钩毛茜草正丁醇部位化学成分的研究

朱敏汇，杨贵香，郑 林，汪 洋，马 雪，林昌虎*，李勇军*

[1.贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室，贵州 贵阳 550004；2.贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室，贵州 贵阳 550004；3.贵州医科大学药学院，贵州 贵阳 550004]

钩毛茜草RubiaoncotrichaHand.-Mazz.为茜草科茜草属植物，其以干燥根及根茎入药，具有凉血止血、止咳祛痰、通经之功效，用于治疗经闭、黄疸、跌扑损伤等症[1]。现代化学成分和药理学研究表明，茜草属植物中含有蒽醌类、萘醌类、环肽类、萜类等成分，具有抗菌、抗肿瘤、升高白细胞、抗心肌缺血等生物活性[2]。我国茜草属植物资源十分丰富，应充分开发利用茜草属植物的资源，挖掘其潜在的医药价值。钩毛茜草为我国特有植物，产于贵州、云南、四川等地，是贵州省少数民族用药。

经文献调研发现，钩毛茜草化学成分研究集中在较小极性部位[3-4]，大极性部位的研究鲜有报道，钩毛茜草在民间通过水煎煮或酒泡等方式用药，水煎液及酒中可能含有大量有效成分；其次，同属植物茜草RubiacordifoliaL.的正丁醇部位化合物种类较多且具有较好的药理活性[5]，根据亲缘关系相近，化学成分及药理作用相似的规律，提示钩毛茜草正丁醇部位的化学成分种类可能也较丰富且具有较好的药理活性。因此，为了深入研究钩毛茜草的物质基础，本研究对正丁醇部位的较大极性成分进行研究，结果从中分离得到15个化合物，其中1～14为首次从该种植物中分离得到，化合物1～9为首次从茜草属植物中分离得到。

1 材料

JNM-ECS-400 MHz核磁共振波谱仪 (日本JEOL公司)；超高液相色谱-三重四级杆串联质谱仪(ACQUITY-UPLC-TQD,美国Waters公司)；LC-20AP 制备型高效液相色谱 (日本Shimadzu公司)；Waters BEH-C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm，美国Waters 公司)；ACE-C18-PFP半制备色谱柱(250 mm×10 mm,5 μm)；BUCHI R-200旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)；KQ5200B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；柱色谱硅胶(100～200目、200～300目、300～400目，青岛海洋化工有限公司)。

钩毛茜草药材于2018年7月购于贵州贵阳万东桥中药材市场，经贵州医科大学龙庆德副教授鉴定为钩毛茜草RubiaoncotrichaHand.-Mazz.的干燥根及根茎，保存于贵州医科大学药物制剂重点实验室。

2 提取与分离

取干燥的钩毛茜草根及根茎5 kg，切成1～2 cm小段，用70%乙醇回流提取3次，合并滤液，减压浓缩，得总浸膏592 g。将浸膏与水混悬，经萃取得到石油醚部位55 g、乙酸乙酯部位65 g、正丁醇部位215 g。

