雄激素受体在非特殊类型浸润性乳腺癌中的表达及预后意义的探讨*

苏亭，叶入裴，李星枝，夏天，龙汉安，肖秀丽

646000四川 泸州，西南医科大学附属医院 病理科

乳腺癌在女性恶性肿瘤中的发病率和死亡率均居于首位，严重威胁着女性的健康和生命[1]。目前已有大量学者对其发生发展的分子机制进行了研究，但对其预后相关指标的研究尚不够充分。近年来有研究表明雄激素受体(androgen receptor，AR)与乳腺癌的预后密切相关[2]，但对于AR能否作为乳腺癌预后指标尚存争议，故本实验探讨AR与目前较为公认的乳腺癌预后相关因素[3]如组织学分级、分子分型、Ki-67的关系，间接探讨AR是否能作为乳腺癌预后指标之一。

1 材料与方法

1.1 一般资料分析

收集2017年1月至2019年6月在本院经病理诊断为非特殊类型浸润性乳腺癌病例279例，统计所有患者临床资料。

1.2 方法

采用免疫组化 Envision两步法检测癌组织中AR、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)以及细胞增殖标记抗原Ki-67的表达。具体操作步骤严格按照说明书进行。

1.3 结果判读

所有切片的染色结果均由两位高级职称病理医生进行判读。判读标准如下：根据美国临床肿瘤学会和美国病理学家学会在2010年发布的乳腺癌ER/PR免疫组化检测指南[4]， ER和PR均以≥1%的肿瘤细胞核内出现黄色、棕黄色或褐色颗粒为阳性。2019版乳腺癌 HER2检测指南[5]提出HER2判读标准为：(0)为无着色或≤10%的肿瘤细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色；(+)为>10%的肿瘤细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色；(++)为>10%的肿瘤细胞呈现弱～中等强度的、完整的细胞膜染色，或≤10%的肿瘤细胞呈现强而完整的细胞膜染色；(+++)为>10%的肿瘤细胞呈现强而完整且均匀的细胞膜染色；(0)或(+)被认为是 HER2阴性(HER2-)；(+++)被认为是HER2阳性(HER2+)；(++)为HER2可疑阳性，需结合荧光原位杂交结果进一步判读，当HER2/CEP17比值≥2.0，或者HER2/CEP17比值<2.0但平均HER2拷贝数/肿瘤细胞数≥6.0时HER2阳性。 AR以≥10%的肿瘤细胞核内出现黄色、棕黄色或褐色颗粒为阳性[6]。Ki-67根据2019年St.Gallen专家共识进行判读[7]，以≥20%肿瘤细胞核内出现棕色或深棕色颗粒为高表达，反之为低表达。

1.4 统计学处理

数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析，不同组织学分级的乳腺癌患者的AR表达阳性率差异比较采用等级资料的秩和检验，不同分子分型、不同ER、 PR和 Ki-67表达的乳腺癌患者的AR表达阳性率差异比较采用等级资料的卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 临床资料

所有患者均为女性，术前均未进行放化疗、中药或激素等治疗。患者年龄27～82岁，中位年龄50岁，其中≤50岁患者145例(51.97%)，>50岁患者134例(48.03%)；肿瘤最大直径为0.8～13 cm,平均直径(2.70±1.34) cm，其中≤2 cm患者108例(38.71%)，>2 cm且≤5 cm患者152例(54.48%)，>5 cm患者10例(3.58%)。组织学分级I级6例(2.15%)，II级217例(77.78%)，Ⅲ级44例(15.77%)。乳腺癌分子分型根据2019年St.Gallen专家共识[7]分为Luminal A型、Luminal B型、HER2过表达型和三阴性型4种亚型。 其中Luminal A型46例(16.49%)，Luminal B型153例(54.84%)，HER2过表达型24例(8.60%)，三阴性型37例(13.26%)。

2.2 AR在非特殊类型浸润性乳腺癌不同组织学

分级中的表达

在279例非特殊类型浸润性乳腺癌中AR阳性表达率为64.87%(181/279)。AR在组织学I、II、III级中的阳性率分别为83.33%、68.66%、45.45%(表1、图1)，差异有统计学意义(P=0.008)。提示随着组织学分级的增加，非特殊类型浸润性乳腺癌患者AR的阳性率逐渐降低。

表1 不同的组织学分级、分子分型、ER、PR和Ki-67表达的非特殊类型浸润性乳腺癌患者其AR表达阳性率的比较

图1 非特殊类型浸润性乳腺癌的组织学分级以及AR在不同组织学分级中的表达(×200)

2.3 AR在非特殊类型浸润性乳腺癌不同分子分型中的表达

AR在不同分子分型中的阳性率也不同，AR在 Luminal A型、 Luminal B型和HER2过表达型中的阳性率分别为71.74%、68.63%和62.50%，均比其在三阴性型乳腺癌中的阳性率(27.03%)高，差异均有统计学意义(P<0.001)(表1)。

2.4 非特殊类型浸润性乳腺癌中AR的表达与ER、PR的关系

非特殊类型浸润性乳腺癌中，ER阳性表达组(73.71%)的AR阳性率高于ER阴性表达组(44.71%)，差异有统计学意义(P<0.001)；PR阳性表达组的AR阳性率(71.07%)高于PR阴性表达组(50.00%)，差异有统计学意义(P=0.001)(表1)。

