何金标
(武强县农业农村局,河北武强053300)
2020 年3 月,我县一鸡场34 日龄部分病鸡不表现症状突然死亡,部分病鸡表现出精神沉郁、呆立、采食量下降、饮水量增加、呼吸困难、下痢等症状。 通过病理解剖,结合实验室检测, 鉴定该养殖场病原菌为大肠杆菌, 根据药敏试验结果对该养殖场进行科学用药指导, 治愈率达到96%,有较好的治疗效果。
鸡大肠杆菌病是由鸡致病性大肠杆菌(APEC)入侵机体所引发的传染性疾病, 其病原大肠杆菌属于条件致病菌。 由于其病原大肠杆菌的特殊性 (有多种致病性以及数量庞大的血清型) 造成该病拥有多种病型, 其中主要包括心包炎、 肝周炎、腹膜炎、气囊炎、败血症等。 其主要感染幼龄畜禽, 在全国各地均有该病的发生报道, 发病率和致死率都很高。 本病常会继发或并发某些其他的传染病(如新城疫、 禽流感等),使本病在临床上的表现更加复杂多样, 从而造成本病的治疗变得十分困难。 近年来,随着我国养殖业的发展,养殖规模越来越大,鸡大肠杆菌病在我国的流行状况呈现日益严重的趋势。 养殖场中一旦发病常会引起大规模传染及死亡, 给鸡场造成严重的经济损失。 由于近年来抗生素的滥用, 大肠杆菌的耐药性十分严重, 因此药敏试验是最科学的使用抗生素的方式。
鸡传染性支气管炎病毒RTPCR 试剂盒、 禽流感病毒RT-PCR试剂盒、 新城疫病毒RT-PCR 试剂盒购自北京天恩泽基因科技有限公司, 普通琼脂培养基、 麦康凯培养基、 药敏片购自北京索莱宝科技有限公司。
对病鸡进行解剖检查,并观察病理变化。
1.3.1 病毒学诊断
选取鸡的脾脏、 肝脏、 气管样本,提取核酸后,按照试剂盒的具体操作步骤进行PCR 检测。
1.3.2 细菌学诊断
无菌环境下, 用接种环蘸取病料在普通琼脂培养基上进行划线培养,37℃培养14 小时, 挑取单菌落在麦康凯培养基上进行纯化培养。
挑取纯化后的细菌进行革兰氏染色,通过显微镜进行形态观察。
将纯化后的细菌涂布在普通培养基上, 采用K-B 纸片扩散法进行药物敏感性试验, 判定标准参照CLSI2018 标准。
参照药物敏感性实验结果用药,并计算其治愈率。
部分病鸡突然死亡不表现出症状;部分病鸡表现出呆立;饮食方面表现出不食或采食量下降;经常口渴,饮水量大量增加;精神沉郁;羽毛蓬松杂乱;呼吸轻重不一,表现出呼吸困难,鼻部和口部有黏液分泌;眼炎,眼结膜充血、出血;腹泻轻重不一,排黄白色稀粪。
心包膜增厚变浑浊不透明,有心包积液,严重的甚至会出现纤维素样渗出物并与心肌黏连在一起(如图1b);肝脏瘀血呈暗红色并可见不同程度的肿大, 且表面包有一层白色浑浊的纤维素性膜 (如图1d);气囊浑浊变厚,表面有纤维素样渗出物;小肠弥漫性出血,;腹水并可见有纤维素样渗出物; 肾脏变化明显, 较平时明显肿大且有花斑(如图1a)。 脾脏也有肿大且被膜下出血(如图1c)。
2.3.1 病毒学检测结果
经PCR 检测,病料中未检出新城疫病毒、禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒。
2.3.2 细菌学检测结果
在麦康凯培养基中形成的是表面光滑、边缘整齐、湿润的红色圆形菌落,革兰氏染色镜检,菌体呈红色短杆状,两端钝圆,与大肠杆菌的形态特征一致。
2.3.3 药敏试验结果
选取青霉素G、氨苄西林、头孢唑林、庆大霉素、强力霉素、链霉素、四环素、林可霉素、卡那霉素、恩诺沙星进行药物敏感性试验,其中对恩诺沙星最为敏感。 试验结果见表1。
表1 药敏试验结果
恩诺沙星添加饲喂,经用药后, 精神状态好转, 采食量增加,腹泻情况明显减少,死亡数开始下降, 用药第6 天鸡群不再死亡, 最后鸡群从发病到治愈共死亡259 只, 该鸡场共6400 只鸡,治愈率为96%。
恩诺沙星杀菌能力强, 且该药抗菌机制与其他抗菌药有显著不同,不易产生交叉耐药性。 2016 年,Su 等从我国南方地区分离3456 株大肠杆菌, 其耐药率达到了89.1%,可见大肠杆菌耐药的严重性。 通过药敏试验来对抗生素进行合理选择, 可以很大程度上降低大肠杆菌的耐药性。
大肠杆菌是条件致病菌, 当受感染的病鸡机体免疫力下降或受到各种应激因素影响如恶劣的饲养环境,或过冷过热,鸡群长期营养不良时都会造成本病的发生。 所以,预防本病首先应该加强饲养与管理。 第一, 时刻注意鸡舍的通风是否良好以及保温效果的好坏, 从而避免因通风不良或温度的突变而引发疾病; 第二, 维持鸡舍的卫生环境良好,并注意饲养密度。 密度过高不仅会导致鸡舍空气质量的下降, 更重要的是当疾病发生时饲养密度过大会使疾病快速大范围的传播。 第三,采用科学的饲料配比, 使鸡营养状况良好, 避免鸡群因一种或多种营养物质缺乏造成营养不良而引发该病; 第四, 定时对鸡舍进行统一消毒,清除病原。 第五,做好鸡的免疫疫苗接种, 应用鸡大肠杆菌病蜂胶灭活疫苗, 颈部皮下注射,1 日龄以上的健康鸡每只注射0.5 毫升,免疫期4 个月,提前预防该病的发生。
结合临床症状、 病理剖检和实验室检测结果, 确定该鸡场的病原为大肠杆菌,通过药敏试验结果,对该鸡场使用恩诺沙星进行治疗,治愈率为96%。