民源硅胶试剂厂)；Sephadex LH-20 凝胶柱色谱(美国GE公司)；MCI GEL(75～150 μm；CHP 20P；日本三菱有限公司)；ODS(50～70 μm；天津键合相色谱有限公司)；GF254薄层层析硅胶(化学纯；青岛海洋化工有限公司)。甲醇(色谱纯，欧普森化工技术有限公司)；氘代吡啶(上海阿拉丁有限公司)；甲醇等有机溶剂(分析纯，天津致远化学试剂有限公司)。

白鹤藤药材于2017年12月从广东药科大学广州大学城校区的药圃里采摘，由广东药科大学马鸿雁副教授鉴定为旋花科银背藤属植物白鹤藤ArgyreiaacutaLour.。

2 提取与分离

将干燥的白鹤藤药材地上部分 35 kg，去杂剪碎，以 85%乙醇溶剂对药材进行加热回流提取，反复进行3次提取，每次需要2 h，减压回收有机溶剂，得总浸膏3.5 kg。其中2 kg浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，减压回收有机溶剂后，得到石油醚萃取部位150 g、氯仿萃取部位21 g、乙酸乙酯萃取部位97 g、正丁醇萃取部位 140 g。取乙酸乙酯部位浸膏97 g，进行硅胶柱层析分离，氯仿-甲醇(100∶1～0∶1)梯度洗脱，TLC检识，共9个流分(Fr.1～9)。Fr3经硅胶柱层析分离，氯仿-甲醇(30∶1～0∶1)梯度洗脱，得到3个亚馏分(Fr.3a～3c)，Fr.3b经Sephadex LH-20，纯甲醇洗脱，得化合物1(10 mg)。Fr.4经Sephadex LH-20纯甲醇洗脱，得到3个亚馏分(Fr.4a～4c)，Fr.4a经硅胶柱层析分离，氯仿-甲醇(6∶1)洗脱，得化合物2(18 mg)；Fr.4b经半制备HPLC(94%甲醇)得化合物3(11 mg)、4(20 mg)。Fr.5经ODS反相柱，依次用10%、30%、50%、70%、90%甲醇梯度洗脱，得到3个亚馏分(Fr.5a～5c)，Fr.5c经Sephadex LH-20纯甲醇洗脱，得化合物5(10 mg)。

另外1.5 kg浸膏用适量热水搅拌溶解，充分溶解后缓慢加入已活化好的 D101型大孔树脂柱中，使其分吸附5～6 h，依次用纯化水、30%乙醇、60%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度洗脱，各部位的样品洗脱液减压浓缩得各部位浸膏，取60%乙醇洗脱部位浸膏305 g，经硅胶柱层析分离，二氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脱，TLC 检识，共5个流分(Fr.1～5)。Fr.3经ODS柱，依次用10%、30%、50%、70%、90%甲醇梯度洗脱，得3个亚馏分(Fr.3a～3c)，Fr.3b经硅胶柱二氯甲烷-甲醇(50∶1～1∶1)梯度洗脱，一部分馏分经SephadexLH-20纯甲醇洗脱，合并有斑点部分，得化合物8(20 mg)、9(18 mg)，另一部分通过半制备HPLC(47%甲醇)得化合物6(16 mg)、7(15 mg)。Fr.4经硅胶柱层析分离，二氯甲烷-甲醇(50∶1～1∶1)梯度洗脱，得到3个亚馏分(Fr.4a～4c)。Fr.4c经硅胶柱层析分离，二氯甲烷-甲醇系统(30∶1～1∶1)梯度洗脱，合并相同馏分，SephadexLH-20纯甲醇洗脱，再经半制备HPLC(38%甲醇)得化合物10(15 mg)、11(12 mg)、12(16 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：白色针状晶体(甲醇)。在1H-NMR 谱中的质子信号呈现由于互相偶合高级裂分而造成的多重峰，故推测其化学结构为环状化合物，具备芳香环状的质子信号特征。δH9.02(1H，d，J=1.4 Hz)，8.69(1H，dd，J=4.4，0.8 Hz)，8.21(1H，m)，7.50(1H，dd，J=7.8，4.8 Hz)这些波谱数据为芳香区质子信号，其偶合常数小，且质子信号位于低场区，与吡啶类化合物的氢谱相似，故推测其母核为吡啶类化合物；在13C-NMR 谱中的δC168.5 为1个羰基碳信号，提示化合物中含有羰基。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：9.02(1H，d，J=1.4 Hz，H-2)，8.69(1H，dd，J=4.4，0.8 Hz，H-6)，8.21(1H，m，H-4)，7.50(1H，dd，J=7.8，4.8 Hz，H-5)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：168.5(-COOH)，153.9(C-6)，150.7(C-2)，137.2(C-4)，131.7(C-3)，125.4(C-5)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为烟酸。

