新型冠状病毒肺炎患者的临床特征与实验室结果相关性分析

谭婷婷，陈雨欣，徐志晔，李雷，宁明哲，夏永泉，高晓雷，沈瀚(南京大学医学院附属鼓楼医院 .检验科，.影像科，南京 210008)

新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019，COVID-19)是一种由新型冠状病毒(2019-nCoV)感染所致的急性呼吸道传染病[1]。该病主要通过呼吸道飞沫和密切接触等传播，传染性很强[2-3]。本研究回顾性分析了南京大学医学院附属鼓楼医院收治的12例COVID-19确诊病例的临床资料，并归纳总结其临床症状、影像学表现和实验室检查结果等，为早期识别诊断和隔离治疗提供参考依据。

1 材料与方法

1.1研究对象 南京大学医学院附属鼓楼医院作为南京市COVID-19防控定点医疗单位，2020年1月25日至3月15日共收治COVID-19确诊病例12例，确诊后患者即被送往南京市公共卫生医疗中心定点治疗。收集南京大学医学院附属鼓楼医院收治的COVID-19确诊病例12例作为研究对象(确诊组)，其中男性7例，女性5例。选取同期在本院呼吸科门诊就诊的且排除COVID-19的普通肺炎患者50例作为对照组，其中男性25例，女性25例。选取同期在本院体检中心体检正常的健康人50例作为健康人对照组，其中男性25例，女性25例。12例确诊患者年龄(45.92±14.60)岁，50例对照组患者年龄(39.66±14.86)岁，50例健康人对照组年龄(39.70±14.55)岁，组间差异无统计学意义。纳入标准：诊断依据国家卫生健康委员会制定的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第七版)》[4]确诊标准，核酸检测均为阳性，临床分型均为普通型。排除标准：排除感染因素明确的其他传染病、恶性肿瘤、严重心脏病和严重贫血等。收集患者的流行病学史、主要临床症状和体征、影像学检查和实验室检查结果等。

1.2主要仪器与试剂 XN-10全自动血细胞分析仪、CS-5100全自动凝血分析仪及配套试剂(日本Sysmex公司)；AU5421全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)；Cobas E 411全自动化学发光免疫分析仪、Cobas LC 480全自动荧光定量PCR分析仪及配套降钙素原(PCT)和白细胞介素6(IL-6)试剂(瑞士Roche公司)；FACS Canto Ⅱ流式细胞仪及配套试剂(美国BD公司)；新型冠状病毒特异性抗体IgM/IgG联合检测试剂盒(唐山英诺特公司)；SARS-CoV-2核酸检测试剂(江苏硕世公司)。

1.3影像学检查 采用患者就诊后首次胸部CT平扫的影像学检查结果。所用机型为飞利浦Brilliance iCT，扫描范围自胸廓入口至后肋膈角水平。

1.4实验室检查 采用患者就诊后首次实验室检查结果。新型冠状病毒特异性抗体IgM/IgG检测用胶体金法。2019-nCoV核酸检测采用实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)。反应参数：逆转录50 ℃ 30 min；95 ℃ 5 min；95 ℃ 10 s，55 ℃ 40 s，45个循环，收集荧光信号。结果判读：FAM、VIC通道分别对应2019-nCoV核酸的ORF1ab基因和N基因；阳性样本参考值为FAM、VIC 2个通道同时满足待测样本循环阈值(Ct)值≤35，曲线呈S型；阴性样本参考值为2个通道结果Ct值>38或未检出；可疑：有一个通道结果Ct值≤35，其他一个通道35

2 结果

2.1流行病学资料 12例确诊患者中有5例在发病前有明确的疫区旅居史，4例有COVID-19确诊患者接触史，3例不明接触史。50例对照组患者和50例健康人对照组患者均无疫区旅居史和接触史。

2.2临床表现和影像学检查结果 确诊患者中83.33%以发热为首发症状，58.33%伴有咳嗽，少数伴有肌肉酸痛、咳痰、乏力、咽喉痛、流涕等症状。CT平扫结果显示，12例确诊患者均有肺部异常表现，异常率高于对照组(70.00%)，差异有统计学意义(P<0.05)。大部分患者的CT图像表现为斑片影(50.00%)和磨玻璃影(75.00%)，少数为间质改变和肺实变。其中，确诊患者病灶分布范围≥2个肺叶者(83.33%)高于对照组(28.00%)，磨玻璃影(75.00%)高于对照组(38.00%)，差异有统计学意义(P<0.05)。除了流涕、间质改变和实变等，确诊患者的各项临床表现和CT表现都高于健康人对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 临床表现和影像学检查结果[n(%)]

