ELISPOT检验对活动性肺结核患者的临床价值

王桂芳

(平邑县结核病防治所，山东 平邑 273300)

近年来，肺结核仍是较为严重的人类传染病之一，受到了全世界各国的重点关注。肺结核治疗的关键在于准确、快速的诊断。目前，常用的临床诊断方法为痰结核分枝杆菌检验、影像学分析以及结核菌素试验(PPD)等，其中最有效的是结核分枝杆菌检验，但此法培养时间过长，通常需2～8周，有时会出现培养失败的现象。为此，本文采用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)诊断结核病，观察其临床价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年3月—2018年3月来本院就诊的活动性肺结核患者82例，其中男54例，女28例；年龄18～75岁，平均(46.5±5.32)岁；临床表现：78例伴随咳嗽咳痰，18例伴随咯血，8例出现呼吸不畅，30例出现发热；合并症：伴矽肺6例、AIDS10例、肾病综合征3例、糖尿病4例，肺癌1例。检验准则：胸痛、呼吸不畅、发热、咯血现象显著者；通过临床诊断，加之影像学检查确诊者；抗结核治疗有效者。排除标准：痰镜检、影像检查以及结核菌培养都呈阴性的患者。

1.2方法 分别对入选患者进行ELISPOT检验以及PPD检验。ELISPOT检验：取患者外周全血样本，然后再借助肝素进行抗凝处理；再精确量取3～5 ml经过处理的全血，在常温环境下进行检测。血液标本采集后务必在24 h之内完成检验，整个检验流程务必严格按照ELISPOT检验试剂盒操作标准进行。PPD试验：于患者左前臂屈侧上、中1/3交界处皮内缓缓注射PPD 5 U(0.1 ml)，形成局部皮丘。实时监测反应情况，通常观测周期为72 h。

1.3指标评定 ELISPOT检验：阳性判定，存在阴性对照孔的显色点数≤4个，同时总显色点数和阴性显色点数的差值≥4个；阴性判定，存在阴性对照孔的显色点数>7个，同时总显色点数为2倍于阴性对照孔显色点数。PPD判定：局部硬结直径<5 mm为阴性，5～9 mm为一般阳性(+)，10～19 mm为中度阳性(++)，≥20 mm或不足20 mm但有水疱或坏死为强阳性(+++)。

2 结果

ELISPOT检验：82例患者中，阳性79例，阴性3例，阳性率为96.34%。PPD试验：82例患者中，阳性66例，阴性16例，阳性率达80.49%。两者比较差异有统计学意义(χ2=8.57，P=0.003)。

3 讨论

在实际临床中，绝大部分结核病人均没有特异性症状，也没有相应的影像学特征，诊断极其困难[1-3]。目前，临床诊断肺结核的常用方法为痰结核分枝杆菌检查以及PPD试验等。最常用的方法为PPD试验，但是此法仅能检测出是否存在结核分枝杆菌感染情况，而无法对自然感染以及卡介苗接种的免疫反应进行有效区分。现代病理学研究已经证实，当结核分枝杆菌被清除之后，致敏T淋巴细胞也会随之不见。ELISPOT检验法就是凭借酶联免疫斑点法，通过检测患者体内的特异性T细胞来精确诊断结核病，结果显示，其阳性率达96.34%，远高于PPD的80.49%。

总之，ELISPOT检验法能够有效提高结核杆菌检测的阳性率，具有较高的临床应用价值。