化合物2：淡黄色油状物，溶于乙酸乙酯。经10%硫酸乙醇溶液显色剂显色后，斑点为紫红色。在1H-NMR 谱中，δH：7.74(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz)，7.55(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz)显示化合物含有2组对称的芳香区质子信号，提示此化合物为对称结构，与13C-NMR 谱中δC133.9、132.5、130.4 的苯环碳信号相对应。根据谱图可以判断该化合物为苯环邻位取代结构。在1H-NMR 谱中，δH4.10(4H，d，J=6.7 Hz)显示为2组连氧碳上的亚甲基质子信号；δH2.07(2H，m)显示为2组次甲基的质子信号，分别与 C-1′位和 C-1″位相连接；δH1.00(12H，d，J=6.7 Hz)显示为4组甲基质子信号，分别与 C-2′位和 C-2″位相连接；在13C-NMR 谱中，δC169.2为羰基碳信号；δC73.3为连氧碳信号；δC29.3为次甲基碳信号；δC20.7为甲基碳信号。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.74(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-2，5)，7.55(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-3，4)，4.10(4H，d，J=6.7 Hz，H-1′，1″)，2.07(2H，m，H-2′，2″)，1.00(12H，d，J=6.7 Hz，H-3′，3″，4′，4″)；13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ：169.2(C-7，7′)，133.9(C-1，6)，132.5(C-2，5)，130.4(C-3，4)，73.3(C-1′，1″)，29.3(C-2′，2″)，20.7(C-3′，3″，4′，4″)。以上数据与文献[7]基本一致，故鉴定为diisobutyl phthalate。

化合物3：无色油状物，溶于多种有机溶剂，与水不溶。在254 nm 波长下有紫外吸收，硫酸香草醛显紫红色，碘显色。在1H-NMR 谱中显示有2组对称的芳香区质子信号δH7.71(2H，m)和7.67(2H，m)，在13C-NMR 谱低场区中的δC133.7、133.6、130.7为苯环上的碳信号，且谱图提示该化合物结构为高度对称的邻位取代结构。δH4.13(4H，m)显示为 2组连氧碳上的亚甲基质子信号；δH1.64(2H，m)显示为 2组次甲基质子信号，与1个连氧的亚甲基相连接；δH1.27～1.37(16H，m)显示为一系列亚甲基质子信号；δH0.83～0.88(12H，m)提示此化合物含有4个-CH3。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.71(2H，m，H-12，12′)，7.67(2H，m，H-13，13′)，4.13(4H，m，H-3，3′)，1.64(2H，m，H-4，4′)，1.27～1.37(16H，m，H-5，6，7，9，5′，6′，7′，9′)，0.83～0.88(12H，m，H-8，10，8′，10′)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：169.0(C-1，1′)，133.7(C-11，11′)，133.6(C-12，12′)，130.7(C-13，13′)，69.4(C-3，3′)，40.1(C-4，4′)，31.8(C-5，5′)，30.4(C-6，6′)，25.3(C-7，7′)，24.4(C-9，9′)，15.9(C-8，8′)，12.8(C-10，10′)；以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为bis(2-ethylhexy1)phthalate。