2.5 非特殊类型浸润性乳腺癌中AR的表达与Ki-67的关系

在Ki-67阴性表达组的非特殊类型浸润性乳腺癌中 AR阳性率(79.45%)比在Ki-67阳性表达组(59.71%)高(P=0.002)(表1)。

3 讨 论

AR是类固醇核受体家族的一员，有4个独特的功能结构域，包括配体独立激活功能域、高保守的DNA结构域、高保守的配体结合域和铰链区，通过与其他因子的相互作用来调控雄激素的生物学效应[8]。近年来有大量研究聚焦于AR在乳腺癌中的作用机制，研究发现 AR是乳腺癌的抑癌基因[9]。Zhang等[2]研究发现在双氢睾酮的刺激下，AR转位到细胞核内，并上调 let7的表达，从而降低肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移；并提出 AR/let7a信号通路可以作为一个新的治疗靶标。McNamara等[10]研究发现雄激素途径与降低三阴性型乳腺癌的侵袭性相关，AR的表达缺失在乳腺癌的侵袭与转移中起着重要作用。但 AR在乳腺癌预后中的作用仍需进一步研究。目前乳腺癌已成为全球第一大癌症[1]，而非特殊类型浸润性乳腺癌是乳腺癌中最常见的亚型[3],因此本研究以非特殊类型浸润性乳腺癌为研究对象，观察其免疫组化指标AR的表达情况，统计分析AR与目前较为公认的预后指标，包括组织学分级、分子分型以及Ki-67的关系，从而探讨AR在非特殊类型浸润性乳腺癌中的预后意义。

本研究显示AR在非特殊类型浸润性乳腺癌中的阳性表达率为64.87%，与以往文献中所报道的60%～80%一致[11]，并且组织学分级越高的乳腺癌中，AR的阳性表达率越低(P=0.008)，与文献报道一致[12]，而组织学分级正是判断肿瘤恶性程度的一个重要指标，分级越高的肿瘤，分化越差，恶性程度越高，提示 AR阳性表达的乳腺癌恶性程度可能更低。在不同的分子分型中 AR的阳性表达率也有很大差别,Collins等[13]研究发现 AR的阳性表达率在三阴性型乳腺癌中最低(32%)，在 Luminal A型中最高(91%),本研究结果与之一致，AR阳性率在三阴性型(27.02%)、 HER2型(62.50%)、 Luminal B型(68.63%)、 Luminal A型(71.74%)中依次升高。而三阴性型乳腺癌与其他分子亚型乳腺癌相比，恶性程度更高，预后更差，进一步提示 AR的表达可能与肿瘤恶性程度及预后有一定关系，表达越低预后越差。

本研究显示AR在 ER阳性表达组中高表达，与文献报道一致[12]。AR在 ER阳性乳腺癌中的作用是近年来的研究热点,Peters等[14]首次提出 AR可作用于雌激素靶基因的反应元件，作为乳腺癌细胞中ERα信号通路的直接抑制因子，可以抑制 ER阳性乳腺癌细胞的增殖。研究发现AR可能在 ER靶基因上有独特的结合位点，通过与该位点结合，直接抑制其转录，也可以通过竞争性结合调控因子而间接抑制转录，从而抑制乳腺癌细胞的增殖[15]。王丽等[16]对584例非特殊类型浸润性乳腺癌进行了预后分析，研究结果显示与ER阴性/AR阳性组相比，ER阳性/AR阳性组中，患者的无复发生存率、总生存率以及无远处转移生存率均更高，即在ER阳性乳腺癌中，AR阳性表达预后更好，进一步提示，AR与乳腺癌预后相关。本研究结果还显示PR阳性组AR高表达，与文献报道一致[17]。PR是ERα的作用靶标，因此PR常被作为功能性ER表达的标志物[18]。此外，也有学者研究发现，PR阳性是原发性乳腺癌患者预后良好的标志，与PR阴性组相比，其分化程度更高，侵袭性更低，以及总体生存率更高[19-20]。本研究显示PR阳性组AR高表达，进一步提示AR与乳腺癌预后相关。

Ki-67被称为细胞增殖指数，标记处于增殖周期中的细胞，组织分化越差，阳性率越高[21]。研究显示，AR阳性表达者Ki-67增殖指数低[22]，其原因可能是AR在双氢睾酮刺激下向细胞核转移，并上调let-7a的转录，然后抑制乳腺癌细胞增殖[2]；也可能是激活的AR通过负性调节miR-21的表达而降低细胞的增殖作用[23]；AR激活后还可促进抑癌基因KLLN的表达，然后激活TP53和TP73的转录，从而促进细胞周期阻滞，抑制增殖[24]。本研究也显示Ki-67阴性组AR表达较Ki-67阳性组高(P=0.002)，与文献报道一致[22]。

众所周知，组织学分级低和Ki-67低表达是公认的预后好的指标。本研究显示在非特殊类型浸润性乳腺癌中，AR高表达与组织学分级低、Ki-67指数低相关，且在预后最差的三阴性型乳腺癌中AR低表达，从而间接推测 AR高表达可作为乳腺癌预后好的指标之一,AR低表达可能提示预后差。AR与乳腺癌预后之间的关系仍需大量的临床病例研究来证实，AR在乳腺癌中的作用机制仍值得进一步探索。

作者声明：本文全部作者对于研究和撰写的论文出现的不端行为承担相应责任；并承诺论文中涉及的原始图片、数据资料等已按照有关规定保存，可接受核查。

学术不端：本文在初审、返修及出版前均通过中国知网(CNKI)科技期刊学术不端文献检测系统的学术不端检测。

同行评议：经同行专家双盲外审，达到刊发要求。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

文章版权：本文出版前已与全体作者签署了论文授权书等协议。