2.3实验室检查结果 与健康人对照组相比，确诊患者主要表现为WBC和CD3+T细胞计数降低，D-二聚体、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、C反应蛋白(CRP)和核酸Ct值升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，确诊患者的WBC、中性粒细胞计数(NEU)、PCT、IL-6、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞计数明显降低，BUN、Cr和核酸Ct值升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 实验室检查结果及对比情况或M(P25，P75)]

2.4核酸Ct值与其他指标的相关性分析 经Pearson相关性分析，核酸Ct值与LYM呈正相关(r=0.632，P<0.05)，核酸Ct值与CRP呈负相关(r=-0.676，P<0.05)。见图1、2。

图1 核酸Ct值与LYM呈正相关

图2 核酸Ct值与CRP呈负相关

3 讨论

2019-nCoV主要通过呼吸道飞沫和密切接触等传播，少数可经气溶胶和消化道等传播，传染性很强，人群普遍易感[2-3,6]。目前尚无特效的COVID-19疫苗和药物，只有早发现、早诊断、早隔离治疗，才能有效避免疫情扩大，降低病死率。在本研究中，12例确诊患者中有5例在发病前有明确的疫区旅居史，4例有确诊患者接触史，50例对照组和正常组患者均无疫区旅居史和接触史，提示流行病学史调查对于早期筛查COVID-19至关重要。

本研究显示COVID-19临床症状多样，83.33%确诊患者以发热为首发症状，58.33%患者伴有咳嗽，少数伴有肌肉酸痛、乏力等全身症状，与文献报道结果相近[7-8]。确诊患者的咳痰、咽喉痛和流涕等上呼吸道症状并不多见，提示2019-nCoV的靶点可能位于下呼吸道，上呼吸道病毒含量相对较低，因此大部分确诊患者仅有干咳症状。研究报道，2019-nCoV通过刺突糖蛋白入侵宿主细胞，与血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2，ACE2)相结合，该靶点广泛存在于肺组织[9]。胸部CT平扫结果与临床症状密切相关。本研究中12例确诊患者均有肺部异常表现，大部分患者的CT图像表现为多发斑片影(50.00%)和磨玻璃影(75.00%)，其内部纹理可呈网格样改变，少数为间质改变和肺实变，符合病毒性肺炎CT影像学特征。确诊患者病灶分布范围≥2个肺叶(83.33%)和磨玻璃影(75.00%)明显高于对照组，提示COVID-19多为双肺感染，并多存在磨玻璃影改变，有助于辅助诊断COVID-19和评估病情。

淋巴细胞亚群分析是检测机体免疫功能的重要指标之一，对辅助诊断、观察疗效及评估预后等均有重要意义。本研究发现COVID-19确诊患者的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞计数与对照组相比明显降低，CD3+T细胞与健康人对照组相比明显降低，而B淋巴细胞和NK细胞基本正常，提示2019-nCoV病毒可能主要攻击T淋巴细胞，使其数量减少，影响细胞免疫，导致机体免疫功能降低[8,10]。确诊患者的D-二聚体、ALT、LDH、BUN、Cr和CRP与健康人对照组相比明显升高，提示2019-nCoV可能对全身多个脏器均有损害，使全身炎症水平增加。在本研究中，确诊患者的2019-nCoV特异性抗体IgM/IgG均为阴性，该结果阳性率不高的原因可能为患者正处于发病早期，血清中尚未出现抗体或抗体浓度尚未达到检测限。由于上述患者确诊后立即转入定点医院集中治疗，无法进一步获得血清学抗体的更多数据，有条件的医院可以以此为参考进行动态检测，以达到辅助诊断的目的。本研究还发现核酸Ct值与LYM呈正相关，与CRP呈负相关，提示核酸Ct值越小，病毒载量越大，淋巴细胞受攻击数量越多，炎症水平也越高。与对照组相比，确诊患者的WBC、NEU、PCT、IL-6、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞计数明显降低，BUN、Cr和核酸Ct值明显升高，可在临床上与普通肺炎鉴别诊断时提供参考依据。

2019-nCoV病毒核酸检测是诊断COVID-19的金标准，但由于易受到局部病毒载量不足或取材质量不高等因素的影响，可能存在一定的假阴性，部分患者需要多次检测才能确诊[11]。因此，如何进一步提高确诊率是目前亟待解决的关键问题。一方面，必要时可采集肺泡灌洗液进行核酸检测[12]；另一方面，结合流行病学史、临床症状表现、典型胸部CT影像和实验室检查结果等综合判断，可大幅度提高临床诊断效能，降低漏诊率，更好地实现筛查目的。