取正丁醇部位(215 g)经正相硅胶柱，以二氯甲烷-甲醇(50∶1～1∶1)梯度洗脱，得Fr.1～Fr.7。将Fr.2过正相硅胶柱，用乙酸乙酯-甲醇(15∶1～1∶1)梯度洗脱，得Fr.2.1～ Fr.2.9。Fr.2.4反复经正相硅胶柱色谱纯化、Toyopearl HW-40F柱色谱分离，最后通过制备HPLC 甲醇-水(60∶40)分离得化合物1(4.5 mg)、8(5.3 mg)。Fr.2.5经正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(5∶1)、Sephadex LH-20、MCI柱甲醇-水(1∶1)得Fr.2.5.1～Fr.2.5.5。Fr.2.5.1先经Toyopearl HW-40F柱色谱分离(甲醇)，再经正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(6∶1～4∶1)得化合物10(4.6 mg)。Fr.2.5.2经Toyopearl HW-40F柱、正相硅胶柱二氯甲烷-甲醇(8∶1～5∶1)得化合物5(4.3 mg)。Fr.2.5.3分别经Sephadex LH-20、Toyopearl HW-40F柱、正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(7∶1～1∶1)得化合物6(7.7 mg)；Fr.3经正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(8∶1～1∶1)，得Fr.3.1～ Fr.3.7。其中Fr.3.3经Sephadex LH-20柱 三氯甲烷-甲醇(1∶1)、Toyopearl HW-40F柱得化合物9(4.7 mg)。Fr.3.4分别经Sephadex LH-20三氯甲烷-甲醇(1∶1)、正相硅胶柱二氯甲烷-甲醇(10∶1～1∶1)得化合物7(6.0 mg)。Fr.3.5经Sephadex LH-20、正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(15∶1～1∶1)、Toyopearl HW-40F柱得化合物12(11.8 mg)。Fr.4经Sephadex LH-20分离得Fr.4.1～ Fr.4.6。其中Fr.4.2经MCI柱(甲醇-水)、正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(20∶1～1∶1)及Toyopearl HW-40F柱得化合物2(3.5 mg)、3(2.8 mg)、4(7.0 mg)、11(4.0 mg)。Fr.6经正相硅胶柱乙酸乙酯-甲醇(15∶1～1∶1)、Sephadex LH-20柱，再放置，过滤得化合物13(370.0 mg)。Fr.7经Sephadex LH-20柱分离，得Fr.7.1～ Fr.7.5。其中Fr.7.2经Sephadex LH-20柱三氯甲烷-甲醇(1∶1)得化合物14(7.0 mg)。Fr.7.4反复经正相硅胶柱纯化得化合物15(2.0 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：无色晶体,分子式C26H34O11。ESI-MSm/z:521.2[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.08 (1H,d,J=8 Hz,H-5′),6.94 (2H,s,H-6,6′),6.83 (1H,d,J=8 Hz,H-5),6.65 (1H,d,J=7.6 Hz,H-2),6.58(1H,d,J=7.6 Hz,H-2′),4.78 (1H,d,J=5.6 Hz,Glc-1),4.77 (1H,d,J=5.6 Hz,H-7′),3.96～4.00 (1H,m,H-9′a),3.85～3.88 (1H,m,H-9a),3.84 (6H,s,3,3′-OCH3),3.71～3.73 (1H,m,H-9′b),3.65～3.70 (1H,m,H-9b),2.85 (1H,d,J=13.6 Hz,H-7b),2.66～2.70 (1H,m,H-8′),2.44～2.48 (1H,m,H-7a),2.30 (1H,t,J=7.0 Hz,H-8);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:150.8 (C-3),149.1 (C-3′),147.2 (C-4′),146.2 (C-4),139.4 (C-1′),133.1 (C-1),122.1 (C-6),119.5 (C-6′),117.7 (C-5),116.3 (C-5′),113.3 (C-2),111.2 (C-2′),102.8 (C-1″),83.8 (C-7′),78.2 (C-3″),77.8 (C-5″),74.9 (C-2″),73.6 (C-9),71.3 (C-4″),62.5 (C-6″),60.4 (C-9′)56.7 (3′-OCH3),56.3 (3-OCH3),54.1 (C-8′),43.8 (C-8),33.6 (C-7)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为落叶松脂醇-4′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物2：白色粉末,分子式C20H28O12。ESI-MSm/z:505.2[M+HCOO]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.65 (1H,d,J=1.6 Hz,H-3),6.02 (1H,s,H-7),5.05 (1H,d,J=9.2 Hz,H-1),4.93 (1H,d,J=15.2 Hz,H-10a),4.72 (1H,d,J=8.4 Hz,H-1′),4.20 (2H,q,J=7.2 Hz,H-12),3.86～3.82 (H-2′,3′,4′,5′,6′)3.03 (1H,t,J=6 Hz,H-5),2.63 (1H,t,J=8.4 Hz,H-9),2.08 (3H,s,-OAc);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:172.5 (C-11),168.9 (-OAc),155.2 (C-3),146.0 (C-8),131.8 (C-7),108.4 (C-4),101.3 (C-1),100.6 (C-1′),78.6 (C-5′),77.9 (C-3′),75.4 (C-2′),74.9 (C-6),71.6 (C-4′),63.8 (C-12),63.0 (C-6′),61.3 (C-10),46.2 (C-9),42.4 (C-5),20.7 (-OAc),14.6 (C-13)。以上数据与文献[7]基本一致，故鉴定为11-demethoxy-11-ethoxydaphylloside。

