血清载脂蛋白A1、B、E与儿童特应性皮炎的相关性研究

陈祥，蒋最明，顾敏，肖鹏程，胡卫，李娟，易婷，唐满玲

（株洲市中心医院，湖南 株洲 412007）

特应性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一种慢性复发性、炎症性皮肤病，以反复发生的剧烈瘙痒及皮肤干燥为基本特征[1-2]。临床上可分为婴儿期（出生～2岁）、儿童期（2～12岁）、青少年和成人期（＞12岁）。本病初发于婴儿期[3]，多见于儿童和青少年期，在世界范围内，15%～30%的儿童及2%～10%的成人受到AD的影响，是儿童最常见的慢性皮肤疾病[4]。在我国，最新的门诊研究数据显示，1～7岁儿童AD的总体发病率为12.94%[5]。近年来，AD在世界范围内的发病率逐年增加，已成为日益严重的公众健康问题。

目前，AD的发病机制尚未明确，但已认识到皮肤屏障功能障碍、异常免疫应答是发病机制中的重要环节。比如有研究表明，脂类相关物质在维持皮肤正常屏障功能中发挥了重要的作用，其代谢的异常将破坏正常的皮肤屏障功能，并可能通过诱导皮肤固有免疫失调诱发过敏性疾病的发生[6-7]。在Yamane等[8]的研究中，通过对AD患者的皮肤组织进行活检，发现在炎性病变中apo A1的表达水平显著升高，并伴随一些脂类相关物资的代谢异常，如apo A2、FABP-5、α-enolase等。另外，apo A1在其他过敏性疾病中也存在同样的高浓度的情况[9]。这些研究表明脂类相关蛋白比如apo A1可能在维持皮肤的正常免疫应答中发挥重要作用，可能参与过敏性疾病的发生。目前，还没有关于血液中apo含量与AD发生之间相关性的研究报道。因此，本研究以2～7岁儿童AD为研究对象，探讨血液中脂类相关蛋白如apo A1、apo B、apo E与AD发生之间是否存在关联，旨在初步阐明apo A1、apo B、apo E与AD发生之间的关系，并且分析这些apo与患者血清IgE水平之间的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究采用病例对照研究的方法，于2016年1月—2017年6月在中南大学湘雅医学院附属株洲医院皮肤科门诊诊断为AD的患者中选择进行过敏原检测的血液标本，参照适合我国临床和流行病学调查的Williams诊断准则，以有经验的皮肤科医生的临床诊断为金标准，选取300例2～7岁AD患者为病例组。Williams诊断准则如下：必须有皮肤瘙痒史加上以下标准中的3条或以上：①屈侧皮肤受累史，包括肘窝、腘窝、踝前或颈周（10岁以下儿童包括颊部）；②个人哮喘或过敏性鼻炎史（或4岁以下儿童的一级亲属特应性疾病史）；③全身皮肤干燥史；④可见的屈侧湿疹；⑤2岁前发病。另选择同期来源于本院健康体检中心和门诊的健康儿童100例（通过医师询问排除过敏性疾病史，并排除近2个月服用皮质类固醇激素、抗组胺药患者或者近2周内无外用皮质类固醇激素的健康体检者）作为对照组，其中男38例，女62例，年龄（4.0±1.7）岁。所有采集的血清标本，置于-20℃冻存。本研究通过中南大学湘雅医学院附属株洲医院伦理委员会批准。

1.2 血清 apo A1、apo B、apo E 检测 apo A1、apo B、apoE检测采用免疫比浊法，检测仪器为罗氏cobas C501全自动生化分析仪。apo A1和apo B试剂与质控品均购自罗氏诊断产品有限公司，apo E试剂和质控品购自宁波普瑞柏生物技术股份有限公司。检测仪器的检测器件性能良好，在校准周期内。

1.3 过敏原与总IgE水平检测 采用德国AllergyScreen过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒（免疫印迹法），操作步骤严格按照说明书进行。特异性IgE（sIgE）结果为定量资料；总IgE结果为分类资料，以＜100 kU/L、100～200 kU/L、＞200 kU/L 表示。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0统计软件对数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，2组间比较采用两独立样本t检验。分类型数据采用Logistic向前逐步法回归模型进行分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清apo A1、apo B、apo E在2组中的含量 利用罗氏cobas C501全自动生化分析仪检测AD组和对照组中血清apo A1、apo B、apo E的含量，结果显示，AD组apo A1浓度显著高于对照组，对照组apo E浓度显著高于AD组，而apo B在2组中的含量差异无统计学意义，结果见表1。

