2型糖尿病患者馒头餐前后血清人神经肽水平的变化

伍文耀，何清香，陈秋芳，李德海

（1.阳江中医医院，广东阳江 529500； 2.暨南大学生物医学转化研究院）

人神经肽（Spexin）是一种全新的高度保守的可分泌性多肽，在人体各组织均广泛表达[1-4]，尤其在内分泌组织如胰岛、肾上腺、内脏脂肪、甲状腺等表达均高于肌肉和结缔组织[3]。Spexin具有多种生物学功能，研究发现Spexin可抑制摄食行为、调节血糖稳态、促进能量代谢及胃肠运动，同时还参与心血管及肾脏功能等调节[2,5-7]。糖尿病往往合并脂代谢的异常，Spexin与体重调控有一定的相关性, 肥胖人群Spexin基因表达明显减少[2]。也有文献报道2型糖尿病患者血清Spexin水平要低于正常人群[8]。然而，糖尿病患者血糖水平波动与Spexin水平的关系国内尚未见报道。本研究检测40例初发2型糖尿病患者馒头餐试验前后血清Spexin水平的变化，并分析其与血糖波动，及血脂、糖化血红蛋白、BMI、年龄，尿酸的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2017年8月至2018年3月内四区收治的40例初次诊断2型糖尿病患者。诊断标准参考2013年CDS指南推荐的诊断标准[9]确诊为糖尿病（type 2 diabetes，T2D）初发患者。排除标准：严重的心、脑血管疾病和肝、肾功能能损害患者，高血压，感染，酮症酸中毒，妊娠、哺乳期妇女，自身免疫性疾病患者，以及正在服用糖皮质激素类药物者。研究获阳江市中医医院伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

研究对象受试前登记基本资料，计算BMI，空腹10h于入院第二天进行采血检测生化指标，包括空腹血糖，尿酸，总胆固醇，甘油三酯，高密度脂蛋白胆固醇，低密度脂蛋白胆固醇，糖化血红蛋白。同时留取静脉血2ml，然后进食以100g标准面粉制作的馒头，再分别于进食后60min、120min及180min取静脉血2ml，分离血清-80°C保存，待样品收集完成后，放干冰寄往暨南大学生命科学转化研究院进行Spexin水平检测。Spexin采用Elabscience公司的Elisa试剂盒（货号E-EL-H5607c）进行检测，具体方法参照说明书进行。

1.3 统计学处理

所有研究数据均应用SPSS 20.0统计软件进行分析和处理。正态分布的计量资料以均数±标准差表示，非正态分布计量资料于中位数（四分位数）表示。采用Spearsman行相关性分析。多元线性回归分析筛选对Spexin有影响作用的指标，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料和生化指标与空腹血清Spexin的相关性分析

40例患者均记录年龄、BMI、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、HOMA-IR。相关分析结果显示，空腹血清Spexin水平与空腹血糖、糖化血红蛋白、BMI、低密度脂蛋白胆固醇、尿酸及HOMA-IR均呈负相关，结果均为P＜0.05，见表1：

表1 一般资料和生化指标与空腹血清Spexin的相关性分析

与年龄、血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及甘油三酯均不相关，P值均＞0.05。将血清Spexin水平进行自然对数转换正态分布后，多元线性分析结果显示，BMI、糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇及HOMA-IR与Spexin独立相关，对Spexin有影响作用，见表2：

表2 对空腹血清Spexin有影响作用的指标

2.2 馒头餐试验后血清Spexin水平的变化及与血糖变化情况的相关性分析

40例患者均进行标准馒头餐实验，进食馒头后患者血糖升高明显，并随着实验时间延长逐渐恢复，到180min接近空腹状态。血清Spexin浓度在患者进食馒头后逐渐下降，60min时水平最低，后逐渐恢复，馒头餐后180min血清Spexin浓度与空腹状态相似，两者间差别无统计学意义，且血清Spexin浓度与血糖水平呈负相关，见表3：

