高脆金针菇“蓉金567”的选育

曾先富 李昕竺 熊维全

（成都市农林科学院园艺所，四川成都610030）

金针菇（Flammulina velutipes）又称冬菇、朴菇、毛柄金钱菌等，其菌盖滑润、菌柄细长脆嫩，形美味鲜，营养价值和保健功效显著，具益智作用和观赏价值，开发利用前景广阔[1]。近年来，即食金针菇食品、休闲产品等加工产品不断涌现，既拓展了金针菇产品市场，也满足了人们更高层次的营养保健需求。

加工的金针菇除了对外观品质有一定要求外，更重要的是营养、口感。目前金针菇加工企业原料均为鲜金针菇，品质参差不齐，且加工产品普遍存在塞牙、咀嚼不爽的现象，严重制约了金针菇加工产品的销售及深度开发[2]。

研究立足于解决企业对加工金针菇品质要求，以咀嚼口感为主要指标，兼顾营养和产量指标，通过单孢杂交和系统筛选，获得品质优良的黄色金针菇加工专用新品种“蓉金567”。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）金针菇菌株：收集性状优良的9个金针菇菌株作为亲本筛选材料，其编号分别为①（B3，上海市农业科学院）、②（G1，上海市农业科学院）、③（F3-1，成都市农林科学院）、④（川金7号，四川省农业科学院）、⑤（金丝，成都市农林科学院）、⑥（FA12-24，成都市农林科学院）、⑦（川金3号，四川省农业科学院）、⑧（金杂19，福建三明真菌研究所）、⑨（金丝2号，成都市农林科学院）。

（2）培养基：PDA 加富培养基为马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂16 g，蛋白胨2 g，磷酸二氢钾1 g，硫酸镁0.5 g。原种培养基为棉籽壳78%，米糠15%，玉米粉5%，白糖1%，石膏1%。培养料为配方①棉籽壳53%，胡豆壳9%，棉渣24%，玉米粉7%，麸皮2%，稻草1%，磷肥1%，尿素0.1%，硫酸镁0.1%，石灰2%，石膏0.8%；配方②玉米芯42%，细木屑30%，麸皮20%，玉米粉5%，白糖1%，石膏1%，石灰1%。

1.2 试验方法

1.2.1 技术路线

亲本材料筛选——单孢分离与单核菌丝鉴定——单核菌丝配对杂交——杂合子初筛——优良菌株复筛

1.2.2 亲本材料筛选

成都市农林科学院从四川省农业科学院、上海市农业科学院、福建三明真菌研究所等地引进金针菇（菌株）5 个，自主分离保藏菌株4 个，共9 个菌株进行比较试验。以配方①配制培养料，用22 cm×45 cm 袋装料，每袋装料800 g，高压灭菌，接种；18～20 ℃培养 45 d，移入菇房，开口，搔菌，保湿出菇（两头出菇）。连续试验3 批次。每个菌株选择30 袋，采收第一潮菇，考察商品外观、产量、营养成分和脆度，从中筛选出产量较高、商品外观较好、营养品质高且脆度值高的2 个菌株作为杂交亲本材料。

金针菇菌株的脆度由成都大学采用质构仪测定，营养成分由四川省农业科学院分析测试中心检测。

1.2.3 杂交选育

1.2.3.1 孢子的分离和单核菌丝的鉴定

分别制作亲本孢子印，以梯度稀释法将孢子液稀释至约103个/mL，两个亲本各取0.1 mL 孢子液均匀涂布于PDA平板培养皿中，倒置于24 ℃培养箱中培养3～5 d。待培养基上出现肉眼可见微小菌落时，挑取单个菌落转接于PDA 平板上，在菌落边缘斜插一灭菌的盖玻片，24 ℃培养箱中培养2～3 d，待菌丝爬上盖玻片后取出盖玻片，用乳酸酚棉蓝试剂染色，在普通光学显微镜下观察有无锁状联合。试验共获得36 个③号（F3-1）菌株的单核体、24 个④号（川金-7）菌株的单核体。

