Galectin-3与宫颈组织癌变关系的Meta分析

沐超，胡新荣

广东医科大学肿瘤研究所，广东 东莞 523000

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤，高发病率和死亡率严重威胁着世界妇女的健康，其主要危险原因是高危型人乳头瘤病毒HPV-16 和HPV-18 的感染。半乳糖凝集素-3(Galectin-3)是β-半乳糖苷凝集素家族中的嵌合型[1]，主要定位在细胞质，能够通过与相应配体结合而参与细胞的生长、黏附、新生血管的形成以及凋亡等过程，而在肿瘤中，Galectin-3的表达与肿瘤的发生、侵袭、转移密切相关[2-3]。

目前，已有多项研究报道了Galectin-3 在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达情况，但是尚未见其在宫颈组织病变中表达差异的系统评价。本文通过检索和筛选相关文献，系统评价了宫颈组织癌变过程中Galectin-3的表达情况，从而进一步阐明Galectin-3与正常宫颈组织向宫颈癌发展之间的关系，为辅助评估宫颈癌的预后提供相关分子标志。

1 资料与方法

1.1 检索策略 分别检索CBMdisc、CNKI、万方、维普、PubMed、Web of Science、Medline 七个数据库，检索时间从建库至2020年7月。同时手工检索补充文献。中文检索词包括：半乳糖凝集素-3、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌。英文检索词包括：Galectin-3、Cervical Intraepithelial Neoplasias、Cervical Cancer。

1.2 纳入和排除标准

1.2.1 纳入标准 研究类型为病例-对照研究。检测Galectin-3表达的方法为免疫组化法。研究对象符合以下条件：(1)所有病例均由病理诊断明确，既往无恶性肿瘤病史；(2)全部受试者取材前均未经放疗、化疗或生物治疗；(3)全部受试者不区分民族、种族和国籍等。

1.2.2 排除标准 (1)文种非中、英文；(2)重复的文献；(3)无相应对照组的文献；(4)综述、动物研究及会议摘要等。

1.3 文献筛选与资料提取 由两位研究人员按照纳入和排除标准，独立进行文献的筛选和资料的提取，有异议的地方通过协商或由第三方裁定。提取的资料包括以下信息：作者、发表时间、纳入病例年龄范围、研究总例数以及Galectin-3表达阳性例数等。

1.4 统计学方法 使用Stata12.0软件对纳入的研究进行Meta 分析。通过查找相关资料，选定比值比(odds ratio，OR)作为合并统计量，95%为其可信区间(95%CI)。首先，对纳入的研究进行异质性检验(检验水准为α=0.05)，采用森林图和I2统计量来判断研究间是否存在异质性。根据《Cochrane系统评价手册》(以下简称“手册”)：I2＞50%即可认为研究间存在异质性。经异质性检验，若各独立研究的结果同质，则选用固定效应模型计算OR值；若各独立研究的结果异质，先绘制Begg漏斗图，并进行不对称检验，从而识别是否存在发表偏倚。如果存在发表偏倚，则对偏倚的来源加以控制；如果不存在，则进一步使用敏感性分析和亚组分析，使研究达到同质后，再使用固定效应模型计算OR值。若假如经过异质性分析以及处理后，研究之间仍不具有同质性，则选用随机效应模型，并分析异质性的来源。

2 结果

2.1 文献检索结果 通过计算机检索，初步获得168篇文献，其中CBMdisc 22篇、CNKI 48篇、万方28篇、维普28 篇、Pubmed 17 篇、Web of science 5 篇、Medline 20篇，另外补充文献0篇。去除重复文献90篇，经阅读题目和摘要后初步筛除不相关的文献54篇，然后严格按照纳入和排除标准，再次阅读全文复筛。最终，纳入17篇[4-20]文献，共2 262例受试者，包括正常宫颈组织293例、CIN 802例，宫颈癌1 167例。

2.2 纳入研究的基本特征与质量评价 其中15份研究报道了正常宫颈组织Galectin-3 的表达情况；17 份研究中报道了CIN Galectin-3 的表达情况；16 份研究报道了宫颈癌Galectin-3的表达情况。纳入研究的基本特征和质量评价如下(见表1和表2)。

表1 纳入研究的基本特征

2.3 异质性检验

2.3.1 宫颈癌组与正常宫颈组 共14 份研究报道了宫颈癌组(1 018 例)与正常宫颈组(273 例)中Galectin-3 的表达情况。森林图显示：I2=84.5%，P=0.000，提示各项研究间存在异质性，可采用随机效应模型分析，得OR=7.31，95%CI(2.71，19.71)，P=0.000。结果表明：在宫颈癌与正常宫颈组之间，Galectin-3 的表达可能存在差异。

2.3.2 宫颈癌组与CIN 组 共16 份研究报道了宫颈癌组(1167 例)与CIN 组(742 例)中Galectin-3的表达情况。森林图显示：I2=79.4%，P=0.000，提示各项研究间存在异质性，可采用随机效应模型，得OR=3.30，95%CI (2.02，5.39)，P=0.000。结果表明：在宫颈癌组与CIN 组之间，Galectin-3 的表达可能存在差异。

2.3.3 CIN 组与正常宫颈组 共15 份研究报道了CIN 组(747 例)与正常宫颈组(293 例)中Galectin-3表达的情况。森林图显示：I2=78.7%，P=0.000，提示各项研究间存在异质性，同样采用随机效应模型，得OR=2.42，95%CI(1.04，5.61)，P=0.039。结果表明：Galectin-3 在宫颈癌组与正常宫颈组之间的表达可能存在差异。