表3 馒头餐试验后血清Spexin水平的变化及与血糖变化情况的相关性分析

3 讨论

Spexin最早在小鼠中被发现，随后被证实其蛋白质结构具有高度的保守性，在动物体内承担重要的调节作用且广泛表达于多种组织[1]。研究发现肥胖患者体内Spexin mRNA表达较正常对照组显著下调，Spexin可以降低脂肪细胞对长链脂肪酸的摄取，继而减轻体重[2]。瘦素是一种由成熟脂肪组织合成分泌的蛋白，主要通过中枢和外周两条途径抑制脂肪合成、增加能量消耗，减轻体重[10]。肥胖人群由于血清中存在瘦素抵抗，血清瘦素水平明显高于正常人群，然而，肥胖患者血清中Spexin的平均浓度仅为正常人血清Speixn含量的10%。因此，人血清中循环Spexin和瘦素间呈现高度显著的、非线性的负相关[2]，提示Spexin可能是一种参与能量代谢的肥胖相关因子。而本研究结果也表明，在初次诊断的T2D患者中，血清Spexin水平与患者的BMI呈负相关，且BMI与Spexin独立相关，与既往的研究结果一致。Kolodziejski等[11]发现，女性肥胖人群Spexin水平较非肥胖人群更低，且Spexin水平与HOMA-IR呈负相关，本研究结果同样提示，初次诊断T2D的患者血清Spexin水平与HOMA-IR呈负相关，且为独立相关，与既往研究结果一致。

顾丽萍等[8]发现T2D患者血清Spexin水平明显低于对照组，且与甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关，与空腹血糖及糖化血红蛋白独立相关。而本研究结果显示，血清Spexin水平与空腹血糖、糖化血红蛋白、HOMA-IR、BMI、低密度脂蛋白胆固醇及尿酸呈负相关，其中与糖化血红蛋白、BMI、低密度脂蛋白胆固醇及HOMA-IR独立相关，研究结果与既往报道存在个别指标的差异，可能与本项目研究样本量相对较少有关。但这些结果均提示Spexin作为一种分泌性多肽，可能参与了T2D患者的糖脂代谢通路。

动物实验提示Spexin与肥胖、胰岛素抵抗及T2D相关。在肥胖T2D小鼠中，使用Spexin治疗不仅可降低小鼠体重，同时还可改善小鼠的糖耐量异常及胰岛素抵抗，并降低糖化血红蛋白[5]。Spexin是GALR2和GLAR3的自然配体[12]，腹腔内注射GALR2激动剂M1145可抑制肥胖小鼠胰岛素的释放；注射M1145后的肥胖小鼠葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验可显著降低血糖水平和HOMAIR[13]。GLUT4是肌肉及脂肪细胞主要的葡萄糖转运载体，而p38MAPK和PGC-1是与GLUT4表达相关的信号蛋白[14]。腹腔注射M1145能促进p38MAPK和PGC-1表达，从而促进GLUT4表达及增加葡萄糖吸收[15]。Gu[3]等发现，75g OGTT试验后正常受试者血清Spexin水平逐渐下降，30min、60min及90min浓度水平均低于试验前，且在90min降至最低，随后开始恢复，至180min恢复至空腹水平，且Spexin水平与受试者血糖水平呈负相关。本研究入选的均为初次诊断的T2D患者，应用标准馒头餐进行患者胰岛功能评估，结果与国外文献类似。T2D患者血清Spexin水平在进食馒头后开始逐渐下降，同时伴随血糖的升高，Spexin水平60min降至最低值，120min稍有回升，至180min恢复至与馒头前水平相似；整个试验过程中，Spexin水平与血糖水平呈负相关。这些研究结果提示，血清Spexin在T2D的糖代谢通路中可能存在不容小觑的作用，更有待进一步的实验去验证。

Spexin是一种潜在的、自然的多肽，有关Spexin的基础及临床研究才刚刚开始，仍然存在许多问题有待解决，但是，综合既往的研究和本研究的结果，Spexin或可作为一种潜在的参与体重以及血糖调节的新型肽类激素药物治疗肥胖及糖尿病，有待进一步实验验证，为肥胖与糖尿病的治疗提供新的思路。