CDX-2、β-catenin、P53的表达与胃癌临床病理特征及预后的关系

卢丽花 江秋菊

胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，发病率及死亡率较高，据调查显示，每年约74万人死于胃癌，病死率位居恶性肿瘤的第2位，严重威胁人们的生命[1]。胃癌早期症状不明显，多数患者确诊时已是中晚期，导致其预后差，因此，寻找与疾病相关的分子标志物，了解胃癌的发展有助于胃癌的早期诊断，对改善患者预后具有重要意义。CDX-2是同源异型盒基因家族成员之一，是与人类关系最为密切的抑癌基因，参与胚胎发育，还能调节肠上皮细胞分化及增殖；β-catenin为Wnt/β-catenin信号通路的关键调节蛋白，可参与肿瘤调控，在多种恶性肿瘤中表达异常[2]。已有研究证实，CDX-2、β-catenin在直肠癌发展过程中发挥重要作用[3]。P53基因是人体抑癌基因，其失活对肿瘤形成起重要作用[4]。CDX-2、β-catenin、P53均被证实与胃癌关系密切，但其与胃癌预后的关系尚不明确[5]。因此，本研究旨在探讨CDX-2、β-catenin、P53的表达与胃癌临床病理特征及预后的关系，为探索新的胃癌预后指标提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年1月-2021年1月本院收治的134例胃癌患者的组织标本进行研究，设为病例组，并选取同期120例本院行健康体检胃活检组织标本设为对照组。参照文献[6]《胃癌诊疗规范》的诊断：伴有腹痛、腹胀等症状；呕吐物为宿食；经电子胃镜检查与活检确诊。病例组纳入标准：（1）符合上述诊断标准；（2）预计生存期≥3个月；（3）肿瘤未累及临近脏器；（4）均接受胃癌根治术。排除标准：（1）合并其他脏器功能受损；（2）合并先天免疫性疾病；（3）沟通障碍；（4）血流动力学不稳定；（5）哺乳期妇女；（6）近1个月使用糖皮质激素；（7）依从性较差；（8）合并凝血功能障碍或血液系统疾病。病例组男70例，女64例；年龄29～73岁，平均（52.61±7.47）岁；贲门43例，胃体49例，胃窦42例；有淋巴结转移49例，未转移85例；根据预后情况分为死亡组35例，存活组99例。对照组男69例，女51例；年龄25～70岁，平均（52.39±7.13）岁。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。研究已获得医院伦理会批准实施，入组人员均知情同意。

1.2 方法

所有组织标本经10%中性福尔马林固定，全自动脱水机前处理，包埋切片，切片厚度3 μm，65 ℃烤片60 min。经充分烤片后的片子按照检测试剂盒的要求，在Benchmark ULTRA全自动免疫组化仪进行相关抗原（CDX-2、β-catenin、P53）的检测，运行结束后清洗玻片，中性树胶封片，显微镜下观察。UltraView universal DAB Detection Kit检测试剂盒，购自罗氏公司；CDX-2（克隆号：EPR2764Y）、β-catenin（克隆号：MX043）、P53（克隆号：MX008）单克隆抗体，购自福州迈新公司。

1.3 观察指标及评价标准

（1）比较两组CDX-2、β-catenin、P53表达情况。（2）分析CDX-2、β-catenin、P53表达与胃癌临床病理的关系。免疫组织化学染色结果判断：细胞质或细胞核存在棕黄色颗粒即定义为阳性细胞。在光镜下观察，将每一张切片中棕黄色阳性细胞数＞10%定义为表达阳性，阳性细胞数≤10%定义表达阴性。（3）比较死亡组和存活组CDX-2、β-catenin、P53表达情况。（4）进行CDX-2、β-catenin、P53与胃癌临床病理和预后的相关性分析。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 24.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CDX-2、β-catenin、P53表达情况比较

病例组CDX-2的阳性表达率为52.24%（70/134），高于对照组的18.33%（22/120）；β-catenin的阳性表达率为62.69%（84/134），高于对照组患者的9.17%（11/120）；P53的阳性表达率为73.88%（99/134），高于对照组患者的25.83%（31/120），差异均有统计学意义（P＜0.01），见表1。

表1 两组CDX-2、β-catenin、P53表达情况比较[例（%）]

2.2 CDX-2、β-catenin、P53表达与胃癌临床病理的关系

不同性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤部位、组织分化程度患者的CDX-2、β-catenin、P53阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；有侵犯浆膜、有淋巴结转移、Lauren分型为小肠型患者的CDX-2、β-catenin、P53阳性表达率均高于无侵犯浆膜、无淋巴结转移、Lauren分型弥漫型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 CDX-2、β-catenin、P53表达与胃癌临床病理的关系

