四川德阳地区丙型肝炎病毒基因型分布特征

陈学兵 欧世梅 刘建英 刘舒舒 王秀

丙型肝炎病毒(HCV)感染是慢性肝病的重要病因之一，全球感染人数超过7 000万。HCV基因具有较强的变异性，根据变异位点的不同将HCV分为1～8个基因型。基因型有较明显的地域分布特点，大部分地区以1b型为主[1]。德阳地区位于四川省的中部，目前对于该地区的丙型肝炎病毒基因型分布情况及特点未见报道，本研究通过对HCV基因型进行分析，了解德阳地区HCV基因型分布情况，为制定相应的防治策略提供依据。

资料与方法

一、研究对象

2013年1月到2019年7月在德阳市人民医院门诊及住院的慢性丙型肝炎且满足HCV-RNA≥1 104 IU/mL的患者821例，其中男性390例(47.50%)，女性431例(52.50%)。年龄18～91岁，中位年龄51岁，平均年龄(51.56±11.78)岁。

二、诊断标准

诊断依据符合2015年《丙型肝炎防治指南》诊断标准：HCV感染超过6个月，或有6个月以前的流行病学史；抗-HCV及HCV RNA阳性，肝脏组织病理学检查符合慢性肝炎；或根据症状、体征、实验室及影像学检查结果综合分析，亦可诊断[2]。

三、研究方法

(一)标本采集 采集患者空腹静脉血3 mL，分离血清标本，放置于灭菌处理后的EP管中，-20 ℃冰箱冻存，1周之内完成检测，同时检测HCV RNA及丙型肝炎病毒基因型。

(二)检测方法 血清HCV RNA采用RT-PCR荧光探针扩增技术进行检测，试剂盒购自凯杰生物(深圳)有限公司，定量检测范围为1 103～5 107 IU/mL。HCV基因分型采用RT-PCR荧光探针扩增技术进行检测，试剂盒购自厦门泰普生物科学(中国)有限公司，检测包括5种基因型及其亚型，分别为1b、2a、3a、3b、6a，检测要求患者血清HCV RNA定量≥1 104 IU/mL。两项检测均采用罗氏LightCycler480 II实时荧光定量PCR仪，整个检测过程均严格按照说明书进行操作。

四、统计学分析

结 果

一、德阳地区丙型肝炎病毒基因型分布情况

821例患者中，共检测出7种基因型，分别为1b、2a、3a、3b、6a、1b/3b和2a/3b，其中1b型最多，占到全部基因型的92.08%，两种混合型分别各为1例。本研究中还有14例未能获得基因分型(其HCV-RNA载量在1.581 04拷贝数/mL～>5 107拷贝数/mL)。在男性和女性患者中，基因1b型占比分别为91.28%和92.81%，两组在各基因型之间的构成比均无统计学差异(P>0.05)，见表1。

二、年龄>40岁和≤40岁患者丙型肝炎病毒基因型的分布情况

年龄≤40岁的患者中，基因1b型的占比明显小于年龄>40岁的患者(65.52% vs 95.23%)，而基因3a、3b和6a型的比例明显高于年龄>40岁的患者，分别为3.45% vs 0.54%、13.79% vs 0.82%和12.64% vs 0.27%，差异均有统计学意义(P<0.05)。年龄≤40岁的患者中没有2a基因型。两组患者中，男女构成没有统计学差异(P>0.05)，见表2。

三、不同年份丙型肝炎病毒基因型的分布情况

2013年至2018年间，丙型肝炎病毒基因1b型基本维持在90%左右，而到了2019年，基因1b型较以往有明显的升高，达到了97.83%，差异有统计学意义(P<0.05)。其他各个基因型由于数量少，占比低，未进一步进行分析，见表3。

讨 论

HCV有8个基因型和数十种亚型，基因1型病毒株流行最广，其次为3型、2型、4型及其他。我国的丙型肝炎病毒基因型分布有一定的区域性差异，就最常见的基因1b型来说，西南、西北、东北、华东、华南、华北和华中地区分别为33%、58%、44%、64%、50%、71%和56%，华北地区最高，而西南地区最低，且西南地区的基因型呈多样化分布趋势，2a型、3a型、3b型和6a型分别为10%、13%、23%和13%[3]。Chen等[1]研究显示，西南地区虽以1b型居多，但云南和重庆两地却以基因3型为主；而贵州和四川HCV基因1b型分别为44.38%和65.49%，分布也有明显差异。肖桂荣等[4]对四川大学华西医院1 998例丙型病毒性肝炎患者进行的研究显示，基因1b型为最主要的基因型，占全部基因型的68.47%，其次为3a型和3b型，分别为14.56%和7.71%。本研究中，HCV 基因1b型为92.08%，远远高于国内现有报道的基因1b型的比例，而3a型和3b型分别仅为0.85%和2.19%，远远低于全国平均4.8%和5.9%的比例[3]。男女性之间各基因型的感染率无确切的差异性。

表1 丙性肝炎病毒基因型分布及男女性患者基因型分布情况

表2 年龄≤40岁和>40岁患者丙型肝炎病毒基因型分布情况

表3 不同年份丙型肝炎病毒基因型的分布情况(n，%)

HCV基因型也是影响抗病毒疗效的主要因素[5-6]。在直接抗病毒药物上市以前，干扰素联合利巴韦林作为慢性丙型肝炎治疗的标准方案，不同的基因型其疗效亦有差异[7-10]。直接抗病毒药物上市以后，因其疗效好,安全性佳，逐渐成为治疗HCV感染的一线药物，但HCV基因型仍是影响疗效的因素之一。目前上市的药物中，除了泛基因型的药物以外，其他绝大多数药物都能覆盖基因1b型，而对于基因2型、3型和6型的疗效相对较差[11]。尽管泛基因型的药物在逐渐普及，但对于不同的基因型，8～12周的治疗疗程也得到了更多的研究证实[12]。HCV基因型仍然是可靠且重要的临床治疗参考指标，对制定患者的疗程、预测疗效及判断预后均具有重要的临床意义。本研究显示，基因1b型是四川德阳地区最主要的类型，这对于本地区制定抗病毒防治方案及医保管理具有重要的参考价值。

HCV不同的基因型及其亚型，其主要的传播途径亦有差异。HCV 1 型主要经输血传播，而 3型和6型主要经静脉注射毒品(静脉药瘾)传播[13]。本研究显示，在≤40岁人群中，基因3型和6型的比例明显高于年龄>40岁的人群。上述研究结果提示可能经静脉注射毒品的人群在年轻人中更多一些，在疾病防控的方面值得重视。

2011年以前，HCV基因型从主要3种亚型(1b、2a及两者混合型)向多型(3a、3b、6a)发展[3]。聂滨等研究发现，HCV亚型仍以1b为主，6a亚型已成为第二大亚型，3b和3a亚型的构成比呈增加趋势，其他亚型也有明显增加趋势[14]。而本研究中，随着时间的推移，基因1b型在2013到2018年间无明显的变化，而到了2019年，1b型明显增加，其他基因型较前几年有所降低，与上述研究有一定的差异。本研究提示，本地区通过积极的疾病防控知识的宣传及规范的管理，可能经静脉注射毒品的人群有逐渐减少的趋势。

本地区HCV基因型以1b型占绝对优势，明显高于目前国内现有报道的文献的水平，而其他基因型明显低于国内现有报道水平，这为制定本地区HCV疾病的防控策略及医保政策提供了参考。