化合物4：白色固定物。在1H-NMR 谱中，δH7.70(2H，d，J=3.0 Hz)和 7.66(2H，d，J=3.0 Hz)显示为2组对称的芳香区质子信号，由于化合物的对称性，以及苯环上仅存在两组相邻氢，因此裂分呈现为2组双峰，为苯环的对位取代结构。在13C-NMR谱中，δC133.7、133.5、130.7为苯环的碳信号。δH4.22(4H，t，J=6.6 Hz)显示为2组连氧碳上的亚甲基的质子信号；δH1.38～1.65(8H，m)显示为一系列亚甲基的质子信号；δH0.89(6H，t，J=7.4 Hz)显示为2组甲基的质子信号，分别与C-11位和 C-11′位相连接。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.70(2H，d，J=3.0 Hz，H-2，5)，7.66(2H，d，J=3.0 Hz，H-3，6)，4.22(4H，t，J=6.6 Hz，H-9，9′)，1.59～1.65(4H，m，H-10，10′)，1.33～1.38(4H，m，H-11，11′)，0.89(6H，t，J=7.4 Hz，H-12，12′)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：169.0(C-7，7′)，133.7(C-1，4)，133.5(C-3，6)，130.7(C-2，5)，67.0(C-9，9′)，32.0(C-10，10′)，20.7(C-11，11′)，15.6(C-12，12′)；以上数据与文献[9]基本一致，故鉴定为 dibutylterephthalat。

化合物5：黄色针晶，AlCl3反应阳性，Mg-HCl 反应阳性，推测该化合物可能是黄酮类化合物；Molish 反应阴性，推测该化合物可能是苷元类化合物。UVλmax=267、365 nm(CH3OH)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)谱显示δC176.4(C-4)，147.8(C-2)，129.9(C-3)说明该化合物为黄酮类，δC97.8(C-6)，92.3(C-8)可推测该化合物A 环为5，7位取代；δC56.3 为一个甲氧基的特征峰。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)谱中，δH12.5(1H，s，5-OH)，8.10(2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，可显示 B 环上特征的 A2B2耦合系统。6.67(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.31(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，3.85(3H，s，7-OCH3)。结合13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)谱提示该化合物有16个碳原子、9个季碳、6个次甲基、1个甲基，在中低场区集中，进一步说明了黄酮类化合物的特征信息。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.5(1H，s，5-OH)，8.10(2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，6.67(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.31(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，3.85(3H，s，7-OCH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：176.5(C-4)，165.2(C-7)，160.8(C-9)，159.7(C-5)，147.8(C-4′)，147.6(C-2)，146.6(C-3′)，129.9(C-3)，122.1(C-6′)，115.9(C-2′)，120.2(C-1′)，115.9(C-5′)，104.42(C-10)，97.8(C-6)，92.3(C-8)，56.3(-OCH3)。以上数据数据与文献[10]基本一致，故鉴定为鼠李柠檬素。

化合物6：微黄色粉末，易溶于甲醇，1H-NMR 显示该化合物含有2个咖啡酰基片段δH7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，7.01(1H，d，J=15.5 Hz，H-2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz,，H-5′)，6.73(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.25(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，一个奎宁酸的结构片段δH5.40(1H，m，H-5)，4.98(1H，m，H-4)，4.04(1H，m，H-3)，2.17(1H，m，H-6)，1.95(1H，m，H-2)，以及一个甲氧基氢信号δH3.63。13C-NMR谱显示该化合物有26个碳信号，其中有7个为奎宁酸片段，δC53.7(-OCH3)为一个甲氧基，其余18个在δC112～167之间，进一步说明化合物6中有2个咖啡酰基存在。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.45(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，7.01(1H，d，J=15.5 Hz，H-2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.73(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.25(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.40(1H，m，H-5)，4.98(1H，m，H-4)，4.04(1H，m，H-3)，3.63(3H，s，-OCH3)，2.17(2H，m，H-6)，1.95(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.6(C-1)，37.5(C-2)，66.6(C-3)，69.9(C-4)，69.9(C-5)，36.7(C-6)，53.7(-OCH3)，176.0(C-7)，127.4(C-1′)，127.4(C-1″)，115.8(C-2′)，116.1(C-2″)，147.6(C-3′，3″)，150.4(C-4′)，150.6(C-4″)，117.8(C-5′,5″)，123.5(C-6′)，123.4(C-6″)，147.2(C-7′)，115.8(C-8′)，116.1(C-8″)，167.9(C-9′)，167.7(C-9″)。以上数据与文献[11]基本一致，故鉴定为4,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯。