表2（续）

2.3 死亡组和存活组CDX-2、β-catenin、P53表达情况比较

死亡组CDX-2、β-catenin、P53阳性表达率分别为91.43%、85.71%、94.29%，均高于存活组的38.38%、54.55%、66.67%，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表 3。

表3 死亡组和存活组CDX-2、β-catenin、P53表达情况比较[例（%）]

2.4 CDX-2、β-catenin、P53与胃癌临床病理和预后的相关性分析

相关性分析显示，CDX-2、β-catenin、P53与胃癌患者侵犯浆膜、淋巴结转移、Lauren分型及预后均呈正相关，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 CDX-2、β-catenin、P53与胃癌临床病理和预后的相关性分析

3 讨论

胃癌起源于胃黏膜上皮，位居上消化道恶性肿瘤的首位，发病率高，主要与饮食习惯、幽门螺杆菌感染、遗传等有关。目前临床治疗胃癌的主要手段为手术、放化疗等，但由于胃癌早期症状不明显，多数患者确诊时已是中晚期，且胃癌易向周围组织、淋巴结等转移，病情进展迅速，导致治疗效果不理想，影响患者预后[7]。有研究显示，侵袭和转移被认为是胃癌致死的主要原因，而肿瘤转移是一个多因素、多阶段发展过程，涉及多种分子的改变[8]。因此，寻找能准确预测胃癌预后的生物标志物对改善患者预后具有重要意义。

CDX-2为同源异型盒基因家族的重要成员，可调节肠上皮细胞分化增殖，表达于正常肠黏膜上皮细胞，能维持肠黏膜的正常发育，在肠癌中发挥抑癌细胞的作用，有研究显示，CDX-2在结肠癌中表达上调，且可随细胞分化程度降低、肿瘤直径增大而增强[9]。本研究结果显示，病例组CDX-2的阳性表达率为52.24%（70/134），高于对照组18.33%（22/120），差异有统计学意义（P＜0.05）。有侵犯浆膜、有淋巴结转移、Lauren分型为小肠型患者的CDX-2阳性表达率均高于无侵犯浆膜、无淋巴结转移、Lauren分型弥漫型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。死亡组CDX-2阳性表达率均高于存活组，差异有统计学意义（P＜0.05）。CDX-2与胃癌患者侵犯浆膜、淋巴结转移、Lauren分型及预后之间均呈正相关（P＜0.05）。结果表明，CDX-2在胃癌患者中表达较高，分析其原因可能是因为CDX-2过度表达能诱导了胃黏膜肠上皮化生的发生，从而调节肿瘤细胞增殖分化。

β-catenin是一种多功能蛋白，能维持机体正常生理平衡，在正常情况下，β-catenin蛋白存在于正常细胞的胞膜，基因突变后导致细胞核内堆积，被认为是原癌基因，可导致癌性突变。有研究显示，β-catenin参与胃癌的发生，参与胃癌细胞周期调控，促进细胞增殖[10]。本研究结果显示，病例组β-catenin的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。有侵犯浆膜、有淋巴结转移、Lauren分型为小肠型患者的β-catenin阳性表达率均高于无侵犯浆膜、无淋巴结转移、Lauren分型弥漫型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。死亡组β-catenin阳性表达率高于存活组，差异有统计学意义（P＜0.05）。进一步相关分析β-catenin与胃癌患者侵犯浆膜、淋巴结转移、Lauren分型及预后呈正相关（P＜0.05）。结果表明，β-catenin在胃癌中呈高表达，与胃癌侵袭转移及预后有关。

P53属于细胞调控基因，在细胞受到损伤时，P53可诱导细胞周期阻滞，使细胞在新的周期得到修复，从而抑制肿瘤的发生[11]。近年来被发现在多种癌症肿瘤组织中呈高表达，广泛参与细胞凋亡、分化和增殖等病理生理过程[12-13]。本研究结果显示，胃癌患者P53的阳性表达率为73.88%（99/134），高于对照组患者的25.83%（31/120），差异有统计学意义（P＜0.05）。有侵犯浆膜、有淋巴结转移、Lauren分型为小肠型患者的P53阳性表达率均高于无侵犯浆膜、无淋巴结转移、Lauren分型弥漫型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结果表明，P53在胃黏膜癌变过程中表达上调，分析其原因可能是因为胃癌的发生可使P53蛋白基因发生突变，通过加强细胞转化从而加快恶化，从而参与胃癌的发生与发展。本研究结果还显示，死亡组P53阳性表达率均高于存活组，且P53与胃癌患者侵犯浆膜、淋巴结转移、Lauren分型及预后之间均呈正相关，说明P53表达与胃癌预后有密切关系[14-15]。

综上所述，胃癌组织中CDX-2、β-catenin、P53阳性表达率升高，可能协同参与了胃癌的发生、发展，可作为评估胃癌患者预后的参考指标，CDX-2、β-catenin、P53可成为新的胃癌治疗靶点。