化合物3：白色粉末,分子式C19H26O12S。ESI-MSm/z:523.1[M+HCOO]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.65 (1H,d,J=2.6 Hz,H-3),6.02 (1H,d,J=2 Hz,H-7),5.09 (1H,dd,J=14.4,1.2 Hz,H-10),5.05 (1H,d,J=9.2 Hz,H-1),4.94 (1H,d,J=14.8 Hz,H-10),4.80 (1H,m,H-6),4.71 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1′),3.87～3.23 (H-2′,3′,4′,5′,6′),3.74 (3H,s,11-OCH3),3.03 (1H,m,H-5),2.62 (1H,t,J=16.4,8 Hz,H-9),2.34 (3H,s,13-CH3);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:172.9 (C-11),169.3 (C-12),155.4 (C-3),145.5 (C-8),132.4 (C-7),108.1 (C-4),101.2 (C-1),100.6 (C-1′),78.6 (C-5′),77.9 (C-3′),75.3 (C-6),74.9 (C-2′),71.5 (C-4′),66.2 (C-10),63.0 (C-6′),51.9 (11-OCH3),46.2 (C-9),42.4 (C-5),13.5 (C-13)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为鸡屎藤酸甲酯。

化合物4：无色油状,分子式C12H16O6。ESI-MSm/z:279.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:5.87 (1H,m,H-7),5.39 (1H,d,J=8 Hz,H-6),4.72 (1H,d,J=1.2 Hz,H-10a),4.72 (1H,d,J=1.2 Hz,H-10b),3.90 (1H,dd,J=4.8,11.2 Hz,H-3a),3.82 (1H,dd,J=3.6,11.2 Hz,H-3b),3.75 (1H,d,J=0.8 Hz,H-1a),3.74 (1H,d,J=2.4 Hz,H-1b),3.09 (1H,m,H-9),2.95 (1H,m,H-4),2.08 (3H,s,13-CH3);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:180.8 (C-11),172.3 (C-12),148.3 (C-8),126.9 (C-7),88.1 (C-6),62.8 (C-10),62.6 (C-3),60.5 (C-1),50.1 (C-9),45.9 (C-4),43.8 (C-5),20.6 (C-13)。以上数据与文献[9]基本一致，故鉴定为10-acetylborreriagenin。

化合物5：无色粉末,分子式C18H26O11。ESI-MSm/z:463.1[M+HCOO]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.65 (1H,d,J=1.2 Hz,H-3),6.01 (1H,d,J=2 Hz,H-7),5.05 (1H,d,J=9.2 Hz,H-1),4.79 (1H,m,H-6),4.72 (1H,d,J=8.4 Hz,H-1′),4.45 (1H,d,J=16 Hz,H-10),4.20 (1H,dd,J=1.6,16 Hz,H-10),4.19 (2H,dd,J=1.2,7.2 Hz,-CH2CH3),3.84 (1H,dd,J=12,12 Hz,H-6′),3.61 (1H,dd,J=6,12 Hz,H-6′),3.01 (1H,m,H-5),2.56 (1H,t,J=8.4 Hz,H-9),1.29 (3H,t,J=6.8 Hz,-CH2CH3);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:169.0 (C-11),155.3 (C-3),151.5 (C-8),129.8 (C-7),108.5 (C-4),101.5 (C-1),100.4 (C-1′),78.5 (C-5′),77.8 (C-3′),75.4 (C-6),74.9 (C-2′),71.6 (C-4′),62.8 (-CH2CH3),61.7 (C-6′),61.3 (C-10),45.8 (C-9),42.7 (C-5),14.6 (-CH2CH3)。以上数据与文献[10-11]基本一致，故鉴定为去乙酰车叶草苷酸乙酯。