1.2.3.2 单核菌丝配对杂交

将1.2.3.1 的单核体两两配对培养。在无菌条件下用灭菌的吸管切取直径约0.8 cm的菌块于PDA平板上培养，两个菌块间距1 cm，24 ℃培养箱培养3～5 d。当两个能融合的单菌落中间形成突起的融合线时，在无菌环境中挑取融合处菌丝到另一PDA培养基上培养，将灭菌的盖玻片斜插入菌落边缘培养基中，24 ℃培养箱中培养2～3 d。待菌丝爬上盖玻片后取出盖玻片，用单核菌丝检验方法检验融合是否成功，将有锁状联合或双核的菌丝转接到PDA斜面培养基中扩培。

1.2.3.3 杂合子初筛

以配方②配制培养料，用17 cm×33 cm 的袋装料（每袋装料折干250 g），121 ℃灭菌2 h。每个杂交种直接用母种接种5 袋，培养室25 ℃恒温暗培养。待菌丝长满袋后，移入出菇房出菇。采收第一潮菇，记录产量等数据。筛选农艺性状优良的菌株进入复筛。

1.2.3.4 优良杂交菌株复筛

培养料同初筛，用22 cm×45 cm 袋装料，每袋装料800 g，高压灭菌，接种，18～20 ℃培养45 d，移入菇房，开口，搔菌，保湿出菇（一头出菇）。每个菌株选择30袋，采收第一潮菇，记录其产量等数据，同时送样至成都大学检测脆度。

2 结果与分析

2.1 亲本材料筛选结果

综合色泽、基部褐变长度等商品外观，编号②、④、⑤、⑥、⑨菌株较优，而从袋产量考虑，编号③（F3-1）的产量最高，比大面积栽培的⑦号（川金3号）高2%左右。

表1 9个金针菇菌株产量和商品外观等性状比较

表2 每100 g鲜品金针菇营养成分及脆度值

由表2 可知，金针菇③、④、⑤、⑦号品质较优，③号（F3-1）的脆度值极高，口感极佳，非常满足深加工要求。

2.2 杂交选育结果

孢子分离和单核菌丝的鉴定，获得36个③号菌株的单核体、24 个④号菌株的单核体。单核菌丝两两配对杂交，获得具有锁状联合的杂合子452 个。袋栽出菇试验初筛，获得黄色、菌柄较细且白、菌盖包裹紧实、基部褐变少的菌株19个。

2.2.1 优势杂交菌株复筛结果

由表3 可以看出，杂交亲本③、④号菌株在培养料（配方②）上的菌丝生长速度分别为（2.28±0.14）mm/d、（2.16±0.06）mm/d，菌丝长势较好。杂交子代菌丝生长速度较两个亲本快的有325、371、389、503、567、607号菌株，其中371、503、567号菌株的菌丝生长极为浓密。

图1 亲本子实体形态

表3 优势杂交菌株及其亲本在培养料（配方②）上菌丝生长情况

表4 优势杂交菌株及其亲本子实体性状及产量比较

由表4可以看出，与亲本菌株相比，杂交子代基部褐变长度变短，编号187、300、389 菌株基部褐变相对较长。杂交子代第一潮菇袋产量差异较大，介于220～410 g，其中产量高于两个亲本菌株的杂交菌株有54、187、299、300、375、429、504、567 号，产量最高的为567号菌株。

2.2.2 亲本及优良杂交菌株的营养成分及脆度

表5 优势杂交菌株及其亲本子实体主要营养成分及脆度

由表5 可以看出，杂交子代菌株子实体脆度值高于两个亲本子实体脆度值的有299、371、389、429、567、607号菌株，其中567号菌株子实体脆度值明显高于亲本。子实体蛋白质含量介于亲本③和④菌株之间的有 19、325、336、371、389、429、450、567 号菌株。子实体氨基酸总量介于亲本③和④菌株之间，或者是高于两个亲本的有19、54、299、300、325、371、429、503、567、607、714、743号菌株。

综合表4、表5结果，子实体脆度值高，营养价值高的杂交子代菌株为567号。该菌株经四川省农作物品种认定委员会定名为“蓉金567”。

图2 高脆度黄色金针菇“蓉金567”子实体形态

3 小结

蓉金567 营养成分与亲本接近，但脆度值约是亲本③（F3-1）菌株的1 倍，是亲本④（川金7 号）菌株2 倍多。相对于亲本F3-1，该菌株具有菌盖不易开伞，菌柄色泽光亮，基部褐变部位短等商品外观优势，且脆度值高（咀嚼不塞牙），非常适合加工为即食食品。