表1 apo A1、apo B、apo E在AD组以及对照组中的含量

2.2 AD患者血清总IgE水平和sIgE阳性率的分布 300例AD患者中有266例（88.7%）sIgE阳性，其中男 108例（36.0%）、女 192例（64.0%）；有 175例（58.3%）总IgE＞200 kU/L，其中男 71例（40.6%）、女104例（59.4%）。sIgE阳性者的男女比例与总IgE＞200 kU/L者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 血清apo A1、apo B、apo E与AD患病风险的关系 Logistic回归分析显示，未校正混杂因素时，apo A1每升高1 g/L，AD的患病风险增加4.716倍（95%CI：1.636～13.596，P=0.004）；apo E 每升高 1 g/L，AD的患病风险是原来的 0.967倍（95%CI：0.946～0.989，P=0.003），进一步校正年龄、性别后，apo A1每升高1 g/L，AD的患病风险增加7.415倍（95%CI：2.549～22.763，P=0.002）；apo E 每升高 1 g/L，AD 的患病风险是原来的 0.958倍（95%CI：0.936～0.980，P＜0.001）；apo B校正前和校正年龄、性别后都不与AD患病风险显著相关；年龄每增加1岁，AD的患病风险是原来的 0.968 倍（95%CI：0.921～0.983，P＜0.001）；性别与AD的患病风险没有显著相关性。

2.4 血清 apo A1、apo B、apo E与总IgE及特异性IgE浓度的关系 无论校正年龄、性别混杂因素与否，apo B、apo E均不与总IgE的浓度有相关性，而在未校正混杂因素时，apo A1每升高1 g/L，总IgE＞200 IU/mL的风险增加 6.069倍（95%CI：1.759～22.156，P=0.004）；校正年龄、性别后，apo A1 每升高1 g/L，总IgE＞200 IU/mL的风险仍然增加7.018倍（95%CI：1.746～20.762，P=0.005）。无论校正年龄、性别混杂因素与否，3种apo均与特异性IgE浓度增加无显著相关性。

3 讨论

AD是一种以皮肤干燥、瘙痒和炎性反应为主要特征的慢性、复发性疾病，发病与年龄高度有关，虽可发生于任何年龄，但多见于婴幼儿时期。因此本研究选取2～7岁儿童AD为研究对象，符合该疾病的发病特征。现有研究表明，AD的发病机制复杂，与遗传、环境、免疫等多方面因素有关[10]，其机制至今还没完全阐明清楚。近年来，随着研究的不断深入，已经证实皮肤屏障功能障碍、异常免疫应答是AD发病过程中的重要环节，表皮中的一些载脂蛋白参与维持正常的皮肤屏障功能，其代谢的异常将破坏正常的皮肤屏障功能，并可能通过诱导皮肤固有免疫失调诱发过敏性疾病的发生，比如apo A1在AD等过敏性疾病的病变皮肤中表达上调[8-9]，另外也有文献表明，apo C1也参与AD的发生[11]，因此诸多证据提示笔者，脂类相关蛋白在维持人体正常的固有免疫中扮演了重要的角色，脂类蛋白比如apoA1、B和E代谢异常可能与过敏性疾病的发生有关。

在本研究中，笔者选取2～7岁儿童为研究对象，初步探讨了apo A1、B和E与一种常见的过敏性疾病即AD之间的相关性，并且对3种apo与患者血清总IgE及特异性IgE浓度的关系进行了分析。研究结果显示，AD组比对照组血清中有更高浓度的apo A1，且无论校正年龄、性别与否，apo A1与AD的患病风险呈显著的正相关关系，这与有学者报道apo A1在过敏性疾病病变组织中高表达的结论一致，这为apo A1与过敏性疾病的关系提供了新的证据，表明apo A1可能是儿童AD发生的危险因子[11]。另外，研究还发现对照组血清中有更高含量的apo E，且无论校正年龄、性别与否，apo E与AD的患病风险呈显著的负相关关系，这与Kim等[12]的研究结论一致，这表明apo E可能是儿童AD发生的保护因子。而本研究并没有发现apo B与AD的发生有显著相关性。此外，研究还发现，随着年龄的增加，AD的患病风险呈逐年递减的趋势，性别与AD并无显著相关性，这些结论与国内其他的研究结果一致[13-14]。另一方面，多项研究表明AD的发生与总IgE及特异性IgE存在相关性，二者被认为是辅助诊断AD常用的实验室指标，并且有些研究认为总IgE浓度随着疾病的严重程度而改变[15]，因此，本研究也探讨了 apo A1、B、E与总IgE、sIgE之间的关系。笔者的研究结果显示，无论校正年龄、性别与否，apo A1能增加总IgE＞200 IU/mL的风险，apo B、apoE无论校正年龄、性别与否均与总IgE＞200IU/mL的风险增加无显著相关性，这表明，apo A1可能通过IgE介导途径参与AD的发生，apo E可能通过非IgE介导途径参与AD的发生。另外，无论校正年龄、性别混杂因素与否，3种apo均与sIgE浓度增加无显著相关性，这可能是由于这可能是由于本研究检测的过敏原并不覆盖所有过敏原种类，有些特异性IgE浓度很低的标本会出现总IgE浓度高水平的情况，导致特异性IgE浓度与总IgE浓度并不平行变化。

综上所述，本研究发现，apo A1可能是通过IgE介导途径参与AD发生的危险因子，apo E可能是独立于IgE介导途径AD的保护因子，apo B与AD的发生无显著相关性。总之，这些研究结果初步阐明了apo A1、B、E与AD的关系，丰富了脂质相关蛋白与AD发生之间的关系，为AD与宿主脂质相关免疫机制的深入研究提供了新的证据。