化合物7：淡黄色粉末，对比化合物6～7的1H-NMR 和13C-NMR 数据发现，化合物7比化合物6仅多1个碳信号。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.47(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.05(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.75(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.28(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.20(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.44(1H，m，H-5)，4.99(1H，m，H-4)，4.09(1H，m，H-3)，2.24(1H，m，H-6)，2.06(1H，m，H-2)，1.21(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.7(C-1)，37.5(C-2)，66.6(C-3)，70.0(C-4)，70.0(C-5)，36.7(C-6)，175.6(C-7)，127.5(C-1′)，127.4(C-1″)，115.9(C-2′)，116.1(C-2″)，147.6(C-3′，3″)，150.5(C-4′)，150.4(C-4″)，117.8(C-5′，5″)，123.5(C-6′)，123.6(C-6″)，147.2(C-7′)，147.4(C-7″)，116.5(C-8′)，116.7(C-8″)，168.0(C-9′)，167.8(C-9″)，62.4(-OCH2-)，15.9(-CH3)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为 4,5-O-二咖啡酰奎宁酸乙酯。

化合物8：微黄色粉末，易溶于甲醇，结合1H-NMR 和13C-NMR综合分析可推测该化合物分子式C26H26O12。1H-NMR显示该化合物含有2个咖啡酰基片段δH7.07(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.35(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.23(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，1个奎宁酸的结构片段δH5.43(1H，m，H-5)，5.33(1H，m，H-4)，4.01(1H，m，H-3)，2.33(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，以及1个甲氧基氢信号δH3.70。13C-NMR 谱显示该化合物有26个碳信号，其中有7个为奎宁酸片段，δC51.69(-OCH3)为1个甲氧基，其余18个在δC112～167之间，δC174.25、167.37、166.59，提示有3个羰基碳信号，根据δC148.34、145.7、126.21、115.19、115.12 及 114.05，提示有1个苯环。根据成对出现的碳信号，提示另有1个苯环。进一步说明化合物8中有2个咖啡酰基存在。将化合物的核磁数据与奎宁酸的相关文献来比对，发现谱图中2个质子信号分别向低场位移，也说明该化合物结构中有双酰基取代。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.60(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.07(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.35(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.23(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.43(1H，m，H-5)，5.33(1H，m，H-4)，4.01(1H，m，H-3)，2.33(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，3.7(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：73.3(C-1)，34.3(C-2)，73.3(C-3)，70.6(C-4)，70.8(C-5)，35.4(C-6)，174.3(C-7)，126.5(C-1′)，126.2(C-1″)，115.2(C-2′，2″)，148.3(C-3′，3″)，146.1(C-4′，4″)，114.1(C-5′，5″)，121.7(C-6′)，121.7(C-6″)，145.8(C-7′)，145.5(C-7″)，115.1(C-8′,8″)，166.6(C-9′)，167.4(C-9″)，51.7(-OCH2-)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为3,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯。