化合物6：无色粉末,分子式C32H44O15。[α]20D-10.3°(c=0.39,CH3OH),ESI-MSm/z:667.3[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:6.98 (1H,d,J=2 Hz,H-2),6.84 (1H,dd,J=1.6,7.6 Hz,H-6),6.79 (1H,s,H-6′),6.75 (1H,J=8 Hz,,H-5),6.72 (1H,s,H-2′),5.59 (1H,d,J=6.4 Hz,H-7),4.73 (1H,d,J=1.2 Hz,H-1‴),4.33 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1″),4.03 (1H,dd,J=8,1.6 Hz,H-9),3.97 (1H,dd,J=1.6,11.2 Hz,H-6″),3.85 (3H,s,3′-OCH3),3.82 (3H,s,5-OCH3),3.85～3.19 (H-9,H-8,H-2″-6″,H-2‴-5‴),3.56 (2H,t,J=6.4 Hz,H-9′),2.62 (2H,t,J=7.6 Hz,H-7″),1.81 (2H,m,H-8′),1.22 (3H,d,J=6.6 Hz,6‴-CH3);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:149.0 (C-3),147.4 (C-4),147.4 (C-4′),145.2 (C-3′),137.0 (C-1′),134.6 (C-1),129.5 (C-5′),119.7 (C-6),118.2 (C-6′),116.1 (C-5),114.0 (C-2′),110.7 (C-2),104.3 (C-1″),102.3 (C-1‴),89.2 (C-7),78.1 (C-3″),76.9 (C-5″),75.1 (C-2″),74.0 (C-4‴),72.5 (C-9),72.3 (C-3‴),72.2 (C-2‴),71.7 (C-4″),69.8 (C-5‴),68.2 (C-6″),62.2 (C-9′),56.7 (3′-OCH3),56.4 (5-OCH3),53.0 (C-8),35.8 (C-8′),32.9 (C-7′),18.1 (5‴-CH3)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为(-)-(7S,8R)-4,9,9′-trihydroxy-3′,5,-dimethoxy-4′,7-epoxy-8,3′-neoligan-9-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→6)]-β-D-glucopyranoside。

化合物7：白黄色粉末,分子式C26H32O11。[α]20D-26.7°(c=0.27,CH3OH),ESI-MSm/z:519.0[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:6.99 (1H,s,H-6′),6.97 (1H,s,H-2′),6.94 (1H,d,J=2,H-2),6.82 (1H,dd,J=8.4,2.0 Hz,H-6),6.77 (1H,d,J=8 Hz,H-5),6.62 (1H,d,J=16 Hz,H-7′),6.24 (1H,dt,J=16,6.3 Hz,H-8′),5.53 (1H,d,J=6.3 Hz,H-7),4.50 (1H,m,H-9′),4.36 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1″);4.33 (1H,m,H-9′),3.88 (3H,s,3′-OCH3),3.82 (3H,s,3-OCH3),3.49 (1H,m,H-8),3.90～3.76 (2H,m,H-9),3.69～3.21(5H,m,Glu);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:149.6 (C-4′),149.3 (C-3),147.7 (C-4),145.7 (C-3′),134.7 (C-1),134.4 (C-7′),132.5 (C-1′),130.4 (C-5′),124.3 (C-8′),119.9 (C-6),116.8 (C-6′),116.3 (C-5),112.1 (C-2′),110.6 (C-2),103.2 (C-1″),89.5 (C-7),78.3 (C-5″),78.1 (C-3″),75.3 (C-2″),71.8 (C-4″),71.1 (C-9′),65.0 (C-9),62.9 (C-6″),56.8 (C-8),56.5 (3′-OCH3),55.3 (3-OCH3)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为(7S,8R)-脱氢双松柏醇-9′-β-葡萄糖苷。