2.3.4 绘制漏斗图与发表偏倚的检测 对宫颈癌组、CIN 组、正常宫颈组两两进行对比，分别绘制Begg 漏斗图(图1A～1C)，并通过秩相关检验可知：宫颈癌组与正常宫颈组的Pr＞0.956，宫颈癌组与CIN组的Pr＞0.224，CIN 组与正常宫颈组的Pr＞0.428。结果提示：三个比较组均无明显发表偏倚。

2.4 敏感性分析 对宫颈癌组、CIN 组、正常宫颈组两两比较，并进行敏感性分析(图2)，结果提示：聂磊[6]和刘嵘等[13]两项研究对宫颈癌组与正常宫颈组的合并效应量影响较大；刘嵘等[13]的研究对宫颈癌组与CIN组的合并效应量影响较大；聂磊[6]的研究对CIN组与正常宫颈组的合并效应量影响较大。

2.5 亚组分析 将敏感性分析中所涉及的对合并效应量影响较大的两项研究进行了剔除，随后按照以下亚组对宫颈癌组与正常宫颈组、宫颈癌组与CIN组、CIN组与正常宫颈组再次进行分析，进一步探索异质性的主要来源。

2.5.1 亚组Ⅰ 根据研究选取的宫颈癌组织学类型分为：有鳞癌、腺癌等多种类型(a)与只有鳞癌一种类型(b)两个亚组。森林图显示：在宫颈癌组与正常宫颈组(图3)中，I2=33.5%，P=0.122，根据“手册”可知研究间同质，符合固定效应模型；OR=13.54，95%CI(9.14，20.06)，P=0.000。总体表明：宫颈癌组Galectin-3 的表达高于正常宫颈组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，并且各研究中选取的宫颈癌组织学类型的差异是宫颈癌组与正常宫颈组异质性的主要来源。

2.5.2 亚组Ⅱ 根据研究者有无提供具体CIN级别及相应Galectin-3 表达阳性例数分为：没有提供者(a)和有提供者(b)两个亚组。森林图显示：在宫颈癌组与CIN组(图4)中，I2=61.1%，P=0.001，提示研究间异质性较前降低，采取随机效应模型；OR=3.86，95%CI(2.65，5.61)，P=0.000。而在CIN组与正常宫颈组(图5)中，I2=65.9%，P=0.000，提示研究间异质性也较前降低，采取随机效应模型；OR=3.06，95%CI(1.50，6.22)，P=0.002。尽管结果表明研究者有无提供具体CIN 级别及相应Galectin-3 表达阳性例数是宫颈癌组与CIN组、CIN组与正常宫颈组异质性的主要来源，但由于研究间仍存在较高的异质性，对于Galectin-3的表达，仅得知：宫颈癌组可能高于CIN组，CIN组可能高于正常宫颈组。

图4 宫颈癌组(CC)与CIN组

图5 CIN组与正常宫颈组(NC)

3 讨论

宫颈组织的癌变大多出现在子宫颈鳞状上皮和柱状上皮的交界处，小部分来自宫颈内膜化生的鳞状上皮，其最常见的肿瘤组织学类型是鳞癌和腺癌。尽管目前接种HPV疫苗可以有效地预防宫颈癌，但是由于疫苗供量少和接种成本高，使得接种的普遍率不尽人意，并且宫颈癌的发病年龄正呈年轻化趋势[21]。因此，深入探究宫颈癌相关分子对宫颈癌的筛查、诊断、治疗和预后都有重大的意义。Galectin-3是肿瘤相关性蛋白，与肿瘤细胞黏附转移、血管生成、抗凋亡、免疫耐受等有关[22]。并且许多研究发现，Galectin-3与宫颈癌关系密切，故其可以作为评估宫颈癌预后的分子标志。

此次系统评价显示：对于纳入的17 项研究，宫颈癌组与正常宫颈组、宫颈癌组与CIN组、CIN组与正常宫颈组均出现了较高的异质性，但是不存在明显的发表偏倚。通过敏感性分析发现聂磊[6]和刘嵘等[13]两项研究对合并效应量有较大的影响，原因可能与聂磊偏向选择高载量HPV的感染病例，以及刘嵘使用精确度高的图像分析系统放大了正常宫颈组织Galectin-3阳性表达率有关。在将这两项研究剔除并进一步行亚组分析后发现，各研究选取的宫颈癌组织学类型的差异是宫颈癌组与正常宫颈组异质性的主要来源，说明Galectin-3在宫颈鳞癌和非鳞癌之间可能存在表达差异；而宫颈癌组与CIN组、CIN组与正常宫颈组异质性的主要来源是研究者有无提供具体CIN 级别及相应Galectin-3 表达阳性例数。最终结果显示：与正常宫颈组相比，宫颈癌组Galectin-3的表达上调，这与多数学者[4，5，9-12，14-18，20]报道的结果相一致，提示Galectin-3与正常宫颈组织癌变关系密切。然而也有学者报道，在宫颈癌中Galectin-3的表达是降低的。例如，LEE等[23]报道了Galectin-3 在宫颈癌组织中的表达下调，并表明其表达降低与宫颈肿瘤的进展相关，原因可能是Galectin-3在各种类型的细胞中具有不同的功能。此次分析的结果在较大数据层面上支持了Galectin-3在宫颈癌中的表达高于正常宫颈组织，差异具有统计学意义，并且宫颈癌与CIN之间、CIN与正常宫颈组织之间Galectin-3 表达也存在差异，但考虑到研究间仍存在部分异质性，因此不能做出明确结论。

综上所述，Galectin-3 表达上调会促进正常宫颈组织向宫颈癌的发展，检测Galectin-3 的表达有助于宫颈癌的预后评估。

此次分析不排除有一定的局限性：①在公开发表的文献中，以中文文献占主要部分，国外研究偏少；②各个研究中组织标本的处理方法、免疫组化阳性结果判断的主观性等可能会对研究的一致性产生影响。