食道癌患者血清CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平联合检测的诊断价值及与T淋巴细胞亚群表达的相关性研究

郑 荣，何三军，朱宏才，冯仕川

(汉中市中心医院a.检验科；b.肿瘤内科；c.全科医学科,陕西汉中 723000)

食道癌(esophageal cancer,EC)是由食道上皮黏膜细胞病变导致的恶性肿瘤，EC 约占全部恶性肿瘤的2%，患者以中老年群体为主，临床主要表现为进行性吞咽困难和咽下疼痛等[1-2]。我国是EC的高发地区之一，每年约有15 万人死于EC[3]。目前，EC 仍以手术治疗为主，但由于传统的手术治疗会对患者产生较大的身体创伤和心理恐惧，再加上疾病本身和副作用等的影响常致使整体治疗效果和预后欠佳[4]。早发现、早治疗是降低EC 发病率和病死率的有效手段，肿瘤标志物(tumor marker,TM)在EC 早期诊断、治疗监测、预后评估等环节发挥重要作用。本研究拟探讨细胞角蛋白19 片段(cytokeratin-19-fragment,CYFRA21-1)、糖类抗原19-9(carbohydrate antigen19-9,CA19-9)、β- 人 绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-hCG)联合检测在EC 中的诊断价值及其对患者T淋巴细胞亚群水平的影响，以期为EC患者的临床诊疗和预后提供合理参考，现具体报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2018年1月～2020年1月我院收治的110例EC患者为EC组，其中男性56例，女性54例；年龄31～73岁，平均年龄为51.63±7.54岁。按照EC 病灶部位分为：胸上段42例，胸中段27例，胸下段41例。按照EC 病理分期分为鳞癌49例和腺癌61例。另选取我院同期80例健康志愿者为正常组，其中男、女性各40例；年龄33～71岁，平均年龄51.59±7.48岁。本试验经我院伦理委员会审批通过，受试者自愿参加且均签署知情同意书。

纳入标准：① EC组患者均经消化道内镜和CT等检查确诊为EC者；② 临床资料完整者；③ 未见肿大融合的纵膈淋巴结者；④EC组患者均接受食管癌根治术+食管胃吻合术，未发现远处转移病灶。排除标准：①并发肝、肾脏及心脏器官功能障碍者；②并发严重肺功能障碍者；③有心理障碍和精神异常者；④不配合本试验和中途退出者。

1.2 仪器与试剂 CYFRA21-1 放射免疫分析 (radioimmunoassay,RIA)试剂盒和CA19-9 与β-hCG酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒均购自北京市福瑞生物工程公司。Allegra X-15R 台式冷冻离心机购自美国贝克曼库尔特有限公司。

1.3 方法 样本采集：入院第二日清晨，分别采集两组空腹静脉血3 ml，3 000 r/min 离心5 min 后取上层血清，于-70℃保存待测。采用RIA法检测CYFRA21-1含量。采用ELISA 检测CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+的水平。具体操作严格按照说明书进行。

1.4 统计学分析 采用SPSS19.0 统计学软件分析和处理数据，计量资料以均值±标准差(±s)表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，采用Spearman相关分析探究相关性，以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比较 见表1。EC组患者血清中CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG 的含量显著高于正常组，其差异具有统计学意义(均P＜0.05)。EC组患者T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+和CD8+的水平显著低于正常组，其差异均具有统计学意义(均P＜0.05)。

表1 两组患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比较（±s）

表1 两组患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比较（±s）

检测指标 EC组（n=110） 正常组（n=80） t P CYFRA21-1 (ng/ml) 38.21±19.81 1.91±0.13 13.283 0.000 CA19-9 (U/ml) 76.63±47.32 27.45±4.33 1.271 0.032 β-hCG (U/ml) 62.37±21.46 21.38±4.46 11.261 0.000 CD3+ (%) 51.13±5.38 68.73±6.01 7.520 0.014 CD4+ (%) 29.68±4.60 43.83±4.96 4.118 0.029 CD8+ (%) 28.95±3.17 46.93±5.04 4.128 0.024

2.2 CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG联合检测在EC 诊断中的价值 CYFRA21-1 诊断EC 的灵敏度和特异度分别为35.50%和81.50%，约登指数0.174 5；CA19-9 诊断EC 的灵敏度和特异度分别为32.50%和83.25%，约登指数0.265 8；β-hCG 诊断EC 的灵敏度和特异度分别为59.75%和61.25%，约登指数0.241 7；CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG 联合检测在EC 诊断中灵敏度和特异度分别为72.00%和83.50%，约登指数0.241 2，高于单一的检测指标。

2.3 T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+水平与CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG 的相关性分析 采用Spearman 相关分析探究CD3+，CD4+，CD8+水平与CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG 的相关性，结果显示CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG与T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+水平呈负相关(r=-0.432，P＜0.05；r=-0.461，P＜0.05；r=-0.408，P＜0.05)。

3 讨论

EC 是我国常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率分别居我国恶性肿瘤的第5位和第4位[5]，目前认为EC 是多因素作用、多基因参与、多阶段发展的疾病，但是其发生、发展的确切机制仍不清楚[6]。大量的流行病学数据显示，化学物质(如亚硝胺、酒精、毒品等)、营养缺乏、物理因素(如进食粗糙和过热食物)、生物因素均与EC 的发病密切相关。TM 在EC 早期诊断、治疗监测、预后评估等环节发挥重要作用。

CYFRA21-1广泛存在于肺癌、EC等单或浮层上皮肿瘤细胞的胞质中，尤其对中晚期EC，CYFRA21-1 是一个重要的肿瘤标志物（tumormarkers，TM）。CA19-9 主要分布在正常胎儿胰腺、胆囊和正常成年人胰腺、胆管上皮等处，有研究报道指出其是消化道恶性肿瘤较好的检测指标，血清浓度与EC 的发展阶段相关[7]。李道明等[8]使用免疫组织化学法(immunohistochemical method,IHC)检测EC患者癌组织中β-hCG 的表达，结果显示β-hCG 呈高表达，提示β-hCG 可能与EC 的发生、发展有关。本研究中涉及的三个TM 都与EC 的诊断、发展及预后有密切关系，单一指标并不能明确EC 的诊断，另外EC 发病来源复杂、病因与发病机制不明确，因此需要多种TM 联合检测以提高诊断水平。本研究结果指出EC组患者血清中CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG 的含量均显著高于正常组，三者联合检测在EC 诊断中的灵敏度和特异度高于单一TM 检测。说明三个指标在诊断EC 上均有一定价值，而联合检测可提高EC 诊断准确率，有很好的敏感度。

本研究结果显示，EC组患者T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+和CD8+的水平显著低于正常组，其主要是由于手术创伤、术中麻醉类药物的使用、脏器长时间的暴露等因素，再加之患者术后的禁食禁水会导致患者营养水平和免疫功能的失调[9-12]，因此提高患者的免疫功能有助于EC患者病情的恢复和改善预后。Spearman 相关分析结果显示CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG与T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+水平呈负相关，即有效降低CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平，使免疫功能得以调节。

综上所述，CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG联合检测可提高EC 诊断的灵敏度和特异度，降低CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平可提高T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+水平，改善EC患者的免疫功能，有助于患者病情的恢复。