化合物8：无色晶体,分子式C26H34O11。ESI-MSm/z:521.2[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.08 (1H,d,J=8 Hz,H-5),6.89 (2H,s,H-2,2′),6.75 (3H,overlapped,H-5′,6,6′),4.85 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1″),4.74 (1H,d,J=7.2 Hz,H-7′),3.97 (1H,dd,J=6.4,8.8 Hz,H-9a),3.84-3.39 (H-2″,H-3″,H-4″,H-5″,H-6″,H-9′,H-9b),2.97 (1H,dd,J=4.8,13.6 Hz,H-7a),2.74 (H,m,H-8),2.55 (1H,d,J=13.6 Hz,H-7b),2.38 (1H,m,H-8′);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:150.8 (C-3),149.2 (C-3′),147.5 (C-4′),146.3 (C-4),137.1 (C-1),135.3 (C-1′),122.3 (C-6),119.8 (C-6′),118.1 (C-5),116.1 (C-5′),114.2 (C-2),110.5 (C-2′),102.9 (C-1″),84.0 (C-7′),78.2 (C-3″),77.8 (C-5″),74.9 (C-2″),73.4 (C-9),71.3 (C-4″),62.5 (C-6″),60.4 (C-9′)56.7 (3′-OCH3),56.3 (3-OCH3),54.1 (C-8′),43.8 (C-8),33.7 (C-7)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物9：白黄色粉末,分子式C9H10O5。ESI-MSm/z:197.1[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.05 (2H,s,H-2,6),4.27(2H,q,J=7.1 Hz,-OCH2),1.34 (3H,t,J=7.1,-CH3);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:168.7 (C-7),146.6 (C-3,5),139.9 (C-4),121.9 (C-1),110.1 (C-2,6),61.8 (OCH2),14.8 (CH3)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为没食子酸乙酯。

化合物10：白色粉末,分子式 C18H24O12。ESI-MSm/z:431.1[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.65 (1H,s,H-3),6.02 (1H,s,H-7),5.07 (1H,d,J=8.8 Hz,H-1),4.98～4.78 (2H,H-10,6),4.72 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1′),3.89～3.21 (H-2′,3′,4′,5′,6′),3.02 (1H,m,H-5),2.63 (H,t,J=8 Hz,H-9),2.09 (3H,s,H-13);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:172.5 (C-12),172.5 (C-11),155.4 (C-3),145.9 (C-8),131.9 (C-7),101.2 (C-1′),100.5 (C-1),78.6 (C-5′),77.9 (C-3′),75.4 (C-6),74.9 (C-2′),71.6 (C-4′),63.8 (C-10),62.9 (C-6′),46.2 (C-9),42.5 (C-5),20.7 (C-13)。以上数据与文献[15]基本一致，故鉴定为车叶草酸。

化合物11：白色粉末,分子式C18H22O11。ESI-MSm/z:459.1[M+HCOO]-。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.29 (1H,d,J=1.6 Hz,H-3),5.96 (1H,d,J=1.6 Hz,H-1),5.72 (1H,s,H-7),5.56 (1H,d,J=6.4 Hz,H-6),4.76 (1H,dd,J=14.4,1.6 Hz,H-10a),4.65 (1H,dd,J=14,0.8 Hz,H-10b),4.67 (H,d,J=8 Hz,H-1′),3.93～3.12 (H-2′,3′,4′,5′,6′,9,5),2.07 (3H,s,H-13);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:172.6 (C-12),172.2 (C-11),150.3 (C-3),144.3 (C-8),128.9 (C-7),106.2 (C-4),100.0 (C-1′),93.3 (C-1),86.3 (C-6),78.4 (C-3′),77.9 (C-5′),74.6 (C-2′),71.6 (C-4′),62.8 (C-6′),61.9 (C-10),45.3 (C-9),37.5 (C-5),20.6 (C-13)。以上数据与文献[16]基本一致，故鉴定为车叶草苷。

化合物12：白色粉末,分子式C10H13N5O4。ESI-MSm/z:268[M+H]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.35 (1H,s,H-2),8.13 (1H,s,H-8),7.38 (2H,s,-NH2),5.87 (1H,d,J=6 Hz,H-1′),5.47 (2H,d,J=6.4 Hz,2′-OH,5′-OH),5.22 (1H,d,J=4.8 Hz,3′-OH),4.61 (1H,dd,J=11.2,6.0 Hz,H-2′),4.13 (1H,dd,J=8.0,4.4 Hz,H-3′),3.96 (1H,dd,J=6.8,3.2 Hz,H-4′),3.66 (1H,d,J=12.0 Hz,H-5′a),3.54 (1H,m,H-5′b);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:156.2 (C-6),152.4 (C-2),149.1 (C-4),140.0 (C-8),119.4 (C-5),87.9 (C-1′),85.9 (C-4′),73.4 (C-2′),70.7 (C-3′),61.7 (C-5′)。以上数据与文献[17]基本一致，故鉴定为腺苷。

