Treg及Breg在肝细胞癌中的作用研究进展

赵桂金，张 明，杨 兴，董嘉良

(天津市宁河区医院，天津 301500)

肝细胞癌是一种临床常见的恶性肿瘤，且疾病发病率逐年升高，而肝细胞癌的发生发展为多因素作用结果，因此明确其发病机制可为其临床诊治提供依据。由于免疫微环境对肝细胞癌的发生发展有一定的影响，因此免疫学研究在肝细胞癌的临床诊治中受到极大的关注。Treg细胞和Breg细胞是机体中的重要免疫细胞，也是肿瘤微环境的关键组成部分，不仅能够维持机体免疫功能稳定，还在抗肿瘤的免疫过程中发挥着重要的作用。Treg细胞和Breg细胞通过多机制参与者肝细胞癌的发生、发展，因此本文对Treg细胞和Breg细胞在肝细胞癌中的作用研究进展进行综述。

原发性肝癌是一种临床常见的恶性肿瘤，其中肝细胞癌的占比达90%，且该疾病具有较高的复发率，患者预后差，进而对患者的生命健康造成了严重的威胁。由于肝细胞癌肿瘤的恶性程度较高，故早期诊断难度较大，因此，应寻找有效的早期诊断方法。由于肿瘤的发生与发展受到多因素的影响，而免疫微环境对肿瘤的发生发展的作用被临床广泛重视[1]。近年来，肝细胞癌的免疫治疗成为研究热点，肿瘤微环境概念认为肿瘤、免疫和炎性反应间存在一定的相关性。由于肝细胞癌存在肿瘤免疫微环境的抑制，会对肝细胞癌的免疫治疗产生影响，因此肝细胞癌被常被作为研究肿瘤微环境与肿瘤的发生发展的模型[2]。由于T细胞存在于肿瘤免疫微环境中，因此免疫细胞亚群常被用于研究肿瘤的发生发展。

调节性B淋巴细胞(regulatory B cells,Breg)能够与肿瘤细胞进行相互作用，通过分泌白细胞介素10(interleukin10,IL-10)和转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)等，在肿瘤的免疫系统中具有特殊的调节作用[3]。调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一种T细胞亚群，其具有免疫抑制的作用，可对机体的免疫应答强度进行调控，以减轻机体的免疫损伤。研究显示，Treg及Breg细胞参与了肝细胞癌的发生和发展[4]。抗炎的Treg细胞和Breg细胞能够对机体的免疫平衡进行调控，免疫平衡与肝细胞癌的发生、进展及预后均密切相关。因而，研究肝细胞癌发生发展中Treg细胞和Breg细胞的作用，可为肝细胞癌的诊断和治疗提供指导，同时可为肝细胞癌的预防提供依据。鉴于此，本文对Treg及Breg在肝细胞癌中作用的研究进展进行综述。

1 肝细胞癌免疫的研究进展

目前，关于肝细胞癌免疫的研究多为T淋巴细胞所介导的细胞免疫，关于B细胞在肝细胞癌免疫中的研究相对较少。免疫学理论认为，B细胞在机体受到抗原刺激后，分化成浆细胞，并分泌出免疫球蛋白的抗体，参与机体的体液免疫。临床研究发现，肿瘤组织中存在浸润性的B淋巴细胞。肿瘤浸润的B淋巴细胞能够分泌IgG抗体，对肿瘤组织中的特定抗原进行识别，进而抑制肿瘤的生长。B淋巴细胞同时也是一种抗原呈递细胞，通过其表面的免疫球蛋白将抗原呈递给T淋巴细胞。活化后的B淋巴细胞可替代树突状细胞，作为抗原提呈细胞来参与肿瘤的免疫应答反应。研究表明，在肿瘤的移植免疫中存在Treg和Breg细胞[5]。Treg及Breg细胞参与了肿瘤及移植免疫，且与肿瘤的发生发展密切相关。

2 Treg细胞和Breg细胞的免疫抑制作用概述

2.1Treg细胞的免疫抑制作用：Treg细胞是一种具有免疫负调控功能的T淋巴细胞，其按照来源进行分组可分为天然型Treg细胞(natural Treg，nTreg)和外周诱导型Treg细胞(induced Treg，iTreg)两种类。nTreg细胞在新生儿胸腺中进行发育，然后进入至外周组织中，通过细胞间接触及分泌细胞因子的方式对自身反应性T细胞活化过程产生抑制，进而调节机体的免疫应答反应。nTreg细胞的特征性标志物是CD4+CD25+FOXP3+，而肝脏肿瘤组织中的Foxp3表达水平与免疫球蛋白的表达水平正相关，Foxp3高表达与机体体液免疫系统出现异常激活现象相关，也是决定肝细胞癌患者抗肿瘤免疫反应的因素。TGF-β是iTreg细胞分化和转化的关键细胞因子，在肿瘤组织特异性抗原及外来抗原共同刺激下，经TGF-β诱导后，初始T细胞向Treg细胞进行转化，并参与肿瘤的免疫调节反应[6]。因此，Treg细胞是外周CD4+CD25+T细胞经慢性抗原刺激及细胞因子作用下转化为iTreg细胞，促使IL-10、TGF-β等抑制因子的分泌，并介导免疫抑制的信号通路，进而产生免疫抑制效果。

