揭阳地区儿童肺炎支原体感染情况的研究

陈奕颖 陈宋钦 陈华宏

1.广东省揭阳市人民医院检验科，广东揭阳 522000；2.广东省揭阳市人民医院病理科，广东揭阳 522000

肺炎支原体（mycoplasma pneumonia，MP）不同于普通的细菌和病毒，其是目前已知的能独立生活的最小微生物，是中国儿童社区获得性肺炎（Community-acquired pneumonia，CAP）的重要病原之一[1]。MP主要通过呼吸道传播，在人群聚集地可出现暴发流行。儿童感染MP后，除出现呼吸道症状外，还可导致心肌炎、脑炎、肾炎等多种肺外并发症以及肺坏死[2]，严重影响儿童健康。近年来，MP感染率明显上升[3]，且文献报道不同地区MP感染流行病学特征存在显著差异[4]，而揭阳地区儿童MP的感染情况未见文献报道。本研究通过对2873例呼吸道感染患儿的MP-RNA检测结果进行回顾性分析，探讨分析揭阳地区儿童MP的感染情况及流行病学特点，为临床诊治MP感染提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年7月至2019年6月揭阳市人民医院收治的呼吸道感染儿童2873例为研究对象。纳入标准：①年龄0～14岁；②以发热、咳嗽等呼吸道症状为首发症状；③均符合《诸福棠实用儿科学（8版）》[5]中关于小儿呼吸道感染疾病的相关诊断标准。按患儿发育不同阶段将其分为：婴儿组（＜1岁，1070例）、幼儿组（1～＜3岁，896例）、学龄前组（3～＜6岁，607例）、学龄组（6～14岁，300例）。

1.2 仪器与试剂

厦门天中达生物科技有限公司生产的化学发光检测仪TZD-CL-200S，杭州奥盛仪器有限公司生产的迷你金属浴，以及武汉中帜生物科技股份有限公司生产的肺炎支原体/肺炎衣原体核酸检测试剂盒（双扩增法）。

1.3 检测方法

所有患儿于入院24 h内无菌采集咽试子标本（或肺泡灌洗液），置于保存液中立即送检。向标本中加入20 μl细胞裂解液，旋涡震荡30 s，室温裂解15 min；往17 μl扩增反应液中加入2 μl裂解后的样本，然后进行T7核酸扩增和多生物素信号放大的相关操作。根据待测样本与阴性质控物的相对光单位比值R进行结果判读：比值R＞1.0判断为阳性，比值R≤1.0判断为阴性。所有操作过程均严格按照试剂盒说明书且保证质控在控的情况下进行。

1.4 统计学处理

应用SPSS 22.0统计学软件对本研究数据进行分析，计量资料以（x±s）表示，符合正态分布的多组间资料比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，不符合正态分布的资料采用独立样本的秩和检验，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MP感染总体情况

2873例呼吸道感染患儿中，检出MP感染患儿186例，总感染阳性率为6.47%。

2.2 不同性别患儿MP感染情况比较

2873例患儿中共检测男性患儿1804例，阳性116例，阳性率为6.43%；检测女性患儿1069例，阳性70例，阳性率为6.55%。不同性别的患儿间MP检出率比较，差异无统计学意义（χ2=0.015，P＞0.05）。

2.3 不同年龄患儿MP感染情况比较

6～14岁学龄组患儿MP检出率最高，其次是学龄前组；且随着年龄的增长，MP检出率呈增高趋势；各年龄组间MP检出率比较，差异有统计学意义（χ2=152.372，P＜0.01）。见表1。

表1 不同年龄患儿MP感染阳性比较

2.4 不同季节患儿MP感染情况比较

根据广东地区的季节特点，按阳历月份将各季节划分如下：春季（3～5月）；夏季（6～8月）；秋季（9～11月）；冬季（12月至次年2月）。春季的MP检出率最高，其次是夏季；春夏季间患儿MP检出率比较，差异无统计学意义（χ2=0.074，P＞0.05）；秋冬季间患儿MP检出率比较，差异无统计学意义（χ2=0.003，P＞0.05）；夏秋季间患儿MP检出率比较，差异有统计学意义（χ2=6.049，P＜0.05）；而春秋季、春冬季、夏冬季间患儿的MP检出率比较，差异有统计学意义（χ2=8.133，P＜0.01；χ2=10.429，P＜0.01；χ2=7.583，P＜0.01）。见表2。

表2 不同季节患儿MP-RNA检测结果

3 讨论

肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体，鉴于MP无细胞壁的特殊结构特点，大环内酯类抗生素已成为治疗儿童MP感染的首选药物，但近年研究发现，MP对大环内酯类药物的耐药情况日益严重，难治性MP肺炎的病例也逐年增加。而如何快速地诊断和治疗MP感染是防止MP耐药和暴发流行的关键。血清学特异性抗体检测（MP-Ab）是目前临床上最常用的检测方法，但也存在诸多的影响因素，如疾病病程、个体免疫状态差异等[6]。PCR技术的应用，与传统的血清学方法相比，敏感性、特异性和准确性更高，且不受患儿免疫状态的影响，有利于MP感染的早期诊断[7]。但MP-DNA的检测与MP的存活状态无关，阳性结果无法提示是否是现症感染。本研究所采用的双扩增技术，以RNA恒温扩增法为基础，将T7核酸扩增和多生物素信号放大技术相结合，对样本中MP的RNA进行检测，是一种全新的核酸检测技术。RNA仅存在于活菌中，MP死亡后RNA快速降解，因此采用此方法进行MP的检测，如果阳性提示MP近期感染，而不是既往感染[8-9]。该方法具有更高的敏感性和特异性，且所需时间短，是目前能够比较准确地反应MP感染状态的检测方法。

最近几年各地呼吸道感染儿童MP检出率各不相同且差异大[10-11]，但以此次揭阳地区的MP检出率最低，可能与标本取材、标本类型、取样时间、检测方法和选择的检测对象有关。MP感染是否存在性别差异，到目前为止尚无统一说法。各地区不同性别间儿童MP检出率各不相同，本研究显示，男性患儿MP感染率为6.43%，女性患儿MP感染率为6.55%，差异无统计学意义（P＞0.05）。MP感染可发生于儿童各年龄段，国内外报道均显示，MP感染发病的高峰期为学龄前期和学龄期儿童[12-13]，本研究结果显示，揭阳地区学龄组呼吸道感染儿童MP检出率明显高于其他年龄组，其次是学龄前组；且MP检出率随着年龄的增长呈增高趋势；各年龄组间差异有统计学意义（P＜0.05）；此结论与上述文献报道一致。学校群体的生活环境和免疫力低下是导致学龄组、学龄前组儿童MP感染高发的主要原因。在季节分布方面，MP感染全年均有散发，由于地域的不同，流行季节也可能存在差异[14]。本研究结果显示，春季呼吸道感染儿童MP的检出率最高，其次是夏季，与其他文献的报道不太一致[15-16]。由于该项目开展时间不长，现有的实验数据只能说明春季是本年份MP感染的高发季节。至于流行季节的统计，笔者将会进一步追踪报道。

综上所述，本研究分析了揭阳地区呼吸道感染儿童MP感染情况和流行现状，对高危人群及高发季节常规进行MP-RNA检测，更早期地诊断MP感染，可有效避免MP感染的漏诊、误诊，防止抗生素的滥用；对MP感染儿童采取必要的隔离措施，可有效地防止MP在学校等儿童聚集地的暴发流行。