化合物9：淡黄色粉末，易溶于甲醇，结合1H-NMR 和13C-NMR 综合分析可推测该化合物分子式 C27H28O12。分析该化合物1H-NMR 和13C-NMR 数据发现，该化合物9与8比较仅多1个碳信号,即多出1个甲基碳信号δC12.9(-CH3)以及甲基质子信号δH1.24(3H，t，J=10 Hz，-CH3)。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.62(2H，d，J=16.0 Hz，H-7，H-7″)，7.08(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.34(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.22(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.43(1H，m，H-5)，5.15(1H，m，H-4)，4.15(1H，m，H-3)，2.34(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，1.24(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：73.2(C-1)，34.3(C-2)，70.9(C-3)，67.7(C-4)，68.6(C-5)，34.3(C-6)，173.8(C-7)，126.5(C-1′)，126.2(C-1″)，114.1(C-2′,2″)，146.1(C-3′)，145.8(C-3″)，148.3(C-4′)，145.4(C-4″)，113.8(C-5′,5″)，121.9(C-6′)，121.8(C-6″)，145.4(C-7′)，147.4(C-7″)，115.2(C-8′)，115.1(C-8″)，167.4(C-9′)，166.7(C-9″)，61.3(-OCH2-)，12.9(-CH3)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为 3,5-O-二咖啡酰奎宁酸乙酯。

化合物10：淡黄色粉末，易溶于甲醇，分子式 C17H20O9。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.52(1H，d，J=16.0 Hz，H-7′)，7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，6.95(1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.21(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，5.02(1H，m，H-3)，4.13(1H，m，H-5)，3.73(1H，m，H-4)，1.98～2.23(2H，m，H-6)，1.98～2.23(2H，m，H-2)，3.69(3H，s，-OCH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，36.4(C-2)，70.7(C-3)，71.1(C-4)，68.9(C-5)，36.6(C-6)，174.0(C-7)，51.6(C-8)，121.6(C-1′)，115.1(C-2′)，148.3(C-3′)，145.8(C-4′)，113.6(C-5′)，121.6(C-6′)，145.5(C-7′)，113.7(C-8′)，166.9(C-9)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯

化合物11：淡黄色粉末，易溶于甲醇。ESI-MSm/z：529.116 1[M-H]-，分子量 530，分子式 C26H26O12。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.62(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′,H-7″)，7.52(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，H-2″)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.92(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.76(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.3(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.55(1H，m，H-5)，5.12(1H，m，H-4)，4.35(1H，m，H-3)，3.72(3H，s，-OCH3)，2.3(2H，m，H-6)，2.15(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，34.3(C-2)，73.3(C-3)，70.6(C-4)，70.8(C-5)，37.0(C-6)，174.2(C-7)，126.5(C-1′)，126.3(C-1″)，115.2(C-2′，2″)，148.4(C-3′)，148.3(C-3″)，146.3(C-4′)，146.3(C-4″)，114.0(C-5′，5″)，121.7(C-6′)，121.7(C-6″)，145.8(C-7′)，145.5(C-7″)，115.1(C-8′)，115.1(C-8″)，166.5(C-9′)，167.1(C-9″)，51.8(-OCH2-)。以上数据与文献[11]基本一致，故鉴定为3,4-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯。

化合物12：淡黄色粉末，易溶于甲醇。ESI-MSm/z：515.1[M-H]-，分子量516，分子式C25H24O12。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.45(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′,7″)，7.03(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.76(2H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′，6″)，6.98(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.24(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.16(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.34(1H，m，H-3)，5.11(1H，m，H-4)，3.84(1H，m，H-5)，2.15(1H，m，H-6)，1.96(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，36.6(C-2)，72.9(C-3)，65.1(C-4)，72.5(C-5)，177.7(C-7)，127.6(C-1′)，127.6(C-1″)，116.1(C-2′，2″)，147.2(C-3′)，146.8(C-3″)，150.3(C-4′，4″)，116.7(C-5′，5″)，123.2(C-6′)，123.4(C-6″)，147.6(C-7′，7″)，116.8(C-8′)，117.9(C-8″)，168.1(C-9′)，167.5(C-9″)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为 3,5-O-二咖啡酰奎宁酸。

3 结论

咖啡酰奎宁酸类化合物，是一类由奎宁酸与数目不等的咖啡酸通过酯键连接而成的酚酸类天然成分，广泛存在于植物界，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等药理活性[15-17]。本研究从白鹤藤乙醇提取物中共分离出12个化合物，以期进一步丰富白鹤藤中的成分，为后序的化学成分解析及药理活性研究奠定基础。