化合物13：白色粉末,分子式 C35H62O6。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:5.32 (1H,s,H-6),4.21 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1′),3.63,3.40(1H,m,H-6′),3.06 (3H,m,H-3′,4′,5′),2.89 (1H,m,H-2′),1.0 (3H,s,H-18),0.91 (4H,d,J=6.4 Hz,H-24,26),0.82 (9H,m,H-2′),0.65 (3H,s,H-18)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:140.5 (C-5),121.3 (C-6),100.8 (C-1′),76.9 (C-5′),76.8 (C-3),73.5 (C-2′),70.1 (C-4′),61.6 (C-6′),56.2 (C-14),55.4 (C-17),49.6 (C-9),45.1 (C-24),41.9 (C-13),38.3 (C-4),36.9 (C-1),36.2 (C-10),35.5 (C-20),33.3 (C-22),31.4 (C-7,8),29.3 (C-2),28.7 (C-25),27.8 (C-16),25.4 (C-23),23.9 (C-15),22.6 (C-28),20.6 (C-11),19.7 (C-27),19.1 (C-26),19.0 (C-19),18.6 (C-21),11.8 (C-29),11.7(C-18)。以上数据与文献[18]基本一致，故鉴定为β-胡萝卜苷。

化合物14：黄白色粉末,分子式C7H6O5。ESI-MSm/z:169.1[M-H]-。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:6.91 (2H,s,H-2,6);13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:167.5 (C-7),145.4 (C-3,5),137.9 (C-4),120.4 (C-1),108.7 (C-2,6)。以上数据与文献[19]基本一致，故鉴定为没食子酸。

化合物15：白色粉末,分子式C30H48O3。1H-NMR (400 MHz,CD3OD),ESI-MSm/z:455.4[M-H]-。δ:5.25 (1H,t,H-12),3.15 (1H,dd,J=4.8,11.2 Hz,H-3),2.85 (1H,dd,J=4.4,14.0 Hz,H-18),1.16,0.97,0.95,0.94,0.91,0.82,0.78 (3H×7,s,H-30,29,27,26,25,24,23)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:181.9 (C-28),145.4 (C-13),123.8 (C-12),79.8 (C-3),56.9 (C-5),47.8 (C-17),47.4 (C-19),43.0 (C-14),42.9 (C-18),40.7 (C-8),40.0 (C-4),40.0 (C-1),38.3 (C-10),35.0 (C-21),34.1 (C-7),34.0 (C-22),33.7 (C-29),31.8 (C-20),29.0 (C-15),28.9 (C-23),28.0 (C-2),26.5 (C-27),24.7 (C-16),24.2 (C-11),24.1 (C-30),19.6 (C-6),17.9 (C-26),16.5 (C-24),16.0 (C-25)。以上数据与文献[20]基本一致，故鉴定为齐墩果酸。

4 讨论

本研究从正丁醇萃取部位分离得到15个化合物，主要为萜类(2～5、10、11、15)、木脂素类(1、6～8)，除此之外还有酚酸类(9、14)、甾类(13)。据报道，茜草属植物化学成分种类丰富，近年来从该属植物中分离得到较多的萜类化合物[21]。本研究通过对钩毛茜草进行化学成分研究，分离得到7个萜类化合物，包括6个环烯醚萜和1个五环三萜，与茜草属植物富含萜类化合物的文献报道一致。此外，本实验分离出的4个木脂素类化合物均为首次从茜草属植物中分离得到，此类成分具有良好的生物活性，化合物6可降低乙酰氨基酚诱导的肝癌细胞系HepG2的细胞损伤[12]，且含量相对较多，具有潜在的应用前景，以期丰富茜草属植物的抗癌活性成分，为后续抗癌药物研究提供参考；化合物8对H1N1流感病毒有强烈的抑制作用，通过下调H1N1流感病毒感染诱导的 TNF-a、IL-6 和 IP-10 等分子发挥作用[22]。本研究结果丰富了钩毛茜草的物质基础，以期为钩毛茜草的进一步开发应用提供理论依据。