2.2Breg细胞的免疫抑制作用：最新研究[7]表明，肿瘤浸润性B细胞可能是Breg细胞，在炎性肠炎动物模型中发现了Breg细胞亚群，Breg细胞亚群在自身免疫病中具有一定的抑制作用。Breg细胞亚群不仅参与了自身免疫性疾病的发病，还与肿瘤的发生发展具有一定的相关性。在致癌物质诱导引发的皮肤癌动物模型中，Breg细胞参与了皮肤鳞癌的发生发展[8]。在慢性炎性反应性疾病引发的致癌中，成熟淋巴细胞缺陷会对人类的乳头瘤病毒-16(HPV-16)产生影响，并影响动物模型的致瘤效应，重新输注Breg细胞后可促使免疫细胞浸润至癌前病变中，进而导致癌变发生，因此Breg细胞在慢性炎性反应性疾病转化为肿瘤癌变中的发挥着重要的作用。研究表明，Breg细胞通过刺激其细胞表面的分子，来诱导调节性细胞因子的释放，多种免疫细胞都能够作为Breg细胞作用的靶细胞[9]。以上研究说明，Breg细胞在炎性反应性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤免疫中具有一定的调节作用。

3 Treg细胞和Breg细胞与肝细胞癌发生发展的研究进展

3.1Treg细胞与肝细胞癌发生发展的研究进展：Treg细胞是一类CD4+T细胞亚群，具有一定的免疫抑制功能，在自身免疫疾病的预防、维持机体免疫稳定及抗肿瘤免疫应答抑制中具有重要的作用。较多学者认为，肝细胞癌的发生发展与炎性反应及肿瘤免疫抑制等密切相关。研究表明，Treg细胞的抗肿瘤免疫调节机制为通过对抗肿瘤免疫应答反应产生抑制，促使肿瘤免疫发生逃逸，最终导致恶性肿瘤的发生[10]。因此，在肝细胞癌的发生发展中，免疫应答和炎性反应均具有重要的作用。丁洪基等研究中显示，采集50例肝细胞癌合并HBV感染患者未治疗前的血清，对肝细胞癌进行分期，结果显示出肝细胞癌患者的外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞频率明显高于正常对照组[11]。Treg细胞频率的升高与肝细胞癌的临床分期和肿瘤大小正相关，Treg细胞可通过多机制聚集在机体肿瘤部位。肝细胞癌肿瘤细胞能够分泌出TGF-β、IL-10等细胞因子，并对树突状细胞的成熟产生阻断，促使初始CD4+T细胞向Treg细胞进行转化和扩增，肿瘤细胞还能够通过分泌趋化因子来招募Treg细胞至机体肿瘤部位。史安臣等的研究中指出，荷瘤小鼠体内的Treg细胞通过树突状细胞的功能，下调CD80/CD86共刺激分子表达，对TNF-α、IL-12的分泌产生抑制[12]，进而对机体的免疫应答反应产生抑制。因此，临床认为Treg细胞与肝细胞癌的发生发展密切相关，消除Treg细胞或使其功能失活均能够促使抗肿瘤免疫反应发生，并提高免疫治疗的有效性，有可能成为肝细胞癌肿瘤靶向治疗的新靶点。

3.2Breg细胞与肝细胞癌发生发展的研究进展：李锐等研究中报道，发现Breg细胞的表达与肝细胞癌的肿瘤大小、单发、多发、门脉侵犯及肝脏肿瘤等密切相关[13]。Breg细胞在B细胞上的表达量较低，但Breg细胞通过与T细胞、Treg细胞等免疫细胞发生相互作用后，引起机体出现免疫抑制，并且影响肝细胞癌的进展。说明Breg细胞在肝癌的进展中具有一定的免疫抑制作用。彭程等研究中显示，将肿瘤细胞和无B淋巴细胞浸润的小鼠脾脏细胞共同培养，CD8+T细胞、NK细胞会分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)，在共培养时会将纯化的IL-10加入其中，则能够明显降低IFN-γ的分泌量，说明B淋巴细胞产生的IL-10能够对淋巴细胞的肿瘤细胞杀伤能力产生抑制[14]。也有模型显示，B细胞分泌的IL-10可能与体外IFN-γ的反应性降低具有一定的关系。Breg细胞在肝细胞癌肿瘤中产生免疫抑制的途径有多种。骆春艳等的研究中发现[15]，将Breg细胞注射于负瘤小鼠身上，小鼠体内的肿瘤生长速度明显加快，为了证明CD40/CD154信号参与了Breg细胞的免疫抑制，给予小鼠抗CD154抗体，治疗后肿瘤的生长情况和无Breg细胞组的结果相同，在体外细胞培养中也能够看到类似的结果。若对CD40+CD154的交互作用产生阻断，与Breg细胞共培养后能够使肿瘤细胞的扩增现象迅速消失。因此，Breg细胞可能通过作用CD40/CD154信号引起肿瘤发生免疫抑制，有可能成为肝细胞免疫治疗的新手段。

4 小结

肝细胞癌的生存期较短，原因为发病隐匿、侵袭性强、病情进展快、易发生远处转移及局部复发率高等，且缺乏有效的早期诊断。肝癌细胞能够逃避免疫监视，进而导致肿瘤的发生及发展。近年来，由于肿瘤微环境及炎性反应在肝细胞癌发生发展发挥着重要的作用，因此免疫调节机制成为肝细胞癌发生发展的研究热点。Treg细胞和Breg细胞在肝细胞癌肿瘤免疫中发挥了重要的免疫抑制作用，可帮助理解Treg细胞和Breg细胞对肝细胞癌的免疫抑制作用。Treg细胞能够与肿瘤细胞进行相互作用，通过分泌IL-10和TGF-β等，在肿瘤的免疫系统中具有特殊的调节作用。Breg细胞可调控机体的免疫应答强度，减轻机体的免疫损伤。Treg细胞消除及Treg功能失活均能够促进抗肿瘤免疫，Breg细胞可能通过刺激CD40/CD154信号引发肿瘤免疫抑制，可为肝细胞癌的进一步研究治疗提供依据。