医院制剂银黄解毒消肿胶囊急性毒性试验

罗纯清，王 兴，罗黎霞，贺 灿，陈 可，谢嘉驰，易华平

(湘潭市中医医院，湖南 湘潭 411100)

银黄解毒消肿方为湘潭市中医医院的临床经验方，由牡丹皮、赤芍、大黄、知母、连翘、山银花、黄连等药味组成，功专凉血解毒、散结消肿，多用于热毒瘀血之急喉痹、疔痈疮疖等的治疗。我院临床一直以协定处方“外科一号方”中药汤剂的形式广泛应用。因中药汤剂需要临时煎煮，费时费力、不易保存、不便携带，故拟按相关技术原则将其开发成医院制剂-银黄解毒消肿胶囊[1]。胶囊剂型具有剂量更准确、方便携带、美观、掩盖不良气味等优势。急性毒性试验即单次给药毒性试验，其对初步阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义，并能提供一些与人类药物过量所致急性中毒相关的信息[2]。本研究根据相关技术指导原则，观察ICR小鼠经口灌服银黄解毒消肿胶囊后出现的急性毒性反应和死亡情况，并预测人体用药过量时可能出现的毒性反应，初步观察其用药安全性，为其安全性评价奠定基础。

1 材料与试剂

1.1 动物

SPF级ICR小鼠40只，雌雄各半，体质量范围：18.2～22.0 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2011-0003。每笼5只进行饲养，饲养室温度：21.4～23.9 ℃，湿度：42.3%～59.8%，换气次数：15～20次/h，12 h/12 h交替照明，动物检疫合格、适应环境饲养后进行称重、分组和给药。

1.2 试药

银黄解毒消肿胶囊(自制，取胶囊内容物，含量：5.34 g生药量/g，批号：20131110)；羧甲基纤维素钠(CMC-Na，天津市恒兴化学试剂制造有限公司，批号：20121222)。

1.3 仪器

TP-1200C型电子天平(湘仪天平仪器设备有限公司)。

2 方法

2.1 剂量设置

由于药物浓度的限制，本试验采用最大浓度0.47 g干膏/mL，按累积剂量200.784 g生药/kg，当日给药2次。给药前禁食12 h以上，6 h后进行第2次给药，具体见表1。

表1 试验剂量及分组设计

2.2 药液的配制

称取银黄解毒消肿胶囊内容物14.1 g，加0.5% CMC-Na溶液适量，搅拌混匀，后定容至30 mL，即得0.47 g干膏/mL的药液。

2.3 急性毒性最大耐受量法试验

选择检疫合格的SPF级ICR小鼠40只，雌雄各半，按性别体重采用区段随机方法分为两组，每组20只，分别为溶媒对照组和银黄解毒消肿胶囊组。给药前禁食12 h以上，以40 mL/kg的剂量经口灌胃给予相应供试品。银黄解毒消肿胶囊累积剂量为200.784 g生药/kg，分两次给药，间隔6 h。给药当天，尤其在给药后0～4 h内密切观察并记录各组动物的中毒表现和特点、毒性反应出现及恢复时间以及死亡情况等。然后每天观察2次，即上、下午各1次，连续观察14天。分别于给药前及给药后第7天、第14天，使用电子天平对小鼠体质量进行称量。所有小鼠在试验结束后腹腔注射戊巴比妥钠麻醉处死，并予以大体解剖，肉眼观察脏器的位置、大小、色泽、粘连等情况，并检查脏器表面和切面的质地、积液及肿瘤等异常改变。在试验过程中若有非计划死亡的动物(包括濒死动物)，均应进行大体解剖。

2.4 观察指标

小鼠一般活动状况；中毒症状及死亡情况；体质量变化；大体解剖检查。

2.5 统计学分析

3 结果

3.1 小鼠一般活动状况

给药前和14天观察期间，溶媒对照组和银黄解毒消肿胶囊组小鼠自主活动如常，未见异常和死亡现象。

3.2 小鼠中毒症状及死亡情况

整个试验期间未见小鼠异常及死亡现象。

3.3 体质量变化情况

分别于给药前、给药后第7天和第14天称重，结果与溶媒对照组比较，银黄解毒消肿胶囊组小鼠体重变化无显著性差异，且体质量增长在正常范围内，说明经口灌服银黄解毒消肿胶囊对ICR小鼠体质量增长无明显影响，具体见表2、表3、表4。

表2 银黄解毒消肿胶囊对小鼠体质量的影响

表3 银黄解毒消肿胶囊对雌性小鼠体质量的影响

表表4 银黄解毒消肿胶囊对雄性小鼠体质量的影响

3.4 大体解剖检查结果

两组小鼠各器官表面和切面均未见明显异常情况。

4 讨论

急喉痹即现代医学所指的急性咽炎，是指咽黏膜、黏膜下及其淋巴组织的急性炎症，临床上常表现为咽部的红肿热痛和咽部干痒等[3]。风热痰学说已成为现代急喉痹病因学说的主流，并形成了广泛的共识[4]。我院医生在临床实践中发现急喉痹多属实证热证，其病因病机多为外邪侵袭，上犯咽喉或肺胃热盛，上攻咽喉。银黄解毒消肿胶囊处方来源于我院医生的临床长期实践，并以协定处方的形式在院内使用多年，疗效肯定。

本课题组在前期已对银黄解毒消肿胶囊的抗炎镇痛作用及其对急性咽炎模型大鼠的治疗作用进行了研究，显示其具有较好的治疗作用。本试验在肯定其疗效的前提下，对该制剂的安全性进行评价。结果在本试验条件下，ICR小鼠经口灌胃给予银黄解毒消肿胶囊(0.47 g干膏/mL)，最大剂量40 mL/kg，每天给药2次(累积剂量为200.784 g生药/kg)，对其一般活动状况和体质量增长无明显影响，未见明显急性毒性反应。根据《中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则》[5]，计算小鼠最大耐受药物倍数，以耐受人临床用量的100倍以上为安全，而本试验中小鼠最大耐受药量相当于70 kg成人临床拟用量的627倍，提示银黄解毒消肿胶囊口服用药安全性较高。